本文選題：腫瘤干細(xì)胞　切入點(diǎn)：喉癌　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：喉癌(Laryngeal cancer)是頭頸部常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率正在逐年上升,在東北地區(qū)喉癌能占到所有腫瘤的5.7%-7.6%。喉癌目前的治療包括手術(shù)和放化療、生物治療等多種治療手段有機(jī)的結(jié)合。但是患者的生存并沒有得到很大的改善,腫瘤的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移是患者治療失敗的主要原因。近年來,腫瘤干細(xì)胞(Cancer stem cells,CSCs)理論的提出為腫瘤轉(zhuǎn)移的研究提供了新的視角,CSCs的理論認(rèn)為CSCs是存在于腫瘤內(nèi)的極少數(shù)細(xì)胞,充當(dāng)干細(xì)胞的角色,并具有自我更新、多向分化、高致瘤及高轉(zhuǎn)移性的特性,是腫瘤的起源。目前CSCs的研究已經(jīng)有了很大的進(jìn)展,在白血病以及多種實(shí)體瘤中包括喉癌中都分離出了CSCs。在本研究中,我們從CSCs的角度去分析腫瘤轉(zhuǎn)移可能的來源與機(jī)制。由于CSCs對(duì)多種化療藥物耐藥,產(chǎn)生抵抗,目前許多化療藥物對(duì)喉癌的治療并不十分理想。所以尋求新的抗腫瘤藥物是非常必要的。以前的研究發(fā)現(xiàn),廣泛用于臨床的抗瘧藥物雙氫青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)是從青蒿素中提取的倍半萜內(nèi)酯類物質(zhì)的衍生物,可以抑制多種腫瘤包括頭頸腫瘤的生長(zhǎng),具有安全、高效、副作用小等優(yōu)點(diǎn)。但DHA對(duì)喉癌侵襲、轉(zhuǎn)移是否具有抑制作用及機(jī)制目前仍不清楚。所以,我們針對(duì)這兩大問題展開研究,通過體外和在體實(shí)驗(yàn)探討介導(dǎo)喉癌侵襲、轉(zhuǎn)移的主要細(xì)胞及其DHA對(duì)喉癌的侵襲和轉(zhuǎn)移是否有抑制作用及其可能的機(jī)制。第一部分喉癌CSCs的分離及其體外侵襲和遷移能力的研究目的:比較喉癌Hep-2細(xì)胞系CD133~+與CD133~-細(xì)胞在侵襲轉(zhuǎn)移能力方面的差別,并探討其存在差異的機(jī)制。方法:1用流式細(xì)胞分選技術(shù)分離出細(xì)胞表面標(biāo)記CD133~+及CD133~-的喉癌Hep-2細(xì)胞,分別培養(yǎng)后再檢測(cè)陽性細(xì)胞中CD133的陽性表達(dá)率。2應(yīng)用Transwell小室這項(xiàng)技術(shù)檢測(cè)兩種細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力的差異。3 Westen blot檢測(cè)兩種細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9、E-cadherin的表達(dá)情況。結(jié)果:1流式細(xì)胞分選的結(jié)果:PE標(biāo)記的CD133抗體染色后,流式細(xì)胞檢測(cè)顯示喉癌Hep-2細(xì)胞表面CD133的陽性表達(dá)率為3.4±0.559%,無血清培養(yǎng)一周后再經(jīng)流式檢測(cè)CD133~+純度測(cè)定為86.5±3.011%。2 Transwell小室檢測(cè)結(jié)果顯示:兩種細(xì)胞在traswell小室的上室培養(yǎng)24小時(shí)后,與CD133~-細(xì)胞相比,CD133~+細(xì)胞顯示出更強(qiáng)的侵襲、遷移能力(P0.01)。3 Western blot結(jié)果:侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9在CD133~+細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)量為(0.87±0.016)明顯高于CD133~-細(xì)胞(0.643±0.011),使用T檢驗(yàn)的方法檢測(cè)兩組之間的蛋白相對(duì)表達(dá)量,兩者之間有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=20.08,P0.01)。另一種侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)聯(lián)的蛋白E-cadherin與MMP-9相反,在CD133~-細(xì)胞中的表達(dá)量明顯高于CD133~+細(xì)胞,兩種細(xì)胞中該蛋白的表達(dá)量分別為CD133~+(0.376±0.0200),CD133~-(0.791±0.015),T檢驗(yàn)檢測(cè)兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=28.49,P0.01)。結(jié)論:1 CD133~+喉癌細(xì)胞較CD133~-細(xì)胞的侵襲遷移能力更強(qiáng),可能是在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移中的主要責(zé)任細(xì)胞。2 CD133~+細(xì)胞的高侵襲性可能與CD133~+細(xì)胞自身表達(dá)更多的侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9以及丟失粘附蛋白E-caherin有關(guān)。