本文關(guān)鍵詞： 姜黃素 堿燒傷 新生血管 機(jī)制 信號(hào)傳導(dǎo)　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的觀察姜黃素對(duì)兔眼角膜堿燒傷后角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的抑制作用,初步探討姜黃素抑制角膜新生血管的作用機(jī)制,為將來姜黃素應(yīng)用于臨床奠定理論基礎(chǔ)。方法取健康,體重2.0-2.5kg的成年雄性日本大耳兔48只,采用浸潤1mol/L氫氧化鈉的濾紙貼附右眼角膜中央1分鐘的方法制作兔眼角膜堿燒傷模型。將造模成功的大耳兔隨機(jī)分為A組(二甲基亞砜(DMSO)對(duì)照組)、B組(40umol/L姜黃素組)、C組(80umol/L姜黃素組)和D組(160umol/L姜黃素組),每組12只(12眼),右眼分別點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的藥物,1滴/次,4次/日,連續(xù)用藥14天。(1)采用眼前節(jié)照相儀觀察兔眼角膜新生血管情況并對(duì)兔眼堿燒傷后的第2天、4天、7天、14天的角膜進(jìn)行拍照,記錄CNV長度和計(jì)算CNV面積。(2)分別于堿燒傷后2天、4天、7天、14天隨機(jī)從A組、B組、C組、D組兔中抽取3只,抽取房水,采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測各組房水中VEGF、4EBP1因子的蛋白含量;分別于堿燒傷后7天、14天隨機(jī)從A組、B組、C組、D組兔中抽取3只,處死后取角膜,采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測各組角膜組織中4EBP1、P70S6K、m TOR的m RNA的相對(duì)表達(dá)量。(3)采用SPSS23.0軟件完成統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料的統(tǒng)計(jì)學(xué)描述采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,行單因素方差分析,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果(1)兔眼角膜堿燒傷后2天,四組均表現(xiàn)為結(jié)膜混合充血,堿燒傷區(qū)角膜灰白色水腫,水腫后方虹膜紋理模糊不清,角鞏膜緣血管擴(kuò)張充血,未見角膜新生血管;兔眼角膜堿燒傷后4天,四組結(jié)膜充血開始減輕,燒傷區(qū)角膜周邊水腫明顯,周邊角膜可見新生血管長入。實(shí)驗(yàn)組(B組、C組、D組)與對(duì)照組(A組)相比平均角膜新生血管面積差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);兔眼角膜堿燒傷后7天,對(duì)照組(A組)結(jié)膜充血及角膜水腫均減輕,角膜新生血管生長旺盛,管腔粗大;實(shí)驗(yàn)組(B組、C組、D組)結(jié)膜充血較對(duì)照組明顯減輕,新生血管自角膜緣侵入角膜,但是生長較對(duì)照組緩慢,血管稀疏較細(xì)。實(shí)驗(yàn)組(B組、C組、D組)與對(duì)照組(A組)相比平均角膜新生血管面積差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且隨著姜黃素濃度的增加,平均角膜新生血管面積逐漸減小;兔眼角膜堿燒傷后14天,對(duì)照組(A組)新生血管密集粗大,呈網(wǎng)狀布滿整個(gè)角膜;實(shí)驗(yàn)組(B組、C組、D組)新生血管由角膜四周長入燒傷區(qū),生長緩慢,角膜周邊的細(xì)小血管開始退化,與對(duì)照組(A組)相比,角膜新生血管明顯短且稀疏。實(shí)驗(yàn)組(B組、C組、D組)與對(duì)照組(A組)相比平均角膜新生血管面積差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且隨著姜黃素濃度的增加,平均角膜新生血管面積逐漸減小。(2)兔眼角膜堿燒傷后7天、14天時(shí),實(shí)驗(yàn)組(B組、C組、D組)與對(duì)照組(A組)相比,房水中的4EBP1、VEGF蛋白的表達(dá)量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),隨著姜黃素濃度的增高VEGF,4EBP1蛋白的表達(dá)量依次降低,行皮爾遜相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)房水中4EBP1與VEGF的蛋白表達(dá)呈線性正相關(guān)。相關(guān)系數(shù)r在A組為0.969,B組為0.803,C組為0.67,D組為0.972(在0.05級(jí)別,相關(guān)性顯著)。(3)兔眼角膜堿燒傷后7天、14天,實(shí)驗(yàn)組(B組、C組、D組)與對(duì)照組(A組)相比,角膜組織中m TOR、4EBP1、P70S6K在m RNA水平的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且隨著姜黃素濃度的增高m TOR、4EBP1、P70S6K在m RNA水平的表達(dá)量依次降低。結(jié)論1.姜黃素對(duì)兔眼角膜堿燒傷后CNV的生長具有明顯的抑制作用,并且隨著姜黃素濃度的增加抑制作用增強(qiáng);2.姜黃素能降低房水中VEGF蛋白的表達(dá);3.姜黃素對(duì)VEGF的抑制作用可能是通過抑制m TOR信號(hào)傳導(dǎo)通路來發(fā)揮作用。
[Abstract]:Objective To observe the effect of curcumin on rabbit corneal alkali burn induced corneal neovascularization (corneal neovascularization, CNV) the inhibitory effect, to explore the mechanism of curcumin inhibition of corneal neovascularization, for future clinical application of curcumin and laid a theoretical basis. Methods healthy adult male, weight 2.0-2.5kg 48 Japan rabbits, rabbit model of corneal alkali burn production method by infiltrating 1mol/L sodium hydroxide filter paper attached to the right of central corneal 1 minutes. The successful model of the rabbits were randomly divided into A group (two dimethyl sulfoxide (DMSO) control group), B group (40umol/L group, C group (curcumin) 80umol/L curcumin group) and D group (160umol/L group, curcumin), 12 rats in each group (12 eyes), respectively, corresponding to the right drug, 1 drops / times, 4 times / day, 14 days of continuous use. (1) using anterior segment photography for observing rabbit corneal neovascularization of rabbit eyes after alkali burn 2澶，

本文編號(hào)：1513493