發(fā)布時間：2018-02-09 04:36

  本文關(guān)鍵詞： 氧氟沙星 人角膜上皮細(xì)胞 細(xì)胞毒性 細(xì)胞凋亡 線粒體依賴性信號途徑　出處：《山東大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版)》2016年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：以非轉(zhuǎn)染人角膜上皮(HCEP)細(xì)胞系為體外實驗?zāi)Ｐ?研究了眼科常用抗生素藥物氧氟沙星(ofloxacin,OFX)的細(xì)胞毒性及其細(xì)胞與分子機理。體外培養(yǎng)的HCEP細(xì)胞用不同濃度OFX處理后,分別利用光鏡和M TT方法測定細(xì)胞病變效應(yīng)和細(xì)胞活力,用流式細(xì)胞術(shù)、吖啶橙/溴化乙錠雙染色、DNA凝膠電泳和透射電鏡檢測細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡,使用ELISA、Western雜交和流式細(xì)胞術(shù)鑒定胱天蛋白酶的激活、胞質(zhì)中線粒體特有凋亡激活蛋白的含量和線粒體跨膜電位(MTP)的崩解。結(jié)果顯示,OFX在質(zhì)量濃度大于0.375 g/L時,可劑量和時間依賴性地引起HCEP細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)、活力下降和質(zhì)膜通透性升高,并引起細(xì)胞周期阻滯在S期,磷脂酰絲氨酸外翻,DNA斷片化,凋亡小體形成,胱天蛋白酶-2、-9和-3的激活,胞質(zhì)中細(xì)胞色素c和凋亡誘導(dǎo)因子含量的上調(diào),以及MTP崩解。可見,OFX在質(zhì)量濃度為其臨床治療質(zhì)量濃度的1/8以上時,能通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡對HCEP細(xì)胞產(chǎn)生顯著細(xì)胞毒性,其凋亡誘導(dǎo)作用要受到死亡受體介導(dǎo)的線粒體依賴性信號途徑的調(diào)控。
[Abstract]:The cytotoxicity and cell and molecular mechanism of ofloxacin OFX, a commonly used ophthalmic antibiotic, were studied in human corneal epithelial cell line (HCEP) in vitro. HCEP cells cultured in vitro were treated with different concentrations of OFX. Cell cycle arrest and apoptosis were detected by flow cytometry, acridine orange / ethidium bromide double staining DNA gel electrophoresis and transmission electron microscopy. The activation of cystatin, the content of mitochondrial specific apoptosis-activating protein and the breakdown of mitochondrial transmembrane potential (MTP) were identified by Western blot and flow cytometry. The results showed that OFX was more than 0.375 g / L in mass concentration. In a dose-and time-dependent manner, HCEP cells showed cytopathic effects, decreased activity and increased plasma membrane permeability, and resulted in cell cycle arrest in S phase, fragmentation of phosphatidyl serine valgus DNA and formation of apoptotic corpuscles. The activation of cystatin 2 and 3, the up-regulation of cytochrome c and apoptosis-inducing factor in cytoplasm, and the disintegration of MTP. Cell cycle arrest and apoptosis can induce cytotoxicity to HCEP cells, which is regulated by mitochondrial dependent signaling pathway mediated by death receptor.
【作者單位】： 中國海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院角膜組織工程實驗室;
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)資助項目(2006AA02A132)
【分類號】：R772.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1497090