第二部分DHA通過抑制STAT3信號(hào)途徑干擾喉癌CSCs的侵襲和遷移作用的研究目的:觀察DHA抑制喉癌干細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的作用,并探討其作為潛在的STAT3抑制劑對(duì)STAT3所激活的侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)信號(hào)通路的阻斷作用。方法:1將流式分選出的CD133~+細(xì)胞根據(jù)培養(yǎng)條件的不同分為4組:(1)無血清培養(yǎng),不添加任何藥物及激活或干擾因子(對(duì)照組);(2)在(1)的基礎(chǔ)之上加入細(xì)胞因子IL-6(20ng/ml);(3)先加入IL-6作用1h,然后再加入DHA;(4)在(1)的基礎(chǔ)上只加入藥物DHA。同理,用另外一個(gè)條件低氧進(jìn)行干預(yù)也分為4組:(1)單純的無血清常氧培養(yǎng);(2)無血清低氧培養(yǎng);(3)低氧培養(yǎng)的同時(shí)加入DHA;(4)無血清常氧培養(yǎng)再加入DHA。2用Transwell小室技術(shù)檢測(cè)上述不同培養(yǎng)條件下CD133~+細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移數(shù)量的變化。3 Western blot檢測(cè)上述不同條件(IL-6和低氧)激活STAT3,以及再加入DHA后,HIF-1α(乏氧條件下),STAT3,p-STAT3以及侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9、E-cadherin的表達(dá)情況。結(jié)果1 Transwell結(jié)果:(1)在IL-6和/或DHA外加因素作用后,喉癌干細(xì)胞轉(zhuǎn)移的結(jié)果顯示:未處理組即對(duì)照組(162±13)個(gè)/HP,IL-6組(310±13)個(gè)/HP,IL-6+DHA組(57±9)個(gè)/HP,DHA組(48±6)個(gè)/HP。應(yīng)用單因素方差分析檢測(cè)四組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1184,P0.01),應(yīng)用Tukey’s multiple comparison test方法比較組內(nèi)兩兩的差別,IL-6組和對(duì)照組相比(q=41.92,P0.01),IL-6組和IL-6+DHA聯(lián)合組比較(q=71.28,P0.01),對(duì)照組和DHA組相比較(q=32.06,P0.01)。四組喉癌干細(xì)胞侵襲的結(jié)果:對(duì)照組(107±3)個(gè)/HP,IL-6組(204±7)個(gè)/HP,IL-6+DHA組(44±7)個(gè)/HP,DHA組(30±7)個(gè)/HP方差分析四組之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1453,P0.01),IL-6組和對(duì)照組相比(q=46.68,P0.01),IL-6組和IL-6+DHA聯(lián)合組比較(q=76.79,P0.01),對(duì)照組和DHA組相比較(q=37.11,P0.01)。(2)在低氧和/或DHA作用后,各組喉癌干細(xì)胞經(jīng)Traswell轉(zhuǎn)移的結(jié)果示:常氧組(137±9)個(gè)/HP,低氧組(229±7)個(gè)/HP,低氧+DHA組(59±4)個(gè)/HP,常氧+DHA組(39±5)個(gè)/HP。四組之間單因素方差分析結(jié)果顯示四組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1675,P0.01),各組之間的比較如下:常氧組和低氧組(q=43.68,P0.01),低氧組和低氧+DHA組(q=80.57,P0.01),常氧組和常氧+DHA組(q=46.32,P0.01)。四組細(xì)胞Transwell侵襲的結(jié)果示:常氧組(122±10)個(gè)/HP,低氧組(190±7)個(gè)/HP,低氧+DHA(58±6)個(gè)/HP,常氧+DHA(39±7)個(gè)/HP,四組之間比較經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析四組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=705.9,P0.01),常氧組和低氧組(q=26.35,P0.01),低氧組和低氧+DHA組(q=51.35,P0.01),常氧組和常氧+DHA組(q=32.19,P0.01)。2 Western blot結(jié)果:(1)在IL-6和/或DHA作用于喉癌干細(xì)胞后,Western blot檢測(cè)相關(guān)蛋白p-STAT3,STAT3,以及侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9,E-cadherin在四組中的表達(dá)量的變化,使用單因素方差分析對(duì)結(jié)果統(tǒng)計(jì)。STAT3在四組中的表達(dá)量無明顯差別,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。p-STAT3在四組中表達(dá)量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=10190,P0.01),組內(nèi)兩兩之間進(jìn)行比較,IL-6作用后較對(duì)照組的表達(dá)量增加(q=20.87,P0.01),加入DHA后,IL-6+DHA組較IL-6組的蛋白量又明顯減少(q=183.5,P0.01),與照組相比該蛋白在DHA組的表達(dá)量也明顯下降(q=165,P0.01)。