本文關(guān)鍵詞： 鼻咽癌 差異miRNA表達(dá)譜 miR-34c-5p 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的和意義鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)作為一種起源于鼻咽上皮的惡性腫瘤,多見于我國南方及東南亞地區(qū),尤其高發(fā)于廣東省,素有“廣東瘤”之稱。由于鼻咽癌具有發(fā)病隱匿、轉(zhuǎn)移早、個(gè)體差異大的特點(diǎn),盡管目前以調(diào)強(qiáng)放射治療為主的綜合治療可以使鼻咽局部有較好的控制,但鼻咽癌的五年生存率始終徘徊在70%左右,因而針對性的腫瘤個(gè)體化治療成為大勢所趨。然而,個(gè)體化治療需建立在精確的分子標(biāo)志物表達(dá)譜分析和差異基因的功能研究的理論基礎(chǔ)上。因此篩選出與鼻咽癌的局部侵犯、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、血管生成等腫瘤生物學(xué)行為密切相關(guān)的表達(dá)譜,通過對其中重要分子標(biāo)志物的功能和調(diào)控通路研究,能進(jìn)一步明確鼻咽癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制,有助于制定出鼻咽癌的個(gè)體化治療方案,這對于提高鼻咽癌患者生存率,生存質(zhì)量、降低治療成本具有極其重要的臨床意義。miRNA是一類非編碼單鏈小分子RNA,長約18-24個(gè)核苷酸,通過與多個(gè)靶基因mRNA的3’非翻譯區(qū)不完全互補(bǔ)配對,在轉(zhuǎn)錄后水平抑制基因表達(dá)。目前研究表明50%以上的miRNA定位在腫瘤相關(guān)基因組區(qū)域,不但扮演原癌基因或抑癌基因的角色,還通過多條信號通路調(diào)控腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移,廣泛的參與了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展,成為近10年來腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。近些年愈來愈多的研究發(fā)現(xiàn),miRNA的腫瘤調(diào)控作用通過龐大的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)得以實(shí)現(xiàn),并且這類網(wǎng)絡(luò)分析通常建立在表達(dá)譜篩選的基礎(chǔ)上。在乳腺癌、前列腺癌、肺癌等多種腫瘤中,癌基因SETD1A通過miR-30、miR-590-5p作用網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行對抑癌基因p53的調(diào)控。在胰腺癌中,經(jīng)過篩選所得的miR-21、miR-23a、和miR-27a與抑癌基因PDCD4,、BTG2、和NEDD4L構(gòu)成相互作用網(wǎng)絡(luò),共同調(diào)節(jié)胰腺癌的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。這些研究均表明,miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)對腫瘤發(fā)生發(fā)展具有重要作用,并可作為潛在的治療靶標(biāo)。在鼻咽癌中,目前研究發(fā)現(xiàn)多個(gè)miRNA參與了鼻咽癌的發(fā)病機(jī)制,其表達(dá)失調(diào)可影響鼻咽癌細(xì)胞的增殖、凋亡、運(yùn)動(dòng)、侵襲和轉(zhuǎn)移能力,并與鼻咽癌病人的預(yù)后密切相關(guān)。miR-26在鼻咽癌細(xì)胞系及鼻咽癌組織標(biāo)本中表達(dá)下調(diào),靶向EZH2參與抑制鼻咽癌細(xì)胞的增殖及侵襲作用。同樣的,miR-9在鼻咽癌表達(dá)下調(diào),并通過靶向CXCR4調(diào)控鼻咽癌細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲能力。截至2016年,已有超過30個(gè)microRNA參與鼻咽癌疾病發(fā)生及發(fā)展。然而,根據(jù)檢索文獻(xiàn)和本課題組目前關(guān)于鼻咽癌組織中的miRNA的功能及機(jī)制研究,發(fā)現(xiàn)在已有的研究中,缺乏對以組織差異miRNA表達(dá)譜為中心的全方位多層次調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析,因而本研究將結(jié)合高通量測序技術(shù)與生物信息學(xué)分析對鼻咽癌組織中miRNA表達(dá)譜及以miRNA為中心的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行全面而系統(tǒng)的分析。為了讓篩選出的差異miRNA表達(dá)譜具有更好的代表性和重復(fù)性,本研究利用激光顯微切割技術(shù)(LCM, laser capture microdissection),純化鼻咽癌組織標(biāo)本中的腫瘤細(xì)胞。