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Snail1基因沉默對喉鱗癌Hep-2細胞緊密連接蛋白表達及遷移能力的影響

發(fā)布時間:2018-04-11 23:38

  本文選題:Snail + 基因沉默。 參考:《生物醫(yī)學工程學雜志》2017年04期


【摘要】:本文為研究Snail1基因?qū)眵[癌細胞株Hep-2緊密連接蛋白表達及遷移能力的影響,將含有Snail1基因的短發(fā)夾RNA(Sh-RNA)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染喉鱗癌細胞株Hep-2,培養(yǎng)出可穩(wěn)定傳代的Snail1基因沉默的細胞(命名為Sh-snail1細胞)。課題組以蛋白免疫印跡技術檢測緊密連接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5的表達是否發(fā)生變化。然后設計傷口愈合實驗檢測其遷移能力,再以蛋白免疫印跡技術檢測與細胞遷移能力密切相關的Rho GTP酶家族重要成員Rho A、Cdc42蛋白的表達變化。結果表明,Sh-snail1細胞緊密連接關鍵蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5表達明顯上調(diào),遷移能力明顯減弱,且Rho A、Cdc42蛋白表達下調(diào)。該研究表明,喉鱗癌Hep-2細胞通過下調(diào)Snail1基因的表達使細胞間連接更加緊密,同時抑制Hep-2細胞的遷移能力,下調(diào)Rho A、Cdc42蛋白的表達。本文研究結果證實,Snail1基因與Hep-2細胞轉(zhuǎn)移過程中的細胞間緊密連接打開以及細胞遷移能力增強密切相關,為靶向治療喉鱗癌提供分子機制的研究依據(jù)。
[Abstract]:In order to study the effect of Snail1 gene on the expression and migration ability of Hep-2 tight junction protein in laryngeal squamous cell carcinoma cell line,The plasmid containing Snail1 gene was transfected into laryngeal squamous cell carcinoma cell line Hep-2, and stable passaged Snail1 gene silenced cells (named Sh-snail1 cell line) were cultured.The expression of tight junction protein ZO-1 Occludin-Claudin-5 was detected by Western blot.Then the wound healing experiment was designed to detect its migration ability, and then the expression of Rho AmonCdc42, an important member of the Rho GTP enzyme family, which was closely related to the cell migration ability, was detected by Western blot.The results showed that the expression of tight junction protein ZO-1 Occludin-Occludin-Claudin-5 was up-regulated, the migration capacity was decreased, and the expression of Rho AcanCdc42 protein was down-regulated in Sh-snail1 cells.This study showed that Hep-2 cells of laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC) down-regulated the expression of Snail1 gene and inhibited the migration of Hep-2 cells, and down-regulated the expression of Rho AtoCdc42 protein.The results of this study confirm that the Snail1 gene is closely related to the opening of tight intercellular junctions and the enhancement of cell migration in the process of Hep-2 cell metastasis, which provides a molecular basis for the targeted treatment of laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC).
【作者單位】: 成都醫(yī)學院檢驗醫(yī)學院;四川大學基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院生物醫(yī)學工程學院;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(11372203,31670960)
【分類號】:R739.65

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本文編號:1738203

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