MMP-9的表達(dá)趨勢(shì)變化與p-STAT3相似,四組之間的差異同樣有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7830,P0.01),四組之間進(jìn)行比較,在IL-6組表達(dá)最多,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=51.5,P0.01),而IL-6+DHA組與IL-6組相比,MMP-9的表達(dá)量明顯下降(q=143.7,P0.01),單獨(dú)加DHA與對(duì)照組相比也明顯下降了(q=232.9,P0.01)。E-cadherin的變化趨勢(shì)則與上述兩種蛋白相反,四組之間的差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1219,P0.01),IL-6作用后表達(dá)量反而降低,與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=9.845,P0.01)。該蛋白在IL-6+DHA組較IL-6組的表達(dá)水平明顯升高,差異明顯,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=59.85,P0.01)。DHA單獨(dú)組和對(duì)照組比較,E-cadherin的表達(dá)水平升高差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=59.53,P0.01)。(2)喉癌干細(xì)胞低氧和/或DHA作用后,Western blot檢測(cè)相關(guān)蛋白乏氧因子-1α(HIF-1α),p-STAT3和STAT3以及侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9和E-cadherin的表達(dá)量變化。用單因素方差分析對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、評(píng)定。HIF-1α在四組中的表達(dá)的差異同樣有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=350.9,P0.01)。低氧培養(yǎng)后,HIF-1α的表達(dá)量明顯升高,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=28.32,P0.01)。加入DHA后其表達(dá)量顯著下降,低氧+DHA組比低氧組明顯減少(q=8.26,P0.01),且DHA組和對(duì)照組比較表達(dá)量也顯著降低(q=12.80,P0.01)。p-STAT3和MMP-9的表達(dá)趨勢(shì)與HIF-1α相似,四組之間的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2187,P0.01,p-STAT3;F=4833,P0.01,MMP-9),在低氧培養(yǎng)后均升高,表達(dá)量與相應(yīng)的對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p-STAT3(q=34.68,P0.01),MMP-9(q=45.31,P0.01)。同樣,在加入DHA后,與相應(yīng)的對(duì)照組比較,這兩種蛋白的表達(dá)量顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,常氧組和常氧+DHA組相比p-STAT3(q=63.68,P0.01),低氧和低氧+DHA組相比p-STAT3(q=90.30,P0.01),常氧組和常氧+DHA組相比MMP-9(q=115.7,P0.01),低氧組和低氧+DHA組比較MMP-9(q=99.39,P0.01)。STAT3在四組的表達(dá)水平無明顯差異(P0.05)。E-cadherin在四組中的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=17730,P0.01)。低氧條件下較常氧時(shí)表達(dá)增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=8.848,P0.01)。而加入DHA后其相應(yīng)的對(duì)照組E-cadherin的表達(dá)水平呈現(xiàn)升高的趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,常氧組和常氧+DHA組比較(q=258.7,P0.01),低氧組和低氧+DHA組比較(q=196.1,P0.01)。結(jié)論:1 IL-6和低氧的作用可以提高喉癌干細(xì)胞的侵襲、遷移能力。2 DHA可以抑制喉癌干細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移,其機(jī)制可能與DHA特異性的抑制p-STAT3的激活,從而使得其下游的侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的表達(dá)受到影響。第三部分人喉癌Hep-2細(xì)胞系的CD133~-和CD133~+細(xì)胞在體內(nèi)侵襲和轉(zhuǎn)移能力的對(duì)比研究目的:比較CD133~-和CD133~+細(xì)胞在體內(nèi)的侵襲、轉(zhuǎn)移的差異,并檢測(cè)侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的表達(dá),分析可能的機(jī)制。方法:1將裸鼠隨機(jī)分為2組,分別通過尾靜脈注射CD133~-和CD133~+細(xì)胞建立轉(zhuǎn)移模型。觀察小鼠的一般情況,并記錄小鼠生存時(shí)間。2對(duì)各組肺組織HE染色,觀察并計(jì)數(shù)各組肺組織所形成的轉(zhuǎn)移灶數(shù)目。