并進(jìn)一步通過新一代測序技術(shù)又稱高通量測序技術(shù),篩選得到更加精準(zhǔn)的差異miRNA表達(dá)譜。再將所得的鼻咽癌組織差異miRNA表達(dá)譜為基礎(chǔ),結(jié)合生物信息學(xué)方法分析miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。在本研究中,除了常規(guī)的GO(Gene Ontology)功能注釋和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路注釋分析方法,進(jìn)一步增加了信號通路分析(IPA,Ingenuity pathway analysis)。其中GO和KEGG分析著重于分析靶基因的功能分布,IPA則在網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建方面具有不可取代的優(yōu)勢。在乳腺癌、肝癌、胰腺癌等腫瘤中均有研究表明利用IPA構(gòu)建的miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)可以在揭示腫瘤分子機(jī)制、指導(dǎo)治療及評估預(yù)后方面發(fā)揮重要作用。然而目前在鼻咽癌組織的差異miRNA表達(dá)譜研究中,尚無利用IPA構(gòu)建miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的先例。關(guān)于miRNA在鼻咽癌中通過何種調(diào)控網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程值得我們進(jìn)行深入的探討。所以,本課題的目的在于篩選出鼻咽癌組織與正常組織間的差異miRNA表達(dá)譜,利用生物信息學(xué)分析預(yù)測靶基因的功能分布,并構(gòu)建以miRNA為中心的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),旨在從更加全面和深層的角度分析腫瘤的發(fā)病及發(fā)展機(jī)制,從而為進(jìn)一步改善鼻咽癌患者的治療、預(yù)后奠定理論基礎(chǔ)。材料和方法1.臨床資料1.112例鼻咽癌組織和8例非癌鼻咽上皮組織用于LCM和高通量測序。所有組織均經(jīng)病理學(xué)檢查確診,鼻咽癌患者在活檢前均未接受放化療等治療。鼻咽癌組中病例的臨床分期分布、年齡分布和性別比例與鼻咽癌臨床特點(diǎn)相一致,并按照相近的年齡分布與性別比例篩選對照組病例。1.2201例鼻咽癌組織和25例非癌鼻咽上皮組織用于高通量測序結(jié)果的qPCR驗(yàn)證。病例的臨床資料篩選標(biāo)準(zhǔn)同上,其中65例鼻咽癌組織和20例非癌鼻咽上皮組織用于初步驗(yàn)證,檢測miRNA與臨床分期及TNM分期間的相關(guān)性通過將樣本量擴(kuò)大至201例鼻咽癌組織和25例非癌鼻咽上皮組織。2.組織標(biāo)本的收集和冰凍切片的制作組織標(biāo)本在活檢術(shù)后立即放入液氮中長期凍存。冰凍切片在-21℃-25℃之間進(jìn)行,選取組織最大橫切面,調(diào)整切片厚度為8um,每個(gè)樣品連續(xù)緩慢切片18-20張后,在無水乙醇中固定10min。然后經(jīng)過漂洗、蘇木素染色、分化、伊紅染色、梯度酒精脫水、二甲苯透明等簡易HE染色步驟制作LCM所需切片。3.激光顯微切割(LCM)裝置好玻片及配套樣品收集離心管,在10倍或20倍鏡下圈出目的區(qū)域,如癌巢或者正常鼻咽上皮,于10倍鏡下進(jìn)行切割,利用收集離心管管蓋將切割后的目的組織片進(jìn)行粘附收集。切取完畢后在離心管內(nèi)加入100ulRNAlater。然后放于-80℃低溫冰箱中保存。4.組織總RNA抽提及質(zhì)量監(jiān)控按照Trizol和RNAiso Plus的protocol依次進(jìn)行組織RNA的提取。分別利用Agilent 2100生物分析儀和ND-1000微量核酸定量儀檢測所得總RNA質(zhì)量,檢測樣品的總量、RIN值(RNA Integrity Number)、28S/18S以及OD260/OD280數(shù)據(jù),用于評判樣品RNA質(zhì)量。通過質(zhì)量檢測的RNA用于下一步測序建庫及熒光定量PCR檢測。5.文庫構(gòu)建與高通量測序。根據(jù)華大TruSeq Small RNA樣品準(zhǔn)備流程,將通過磁珠分離的小RNA和配體利用逆轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,并進(jìn)行PCR擴(kuò)增,所得文庫經(jīng)Agilent 2100生物分析儀檢測后便可用于高通量測序。高通量測序使用Illumina Hiseq 2000測序平臺,對腫瘤樣品和對照非腫瘤樣品采用邊合成邊測序(SBS-sequencing by synthesis)方式,將所得數(shù)據(jù)經(jīng)過濾過、匹配和鑒定,再利用Genespring軟件篩選Fold change≥2且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異miRNA。