共培養(yǎng)的角膜上皮細(xì)胞誘導(dǎo)人羊膜上皮細(xì)胞分化為角膜上皮樣細(xì)胞
發(fā)布時(shí)間:2018-03-11 14:36
本文選題:羊膜上皮細(xì)胞 切入點(diǎn):角膜 出處:《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2017年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討體外培養(yǎng)人羊膜上皮細(xì)胞(HAEC)并定向誘導(dǎo)分化為角膜上皮樣細(xì)胞的可行性。方法采用Ⅱ型膠原酶和胰蛋白酶消化分離培養(yǎng)HAEC,通過Transwell~(TM)非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)與人角膜上皮細(xì)胞(CEC)進(jìn)行共培養(yǎng)2周,誘導(dǎo)HAEC分化;通過免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)誘導(dǎo)后HAEC中細(xì)胞角蛋白3+12(CK3+12)、CK14、CK19、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)蛋白的表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)分化細(xì)胞CK12、CK14、CK19、P63 m RNA水平,Western blot法檢測(cè)HAEC誘導(dǎo)前后CK3+12、CK14、CK19、P63的蛋白水平。結(jié)果體外培養(yǎng)的HAEC和CEC形態(tài)相似,免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)到HAEC誘導(dǎo)分化細(xì)胞CK3+12、CK14、CK19、PCNA呈陽性表達(dá),誘導(dǎo)后HAEC中P63、CK12、CK19、CK14 mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為共培養(yǎng)前的3.35、6.76、2.42、1.06倍。結(jié)論在與CEC共培養(yǎng)2周后,HAEC可以轉(zhuǎn)分化為角膜上皮樣細(xì)胞,HAEC可用作組織工程角膜重建的種子細(xì)胞。
[Abstract]:Objective to investigate the feasibility of cultured human amniotic epithelial cells (HAECs) in vitro and to differentiate them into corneal epithelioid cells. Methods HAECs were isolated and cultured by type 鈪,
本文編號(hào):1598605
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