3 Western blot檢測(cè)兩組肺轉(zhuǎn)移灶中侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,分析可能的機(jī)制。結(jié)果:1小鼠的一般情況:我們所建立的小鼠的侵襲、轉(zhuǎn)移模型對(duì)小鼠的一般情況影響較大,尾靜脈注射腫瘤細(xì)胞后隨著時(shí)間延長(zhǎng)肺轉(zhuǎn)移灶逐漸形成的過程中,一部分小鼠的體重出現(xiàn)了相應(yīng)的變化,在生長(zhǎng)期出現(xiàn)了體重下降。CD133~-細(xì)胞組的小鼠在第31天有2只開始出現(xiàn)體重下降,第33天有3只開始出現(xiàn)體重下降。CD133~+細(xì)胞組的小鼠在第19天有3只,第21天有2只,29天有1只小鼠開始出現(xiàn)體重逐漸下降。在體重下降后,小鼠的活動(dòng)、精神狀態(tài)等也逐漸開始減低。但兩組體重之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 CD133~-和CD133~+細(xì)胞分別建立的轉(zhuǎn)移模型中肺轉(zhuǎn)移的情況的比較:CD133~-細(xì)胞組肺組織轉(zhuǎn)移程度較輕,肉眼觀察肺組織紅潤,表面光滑,而CD133~+細(xì)胞組的肺組織表面可見明顯轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)形成,肺組織略顯蒼白。經(jīng)HE染色后,鏡下觀察兩組肺組織,與CD133~-細(xì)胞組相比,CD133~+細(xì)胞組肺轉(zhuǎn)移灶明顯較大,且數(shù)量多。經(jīng)T檢驗(yàn)兩組肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)目有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=2.615,P0.05)。3比較CD133~-和CD133~+細(xì)胞在體內(nèi)所建立的肺轉(zhuǎn)移模型對(duì)小鼠生存的影響:CD133~-細(xì)胞組小鼠在尾靜脈注射細(xì)胞后第34天、36天分別有1只小鼠出現(xiàn)毫無征兆的死亡,生存率分別為85.71%和71.43%。在第39天有3只小鼠突然出現(xiàn)死亡,最終生存率為28.57%。按照?qǐng)?zhí)行安樂死及實(shí)際死亡小鼠進(jìn)行計(jì)算,CD133~+細(xì)胞組在第29天,31天和34天分別有1只小鼠死亡,生存率分別下降為85.71%,71.43%和57.14%。第39天有3只小鼠死亡,最終生存率為28.57%。應(yīng)用Kaplan-Meier法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理分析,Log-rank test方法對(duì)兩組生存情況進(jìn)行比較,得出P0.05,兩組之間生存的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4 CD133~-和CD133~+細(xì)胞組轉(zhuǎn)移瘤在侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白表達(dá)的比較:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)移瘤中侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的表達(dá),結(jié)果:p-STAT3在兩組中的表達(dá)有明顯的差別,CD133~+細(xì)胞組的相對(duì)表達(dá)量為1.70±0.05,明顯高于CD133~-細(xì)胞組(0.83±0.30),經(jīng)T檢驗(yàn),兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.879,P0.01)。而STAT3在兩組之間的表達(dá)量無明顯差異。侵襲相關(guān)蛋白MMP-9在兩組轉(zhuǎn)移瘤中的相對(duì)表達(dá)量也有明顯的差異,CD133~+細(xì)胞組為1.74±0.51,明顯高于CD133~-細(xì)胞組(0.47±0.15),兩組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.168,P0.05)。另一種轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白E-cadherin在兩組之間的相對(duì)表達(dá)水平則與MMP-9相反,CD133~+細(xì)胞組為0.86±0.14,明顯低于CD133~-細(xì)胞組,兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.241,P0.05)。結(jié)論:1與CD133~-細(xì)胞相比,CD133~+細(xì)胞更易在體內(nèi)發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移,我們推測(cè)CD133~+細(xì)胞可能是介導(dǎo)腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的主要細(xì)胞。2 CSCs中STAT3的組成性激活可以導(dǎo)致下游侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9的表達(dá)增高,E-cadherin的表達(dá)降低,使細(xì)胞獲得更強(qiáng)的侵襲和轉(zhuǎn)移的能力。