miRNA表達(dá)量的單位為TPM(transcripts per million,公式為：單一miRNA reads數(shù)×10^6/總reads數(shù))6.熒光定量PCR反應(yīng)抽提鼻咽癌組織和非癌鼻咽上皮組織的總RNA,以稀釋4-5倍的cDNA為模板,U6 snRNA為內(nèi)對照,采用SYBR green法進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過相對定量2-△cp值代表miRNA的相對表達(dá)水平。7.靶基因預(yù)測、GO分析、KEGG通路分析。運(yùn)用預(yù)測軟件RNAhybrid、TargetScan、miRanda和PITA對差異miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測,對結(jié)果進(jìn)行重疊與篩選。篩選出的靶基因用于Gene Ontology (GO, http://www.geneontology.org/)和Kyoto encyclopedia of genes and genomes (KEGG, http://www.kegg.jp/kegg/pathway.html)分析。8.IPA工作流程候選miRNA導(dǎo)入IPA在線數(shù)據(jù)庫(http://www.ingenuity.com),軟件會(huì)對差異表達(dá)miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測,并對他們之間的聯(lián)系可信度進(jìn)行評分,然后再利用MicroRNA Target Filter功能選擇與腫瘤相關(guān)的靶向作用關(guān)系,依據(jù)這些聯(lián)系構(gòu)建miRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。9.細(xì)胞培養(yǎng)人鼻咽癌細(xì)胞株CNE2采用含10%胎牛血清和1%青鏈霉素雙抗RPMI 1640培養(yǎng)基,在37℃、5%C02、飽和濕度的條件下傳代培養(yǎng)。采用對數(shù)期生長的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。10. miRNA瞬時(shí)轉(zhuǎn)染依照陽離子脂質(zhì)體法進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,操作按LipofectamineTM 2000試劑說明書進(jìn)行。6孔板中siRNA的轉(zhuǎn)染量為20nM。11. Western blot抽提細(xì)胞總蛋白,采用BCA法進(jìn)行蛋白濃度測定,然后分別用6%和10%SDS-PAGE電泳,每泳道上樣30μg蛋白樣品,依次進(jìn)行轉(zhuǎn)膜、免疫雜交和化學(xué)發(fā)光法顯影。12.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。鼻咽癌組織和鼻咽非癌對照組織中差異miRNA平均表達(dá)水平的比較,以及miRNA在不同分期的鼻咽癌組織間的表達(dá)水平比較采用2-△Cp,miRNA瞬轉(zhuǎn)效率的測定采用2-△△Cp。兩組之間的數(shù)據(jù)比較通過兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)(2 Independent Samples Tests)檢測。三組或三組以上數(shù)據(jù)的比較采用單因素方差分析,方差齊性時(shí),采用ANOVA,其多重比較采用LSD法；方差不齊時(shí)采用近似F檢驗(yàn)Welch法,多重比較采用Dunnett T3。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.鼻咽癌組織中差異miRNA的篩選結(jié)合LCM技術(shù)與高通量測序?qū)?2例鼻咽癌組織和8例鼻咽非癌對照組織進(jìn)行差異miRNA檢測,將clean date進(jìn)行比對,基于NCBI GenBank、Rfam(10.1)和mirbase21.0數(shù)據(jù)庫,可以匹配到827個(gè)已知人源miRNA。將這827個(gè)niRNA的TPM值導(dǎo)入GeneSpring軟件中進(jìn)行運(yùn)算后,得到由8個(gè)已知miRNA構(gòu)成的鼻咽癌組織差異miRNA表達(dá)譜,其中包含4個(gè)上調(diào)miRNA(miR-205-5p、miR-92a-3p、miR-193b-3p和miR-27a-5p)和4個(gè)下調(diào)niRNA(miR-34c-5p、miR-375、 miR-92b-3p和miR-449c-5p)。