本文選題：角膜基質(zhì)　切入點：基質(zhì)金屬蛋白酶-8　出處：《鄭州大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的探討MMP-8、MMP-9對角膜混濁度的影響;比較MMP-8及MMP-9對角膜基質(zhì)膠原的破壞作用。方法選取角膜正常的C57BL/6J小鼠8只,共16只角膜,經(jīng)腹腔麻醉后脫頸椎法處死,2 mm角膜環(huán)鉆取中央角膜,用于體外實驗。將角膜隨機分4組,MMP-8組、MMP-9組為實驗組,Assay Buffer組為陰性對照組,生理鹽水組為空白對照組,分別加入到含100μL的20 ng/μL MMP-8、20 ng/μL MMP-9、Assay Buffer、生理鹽水的96孔板中,36.5℃孵育24 h后取出,測定各個角膜的羥脯氨酸濃度;選取角膜正常的C57BL/6J小鼠30只,共60只角膜,用于體內(nèi)實驗。將小鼠分3組,MMP-8組、MMP-9組為實驗組,生理鹽水組為對照組,分別給予角膜基質(zhì)內(nèi)注射約10μL的20 ng/μL MMP-8、20 ng/μL MMP-9及生理鹽水,分別于注射前(0 h)及注射后4、8、12、20、24 h進行混濁度評分、二次諧波掃描角膜基質(zhì)信號強度,并于8 h、24 h分別經(jīng)腹腔麻醉后脫頸椎法處死,取角膜進行羥脯氨酸濃度測定。結(jié)果體外實驗中,實驗組角膜羥脯氨酸濃度明顯低于陰性對照組(F=451.492,P=0.000)及空白對照組(F=252.403,P=0.000),差異有統(tǒng)計學意義,MMP-8組角膜羥脯氨酸濃度明顯低于MMP-9組(F=55.184,P=0.002),差異有統(tǒng)計學意義。體內(nèi)實驗中,0 h實驗組與對照組角膜混濁度無明顯差異(χ2=0.000,P=1.000)。4、8、12、20、24 h實驗組角膜較對照組角膜明顯混濁,結(jié)果有統(tǒng)計學差異(P0.05),MMP-8組較MMP-9組角膜混濁度無明顯差異(P0.05)。0 h二次諧波掃描實驗組與對照組角膜基質(zhì)信號強度無明顯差異(P0.05)。4、8、12、20、24 h,實驗組角膜基質(zhì)信號強度均明顯低于對照組,結(jié)果有統(tǒng)計學差異(P0.05),MMP-8組與MMP-9組相比較,結(jié)果無明顯統(tǒng)計學差異(P0.05)。8 h對小鼠角膜取材進行羥脯氨酸濃度測定,實驗組角膜羥脯氨酸濃度明顯低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(F=17.877,P0.001),MMP-8組與MMP-9組相比較,結(jié)果無明顯統(tǒng)計學差異(P0.05)。24 h對小鼠角膜取材進行羥脯氨酸濃度測定,實驗組角膜羥脯氨酸濃度明顯低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(F=41.400,P0.001),MMP-8組與MMP-9組相比較,結(jié)果無明顯統(tǒng)計學差異(P0.05)。MMP-8組SHG角膜基質(zhì)信號強度與角膜混濁度臨床評分之間呈明顯負相關(guān)(rs=-0.511,P0.001),MMP-9組SHG角膜基質(zhì)信號強度與角膜混濁度臨床評分之間呈明顯負相關(guān)(rs=-0.613,P0.001)。結(jié)論MMP-8及MMP-9可降解角膜基質(zhì)中的膠原纖維,導致角膜基質(zhì)膠原纖維排列紊亂,角膜混濁度升高;體外實驗中,同一質(zhì)量濃度的MMP-9較MMP-8有更強的降解角膜基質(zhì)膠原的能力;在體實驗中,角膜基質(zhì)注射條件下,同一質(zhì)量濃度MMP-9與MMP-8降解膠原的能力無明顯差異。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of MMP-8 / MMP-9 on corneal turbidity and to compare the effect of MMP-8 and MMP-9 on corneal stromal collagen destruction. Methods eight C57BL / 6J mice with normal cornea were selected and 16 corneas were obtained. After abdominal anaesthesia, the central cornea was removed from the cervical vertebrae with 2 mm cornea for in vitro experiment. The cornea were randomly divided into 4 groups: MMP-8 group, MMP-9 group as negative control group, normal saline group as blank control group, and MMP-9 group as negative control group. 20 ng/ / L MMP-8 / 20 ng/ / L MMP-9Assay buffer containing 100 渭 L was added respectively. After incubation at 36.5 鈩，

本文編號：1612673