第四部分DHA對(duì)喉癌CSCs侵襲和轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制的在體實(shí)驗(yàn)研究目的:檢測(cè)DHA對(duì)腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的抑制作用,并通過檢測(cè)侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白表達(dá)的變化,探究可能的機(jī)制。方法:1將14只BALb/c雄性裸鼠均經(jīng)尾靜脈注射CD133~+細(xì)胞建立體內(nèi)轉(zhuǎn)移模型。將裸鼠隨機(jī)分為2組,對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組給予DHA(100mg/Kg),對(duì)照組給予DMSO。觀察并記錄小鼠的一般情況以及小鼠的生存時(shí)間。2對(duì)兩組小鼠的肺組織進(jìn)行HE染色,觀察并計(jì)數(shù)兩組所形成的肺轉(zhuǎn)移灶。3應(yīng)用Western blot檢測(cè)兩組小鼠肺轉(zhuǎn)移灶中侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,并分析DHA對(duì)小鼠體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移影響的可能機(jī)制。結(jié)果:1小鼠的一般情況:對(duì)照組的小鼠分別在第9天、17天、25天,分別有1只小鼠開始出現(xiàn)體重下降,另2只均在第53天開始出現(xiàn)體重下降,其中1只在第59天體重下降了25%。另外1只小鼠雖然體重下降未達(dá)到原體重的20%,但出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍、跛行、退縮等反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)組有1只小鼠在第23天突然出現(xiàn)體重下降,精神欠佳等。兩組之間體重的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 DHA可以抑制肺部轉(zhuǎn)移灶的形成:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)比觀察兩組的肺組織,對(duì)照組肺組織顏色蒼白,表面有大量的轉(zhuǎn)移灶,而實(shí)驗(yàn)組肺組織顏色紅潤,肺表面轉(zhuǎn)移灶明顯少于對(duì)照組。對(duì)肺組織進(jìn)行HE染色,并對(duì)兩組肺部所形成的轉(zhuǎn)移灶分別進(jìn)行計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,得出兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.940,P0.05)。3應(yīng)用DHA后對(duì)小鼠生存的影響:對(duì)照組在第12天、24天、29天分別出現(xiàn)1只小鼠死亡,生存率分別下降為85.71%,71.43%,57.14%。第59天有2只小鼠死亡,最終生存率為28.57%。而實(shí)驗(yàn)組僅在第29天出現(xiàn)1只小鼠死亡,其余小鼠精神狀態(tài)及飲食情況未見明顯變化,均存活至少59+天,總生存率為85.71%。Kaplan-Meier法對(duì)兩組的生存情況進(jìn)行整理分析,并用Log-rank test方法對(duì)兩組的生存進(jìn)行比較,得出實(shí)驗(yàn)組的生存率明顯高于對(duì)照組(P0.05)。4 DHA的應(yīng)用對(duì)腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的影響:我們通過Western blot方法分析兩組肺轉(zhuǎn)移灶侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。P-STAT3在實(shí)驗(yàn)組的相對(duì)表達(dá)量(0.235±0.059)明顯低于對(duì)照組(1.063±0.222)。經(jīng)T檢驗(yàn),兩組的表達(dá)水平差異明顯(t=6.248,P0.01)。STAT3在兩組中的表達(dá)量無明顯差異。侵襲相關(guān)蛋白MMP-9在實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)水平為0.300±0.033,明顯低于對(duì)照組(0.926±0.289)。兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.731,P0.01)。而轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白E-cadherin在加入DHA后的表達(dá)水平為(1.305±0.319),顯著高于對(duì)照組(0.737±0.138)。結(jié)論:1 DHA可以顯著抑制腫瘤在體內(nèi)的侵襲、轉(zhuǎn)移,與對(duì)照組相比,DHA還能顯著提高小鼠的生存時(shí)間。2 DHA可能是通過抑制STAT3的磷酸化而使得其下游的侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9的表達(dá)下降,E-cadherin表達(dá)上調(diào),從而達(dá)到抑制腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的目的。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R739.65

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本文編號(hào)：1564175