它們在在NPC組和正常對照組間的表達(dá)差異倍數(shù)和相應(yīng)的FDR值分別為miR-205-5p (fold change=3.9103, FDR0.01), miR-92a-3p (fold change=4.5575, FDR0.01), miR-193b-3p (fold change=257.719, FDR=0.03), miR-27a-5p (fold change=353.84, FDR=0.017), miR-34c-5p (fold change=-565.0915, FDR0.01), miR-375 (fold change=-226.8843, FDR0.01), miR-92b-3p (fold change=-10.7984, FDR0.01), miR-449c-5p (fold change=-1968.9108, FDR0.01)。根據(jù)所得的TPM值繪制熱圖和散點(diǎn)圖,分析發(fā)現(xiàn)篩選出的差異miRNA表達(dá)譜可以對NPC組與鼻咽非癌對照組進(jìn)行區(qū)分。這說明了我們篩選出來差異miRNA具有較好的組內(nèi)重復(fù)性,可以在同種組織類型中得到重復(fù)。2.差異miRNA的qPCR驗(yàn)證與臨床分期相關(guān)性分析利用qPCR對高通量測序所得的差異miRNA表達(dá)譜進(jìn)行驗(yàn)證。經(jīng)過驗(yàn)證得到7個(gè)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異miRNA,分別為miR-205-5p(t=-5.209,P0.001), miR-92a-3p(t=-4.457,P=0.001), miR-193b-3p(t=-3.64,P0.001), miR-27a-5p(t=-2.977,P=0.005), miR-34c-5p(t=3.776,P=0.001), miR-375(t=2.179,P=0.004), miR-92b-3p(t=-1.297,P=0.198)和miR-449c-5p(t= 1.347,P=0.007).對照組進(jìn)行比較,其中miR-205-5p、miR-92a-3p、miR-193b-3p、miR-27a-5p均為高表達(dá),miR-34c-5p、miR-375和miR-449c-5p均為低表達(dá),與高通量測序結(jié)果相一致。分析這7個(gè)miRNA與臨床分期之間的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)僅有miR-34c-5p表現(xiàn)出與臨床分期間明顯的負(fù)相關(guān)調(diào)節(jié),即隨著臨床分期的升高,其表達(dá)量逐步降低。將樣本量擴(kuò)大以進(jìn)一步驗(yàn)證,得到miR-34c-5p的表達(dá)與患者T分期顯著相關(guān),且隨著分期的增加,miR-34c-5p的表達(dá)逐漸降低(F=3.735,P0.05)。與N分期、M分期無明顯關(guān)聯(lián),同時(shí),隨著臨床分期的增加,患者的miR-34c-5p的表達(dá)逐漸降低(F=4.985,P0.05)。3.靶基因的預(yù)測及生物信息學(xué)分析。利用TargetScan、PITA、RNAhybrid和miRanda4個(gè)預(yù)測網(wǎng)站對通過驗(yàn)證的7個(gè)miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測,結(jié)果進(jìn)行重疊,得到共同的靶基因18454個(gè)。將這18454個(gè)重疊靶基因分為上調(diào)miRNA和下調(diào)miRNA的的預(yù)測靶基因兩部分,從而篩選出上調(diào)的miRNA共同靶向的基因248個(gè),下調(diào)miRNA的共同靶基因666個(gè)。將這2組靶基因用于GO和KEGG分析。GO分析由分子功能(molecular function)-.細(xì)胞組分和元件(cellular component)及參與的生物過程(biological process) 3個(gè)部分組成。分子功能中最多靶基因富集的功能為結(jié)合(binding),富集程度最高的成纖維細(xì)胞生長因子結(jié)合(Fibroblast growth factor binding)功能條目提示靶基因集中作用于促進(jìn)新血管形成,修復(fù)損害的內(nèi)皮細(xì)胞。而在細(xì)胞組分和元件部分靶基因與細(xì)胞及細(xì)胞部分(cell, cell apart)功能緊密相連,肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架(Cortical actin cytoskeleton)的Enrichment值最高,提示靶基因主要參與細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、分裂、粘附以及吞噬等過程。最后在生物過程中靶基因功能主要與細(xì)胞過程(cellular process)相關(guān),參與IL-1的分泌(Interleukin-1 secretion)和免疫應(yīng)答中肥大細(xì)胞的活化(Mast cell activation involved in immune response)。KEGG分析顯示上調(diào)miRNA靶向的基因主要涉及的通路有磷酸肌醇代謝(Inositol phosphate metabolism)、磷酸肌醇信號系統(tǒng)(Phopphatidylinositol signaling system)和趨化因子信號通路(Chemokine signaling pathway)。