發(fā)布時間：2018-04-03 15:48

  本文選題：鼻咽癌　切入點(diǎn)：放療反應(yīng)　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2017年博士論文

【摘要】：第一章鼻咽癌放療反應(yīng)相關(guān)的醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)標(biāo)志鼻咽鏡下取活檢獲得組織病理學(xué)診斷是鼻咽癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。放射治療是目前原發(fā)鼻咽癌首選和最有效的治療手段,但仍有約四分之一的患者對放射治療不敏感。如若能夠在治療之前對患者對放療的反應(yīng)進(jìn)行預(yù)測評估,則有助于針對不同患者制定個體化治療方案,改善治療效果。因此,發(fā)現(xiàn)、鑒定鼻咽癌放療敏感性相關(guān)的醫(yī)學(xué)生物學(xué)標(biāo)志,成為這一領(lǐng)域重要的研究課題。本項(xiàng)研究首先歸納分析了 2014-2016年期間中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院收治的100例鼻咽癌患者的臨床資料,旨在探討基于窄帶成像(narrow band imaging,NBI)技術(shù)的鼻咽鏡下腫瘤表面微血管顯露情況與放療后腫瘤消退情況的關(guān)系。隨后采用基因芯片的方法對兩組不同放療反應(yīng)的鼻咽癌(共20例)的腫瘤組織中差異表達(dá)microRNA進(jìn)行篩選,并預(yù)測其靶基因且進(jìn)行功能分析;進(jìn)而采用新一代測序技術(shù)對10例鼻咽癌腫瘤和癌旁組織進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序分析,篩選差異表達(dá)基因并進(jìn)行功能分析。結(jié)合兩種方法分析不同放療反應(yīng)組間差異表達(dá)分子功能與血管生成的關(guān)系。另外,探討了 EB病毒基因在鼻咽癌腫瘤組織中的表達(dá),且分析其表達(dá)情況與鼻咽癌放療反應(yīng)的關(guān)系。在100例鼻咽癌病例中分析發(fā)現(xiàn),NBI內(nèi)鏡下腫瘤表面微血管顯露情況與放療敏感性呈顯著正相關(guān)(p=0.006,X2=19.268),即微血管顯露評級越高,腫瘤放療后消退越快�；谶@一發(fā)現(xiàn),采用免疫組織化學(xué)的方法檢查了 89例鼻咽癌腫瘤組織中VEGF、EGFR和Ki67蛋白的表達(dá),結(jié)果顯示其表達(dá)情況與NBI內(nèi)鏡下腫瘤表面血管顯露相關(guān)。采用芯片技術(shù)分析了放療敏感和放療不敏感的鼻咽癌各10例腫瘤和癌旁組織的microRNA表達(dá)譜,在腫瘤與癌旁組和放療高敏感與放療低敏感組分別篩選得到了 78個和41個差異表達(dá)microRNA。使用3個公共數(shù)據(jù)庫miRBase,TargetScan和PicTar進(jìn)行靶基因預(yù)測。對腫瘤和癌旁組,要求在全部3個數(shù)據(jù)庫中預(yù)測到其靶基因;對于放療高敏感和低敏感組,要求至少在兩個數(shù)據(jù)庫中預(yù)測到其靶基因。進(jìn)而采用Panther軟件分別分析其靶基因的生物學(xué)功能,結(jié)果顯示Angiogenesis通路均處在腫瘤和癌旁組、放療高敏感和低敏感組靶基因功能富集結(jié)果中。這說明不同放療敏感性的鼻咽癌組織中差異表達(dá)的microRNA預(yù)測得到的靶基因功能富集主要與血管生成有關(guān)。采用新一代測序技術(shù)對10例鼻咽癌腫瘤和癌旁組織進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序,在鼻咽癌癌旁與腫瘤組之間差異表達(dá)的基因中,發(fā)現(xiàn)上調(diào)的基因有3432個,下調(diào)的基因有4453個;在腫瘤表面微血管顯露與未顯露組之間差異表達(dá)的基因中,發(fā)現(xiàn)上調(diào)的有379個,下調(diào)的基因有392個;在腫瘤放療高敏感和放療低敏感組之間差異表達(dá)的基因中,發(fā)現(xiàn)上調(diào)的有115個,下調(diào)的基因有132個。三種不同組合比較共有105個共有的差異基因。信號通路富集分析顯示,Jak-STAT通路和VEGF等信號通路與鼻咽癌的放療反應(yīng)相關(guān)。VEGF通路在腫瘤血管生成過程中扮演重要角色,這與臨床觀察的腫瘤微血管顯露情況相一致。另外,轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)顯示,EB病毒編碼基因在鼻咽癌腫瘤組織中特異性的高表達(dá),且EBER1/2在鼻咽癌病例中的表達(dá)情況可能與腫瘤放療反應(yīng)相關(guān)。上述研究資料提示:NBI鼻咽鏡下觀察到的腫瘤微血管顯露情況可預(yù)示放療后腫瘤消退情況;不同放療反應(yīng)的鼻咽癌差異表達(dá)microRNA譜和轉(zhuǎn)錄組差異表達(dá)基因其生物學(xué)功能與血管生成有關(guān),EB病毒基因也在鼻咽癌放療后腫瘤消退過程中發(fā)揮作用。NBI內(nèi)鏡下鼻咽癌腫瘤表面的微血管顯露情況,以及腫瘤組織中宿主和EB病毒的異常表達(dá)基因(如VEGF通路和Jak-STAT通路,等),有可能作為鼻咽癌放療反應(yīng)相關(guān)的醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)標(biāo)志,在治療前對放療后腫瘤消退情況進(jìn)行預(yù)測和評估。