siRNA沉默Survivin基因?qū)Ρ茄拾〤NE-2細(xì)胞凋亡的影響
本文選題:鼻咽癌 切入點(diǎn):RNA干擾 出處:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年05期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:合成Survivin小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)序列,用于轉(zhuǎn)染人鼻咽癌細(xì)胞株CNE2,體外觀察Survivin siRNA轉(zhuǎn)染后CNE-2細(xì)胞Survivin mRNA、蛋白的表達(dá)、細(xì)胞增殖和凋亡情況。設(shè)計(jì)合成3段特異性Survivin siRNA,用siRNA轉(zhuǎn)染鼻咽癌CNE-2細(xì)胞株,設(shè)置空白對(duì)照和陰性對(duì)照組,通過(guò)Real-time PCR檢測(cè)CNE-2細(xì)胞的Survivin mRNA相對(duì)表達(dá)量,Western blotting檢測(cè)Survivin蛋白的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)及原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞凋亡情況。siRNA轉(zhuǎn)染CNE-2細(xì)胞后,siRNA 1組和3組mRNA表達(dá)抑制率分別為(68.46±7.94)%、(49.44±3.78)%,siRNA 2組結(jié)果無(wú)顯著差異(p0.05)。蛋白相對(duì)表達(dá)量只有siRNA 1組降低,表達(dá)抑制率為(30.61±2.47)%,流式細(xì)胞術(shù)和原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)轉(zhuǎn)染后CNE-2細(xì)胞數(shù)量明顯降低,細(xì)胞凋亡比例增高。siRNA干擾沉默Survivin基因能有效抑制CNE-2細(xì)胞的增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。本研究為Survivin基因可能作為治療鼻咽癌的一個(gè)靶點(diǎn),為Survivin基因沉默可能是治療鼻咽癌高效的途徑提供體外實(shí)驗(yàn)支持。
[Abstract]:Synthesis of Survivin small interfering RNA (siRNA small interfering RNA) sequence for transfection of human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE2, observe the Survivin siRNA transfected CNE-2 cells after Survivin mRNA, protein expression, cell proliferation and apoptosis. The design and synthesis of 3 specific Survivin siRNA, transfected with siRNA nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2, and blank control the negative control group, detected by CNE-2 cell Real-time PCR Survivin mRNA relative expression, detect the expression of Survivin protein Western blotting, flow cytometry and TUNEL positive cells after transfection the apoptosis of.SiRNA after transfection into CNE-2 cells, the expression of siRNA 1 group and 3 group mRNA inhibition rate were (68.46 + 7.94)%. (49.44 + 3.78)%, the 2 groups showed no significant difference in siRNA (P0.05). The relative expression of siRNA protein only 1 groups decreased, expression inhibition rate was (30.61 + 2.47)%, flow cytometry and in situ fine The number of CNE-2 cells after transfection was detected by cell apoptosis significantly decreased, apoptosis increased ratio of.SiRNA interference silencing Survivin gene can effectively inhibit the proliferation of CNE-2 cells and induce cell apoptosis. In this study, Survivin gene may serve as a target for the treatment of nasopharyngeal carcinoma, Survivin gene silencing may be effective way for the treatment of nasopharyngeal carcinoma in vitro to provide support.
【作者單位】: 海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院;海南省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心海南省細(xì)胞與分子遺傳轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:海南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(20158359)資助
【分類(lèi)號(hào)】:R739.63
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,本文編號(hào):1603739
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