而下調(diào)miRNA靶向的基因涉及的通路中,排名前3的分別是自然殺傷細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(Natural killer cell mediated cytotoxicity)、細(xì)胞因子與細(xì)胞因子間相互作用(Cytokine-cytokine receptor interaction)以及抗原的加工與提呈(Antigen processing and presentation)。自然殺傷細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性通路在KEGG分析中涉及最多數(shù)目的預(yù)測靶基因,同時(shí)所占總體靶基因的比例也最高。在這條與抗腫瘤、抗病毒感染及免疫調(diào)節(jié)密切相關(guān)的通路中,有34個(gè)預(yù)測靶基因在其中起作用,其中有27個(gè)基因包括抑制性殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(killer cell immnoglobulin-like receptors, KIRs)家族基因可以作為]miR-34c-5p和miR-449c-5p的靶標(biāo)。4.鼻咽癌miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析通過IPA分析發(fā)現(xiàn)含有GGCAGUG序列的miR-34c-5p和niR-449c-5p在miRNA-mRNA相互作用網(wǎng)絡(luò)中靶向的基因所占比例超過74%,進(jìn)一步分析認(rèn)為miR-34c-5p和miR-449c-5p與TP53、CCND1、BcI2、CDK6和MET這5個(gè)基因之間的作用關(guān)系是miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析的關(guān)鍵點(diǎn)。其中TP53和Bcl2被認(rèn)為是潛在的鼻咽癌診斷標(biāo)記物,而CCND1可用于頭頸部腫瘤的治療療效評估。它們的共同作用通路考慮為PI3K/AKT/mTOR信號通路,通過該信號通路對腫瘤細(xì)胞周期進(jìn)行調(diào)控。選擇與臨床分期關(guān)系最為密切的miR-34c-5p,通過鼻咽癌細(xì)胞株瞬時(shí)轉(zhuǎn)染與western blotting檢測,確定miR-34c-5p與CCND1、Bcl2、CDK6和MET之間的靶向關(guān)系。結(jié)合文獻(xiàn)復(fù)習(xí),對miR-34c-5p調(diào)控TP53、CCND1、Bcl2、CDK6和MET表達(dá)的過程進(jìn)行探討,從而構(gòu)建出以miR-34c-5p為中心,通過調(diào)節(jié)TP53、 CCND1、CDK6、Bcl2和MET的表達(dá)量,利用PI3K/AKT/mTOR信號通路調(diào)節(jié)鼻咽癌細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的作用網(wǎng)絡(luò)。結(jié)論1.鼻咽癌組織與鼻咽非癌對照組織間的niRNA差異表達(dá)譜,包括4個(gè)上調(diào)miRNA ( miR-205-5p、miR-92a-3p、miR- 193b-3p、miR-27a-5p )和4個(gè)下調(diào)miRNA (miR-34c-5p、miR-375、miR-92b-3p和miR-449c-5p)。2.鼻咽癌組織qPCR驗(yàn)證確認(rèn)了miR-205-5p、miR-92a-3p、miR-193b-3p和]aaiR-27a-5p表達(dá)上調(diào),以及miR-34c-5p、miR-375、miR-449c-5p的表達(dá)下調(diào)。miR-34c-5p的表達(dá)量與鼻咽癌臨床分期和T分期呈負(fù)相關(guān)。3.GO分析提示預(yù)測的靶基因功能集中于與癌細(xì)胞密切相關(guān)的細(xì)胞修復(fù)、運(yùn)動(dòng)及分泌功能,KEGG通路分析則提示自然殺傷細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性通路可能是miR-34c和miR-449c在鼻咽癌調(diào)控腫瘤免疫中的作用途徑。4.IPA分析得到以miR-34c-5p為中心的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),通過調(diào)節(jié)TP53、MET、 CCND1、CDK6、Bcl2表達(dá)水平并由PI3K/AKT/mTOR通路作用于鼻咽癌細(xì)胞周期,影響癌細(xì)胞的生長、增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移,為制定分子靶向治療、減少復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移提供分子理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.63