第二章OLC1基因在膀胱癌中異常表達(dá)及其醫(yī)學(xué)生物學(xué)意義本實(shí)驗(yàn)室前期工作發(fā)現(xiàn)并鑒定的肺癌相關(guān)基因OLC1在多種惡性腫瘤中表達(dá)異常,但目前尚未見OLC1與膀胱癌的研究報道。本項(xiàng)研究首先分析了 OLC1在膀胱癌中的表達(dá)情況,隨后分析了 OLC1基因異常表達(dá)的臨床意義,繼而進(jìn)一步探討了該基因在膀胱癌細(xì)胞中的生物學(xué)功能。在mRNA水平,RT-PCR分析結(jié)果顯示,OLC1基因在膀胱癌患者的腫瘤組織中的表達(dá)顯著高于正常膀胱黏膜組織(p0.001),且在肌層浸潤性膀胱癌(41/70)中表達(dá)高于非肌層浸潤性癌(29/70)(p0.05),在吸煙患者(24/70)中表達(dá)高于非吸煙患者(46/70)(p0.01);在蛋白質(zhì)水平,免疫組織化學(xué)分析顯示OLC1在37.7%(43/114)膀胱癌組織中高表達(dá),在55例肌層浸潤性癌中,52.7%(29例)呈高表達(dá);而在59例非肌層浸潤性癌中,23.7%(14例)呈高表達(dá)。分析發(fā)現(xiàn),在膀胱癌腫瘤組織中,OLC1的蛋白表達(dá)水平與腫瘤的病理學(xué)分期(p0.001),以及患者的吸煙史(p=0.022)顯著相關(guān)。對106例隨訪資料完整的膀胱癌患者病例信息進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)39例OLC1高表達(dá)的膀胱癌患者無瘤生存(disease free survival,DFS)中位數(shù)為49個月,67例OLC1低表達(dá)的患者DFS中位數(shù)為64個月,統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中OLC1蛋白表達(dá)的高低與患者5年無瘤生存率無顯著相關(guān)性(39.5%vs56.7%,p=0.156);39例OLC1高表達(dá)的膀胱癌患者總生存(overall survival,OS)中位數(shù)為110個月,67例OLC1低表達(dá)的患者OS中位數(shù)為95個月。OLC1高表達(dá)患者的5年總生存率與OLC1低表達(dá)患者的5年總生存率有顯著差異(79.5%vs 88.1%,p=0.040)。合并分析OLC1表達(dá)和吸煙因素,在吸煙患者中有22例OLC1高表達(dá),34例OLC1低表達(dá),五年總生存率分別為71.4%和85.7%(p=0.032);吸煙人群中OLC1高表達(dá)的患者其五年總生存率顯著低于非吸煙切OLC1低表達(dá)的患者(p=0.010)。體外實(shí)驗(yàn)顯示,穩(wěn)定表達(dá)外源性O(shè)LC1基因能夠增加膀胱癌細(xì)胞T24和5637的增殖能力,同時也能夠增強(qiáng)其侵襲能力。上述研究資料提示,OLC1基因在膀胱癌中存在異常表達(dá),且能夠增加膀胱癌細(xì)胞的增殖和侵襲能力,同時其異常表達(dá)可能與膀胱癌患者,尤其是在吸煙膀胱癌患者的預(yù)后相關(guān)。
[Abstract]:In this study , the expression of VEGF , EGFR and Ki - 67 in nasopharyngeal carcinoma ( NPC ) patients with nasopharyngeal carcinoma ( NPC ) was analyzed by means of immunohistochemical method . The expression of OLC1 gene in bladder cancer was significantly higher than that in non - smoking patients ( P < 0.01 ) . The expression of OLC1 in bladder cancer was significantly higher than that in non - smoking patients ( P < 0.01 ) . In vitro experiments showed that stable expression of exogenous OLC1 gene could increase the proliferative capacity of bladder cancer cells 24 and 5637 and increase the invasive ability of bladder cancer cells . The results suggested that the expression of OLC1 gene in bladder cancer could increase the proliferation and invasion ability of bladder cancer cells , and its abnormal expression may be related to the prognosis of bladder cancer patients , especially in patients with bladder cancer .

【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R739.63

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本文編號：1705870