本文選題：鼻咽癌　切入點(diǎn)：-Aza-C　出處：《腫瘤防治研究》2016年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的研究去甲基化藥物5-氮雜胞嘧啶核苷(5-Azacytidine,5-Aza-C)對(duì)鼻咽癌細(xì)胞亞端粒區(qū)D4Z4甲基化狀態(tài)、h TERT基因表達(dá)及端粒酶活性的影響。方法常規(guī)培養(yǎng)鼻咽癌CNE,CNE1,CNE2及5-8F細(xì)胞系。5-Aza-C處理鼻咽癌細(xì)胞后,甲基化測(cè)序聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)法檢測(cè)亞端粒區(qū)D4Z4甲基化;RT-PCR檢測(cè)h TERT m RNA水平;端粒重復(fù)序列擴(kuò)增法(telomeric repeat amplifi cation protocol,TRAP)法檢測(cè)端粒酶活性。結(jié)果 5-Aza-C處理后,四種鼻咽癌細(xì)胞系的亞端粒區(qū)D4Z4序列的甲基化水平較處理前明顯下降。2.5μmol/L 5-Aza-C處理后,四種鼻咽癌細(xì)胞h TERT m RNA的表達(dá)明顯下調(diào),端粒酶活性顯著抑制。結(jié)論在鼻咽癌的發(fā)生中,亞端粒區(qū)的DNA甲基化水平紊亂起了一定的作用,去甲基化藥物5-Aza-C能下調(diào)h TERT表達(dá),抑制端粒酶活性。探討鼻咽癌細(xì)胞中h TERT表達(dá)與亞端粒區(qū)Cp G島甲基化狀態(tài)之間的關(guān)系,可能為亞端粒區(qū)染色體結(jié)構(gòu)異常在鼻咽癌發(fā)生中的作用提供深刻見(jiàn)解。
[Abstract]:Objective to study the effects of demethylated drug 5-Azacytidineine 5-Aza-Con on the expression of TERT gene and telomerase activity in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line D4Z4 methylated. Methods Nasopharyngeal carcinoma cells were treated with CNE1CNE2 and 5-Aza-C. The level of h TERT m RNA was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) of D4Z4 methylation in subtelomere region and telomeric repeat amplifi cation cation assay by telomeric repeat amplifi cation protocol TRAP.Results after 5-Aza-C treatment, the activity of telomerase was detected by telomeric repeat amplifi cation assay. The methylation level of D4Z4 sequence in subtelomere region of four nasopharyngeal carcinoma cell lines decreased significantly after treatment with 2.5 渭 mol/L 5-Aza-C, the expression of h TERT m RNA was down-regulated and telomerase activity was significantly inhibited in the four nasopharyngeal carcinoma cell lines. The demethylation drug 5-Aza-C can down-regulate the expression of h TERT and inhibit telomerase activity. The relationship between the expression of h TERT and the methylation status of subtelomere CpG island in nasopharyngeal carcinoma cells was investigated. It may provide insights into the role of chromosomal abnormalities in subtelomere regions in the development of nasopharyngeal carcinoma.
【作者單位】： 武漢大學(xué)人民醫(yī)院耳鼻咽喉—頭頸外科;湖北省恩施市中心醫(yī)院五官科;
【分類號(hào)】：R739.63

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本文編號(hào)：1604204