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳淑勤;蛋白水解酶在鼻咽癌組織中的表達(dá)及意義的研究[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年03期

2 胡國華,李兵,朱江;鼻咽癌患者多藥耐藥相關(guān)蛋白基因的表達(dá)及意義[J];激光雜志;2004年03期

3 李宇紅,邵建永,姜文奇,顧康生,黃慧強(qiáng),管忠震;鼻咽癌組織中MMP-9CD44v6蛋白表達(dá)的檢測及其臨床意義[J];中國腫瘤臨床;2004年20期

4 吳敬波,張建文,范娟,唐學(xué)清;多藥耐藥相關(guān)蛋白在鼻咽癌中表達(dá)的臨床意義[J];四川醫(yī)學(xué);2005年03期

5 林少民;王奮;唐啟信;;鼻咽癌家族腫瘤史115例調(diào)查[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2006年12期

6 葉奕菁;陸小軍;吳新光;雷風(fēng);劉玉猛;;表皮生長因子受體在鼻咽癌組織總的表達(dá)與臨床意義[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2007年04期

7 袁太澤;李曉霞;曹云;錢朝南;曾木圣;郭翔;;表皮生長因子受體活化與鼻咽癌患者無轉(zhuǎn)移生存的關(guān)系[J];癌癥;2008年05期

8 孔德軍;付波;王敏;羅陽超;王平;;鼻咽癌324例延誤診斷原因分析[J];華西醫(yī)學(xué);2009年09期

9 劉震;;曾益新:破解鼻咽癌密碼的人[J];廣東科技;2009年19期

10 易翔;唐安洲;覃穎;溫文勝;趙衛(wèi)民;;血管內(nèi)皮生長因子以及誘生型一氧化氮合酶在鼻咽癌中的表達(dá)及其關(guān)系[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2009年09期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 符生苗;梁茱;董玉英;;鼻咽癌的P_(16)基因表達(dá)分析[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊）[C];1999年

2 劉青;王雅棣;景尚華;王曉玲;程云杰;吳鳳鵬;;E-鈣粘蛋白在鼻咽癌組織中的表達(dá)水平與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)放射腫瘤治療學(xué)分會(huì)六屆二次暨中國抗癌協(xié)會(huì)腫瘤放療專業(yè)委員會(huì)二屆二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

3 邵建永;王海云;朱志華;孫炳宇;陳靜;杜子明;張家興;邵瓊;黃馬燕;符珈;廖定準(zhǔn);侯景輝;盧泰祥;葉偉民;Ingemar Ernberg;曾益新;;鼻咽癌分子分型研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)日程及論文匯編[C];2010年

4 王樹森;管忠震;向燕群;汪波;林桐榆;姜文奇;張力;張惠忠;侯景輝;;鼻咽癌組織中EGFR信號傳導(dǎo)通路相關(guān)分子的表達(dá)[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)教育論文集[C];2004年

5 陳顯釗;;鼻咽癌診治研究進(jìn)展[A];海南省第二屆腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

6 林少民;唐啟信;;鼻咽癌家族腫瘤史115例調(diào)查分析[A];海南省第二屆腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

7 邵世宏;姚運(yùn)紅;;鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞及其表面標(biāo)志物初步研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

8 李菊蘭;蔡華成;梁傳余;韓偉;;生長抑素Ⅱ型受體在鼻咽癌組織中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2007年

9 項(xiàng)光早;;微血管密度與鼻咽癌生長、浸潤、轉(zhuǎn)移和預(yù)后關(guān)系的研究[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉科學(xué)分會(huì)成立60周年慶典暨2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉頭頸外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

10 潘建基;;鼻咽癌臨床診治現(xiàn)狀和進(jìn)展[A];中國腫瘤內(nèi)科進(jìn)展 中國腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前6條

1 湯清波邋李奇 劉齡予;挑戰(zhàn)“鼻咽癌”的人[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2007年

2 本報(bào)記者　 盧育輝;崇尚“紅�！本�,喜歡“咖啡”會(huì)友[N];廣東科技報(bào);2006年

3 本報(bào)記者　 羅艾樺;挑戰(zhàn)“廣東癌”[N];人民日報(bào);2006年

4 仁華南;“回國發(fā)展是一項(xiàng)明智的選擇”[N];人民日報(bào)海外版;2006年

5 本報(bào)記者 謝明霞;從蛋白質(zhì)組學(xué)入手 探究鼻咽癌[N];健康報(bào);2011年

6 廣東省第二人民醫(yī)院 主任醫(yī)師 蔡長青;病毒與某些癌癥[N];家庭醫(yī)生報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉娟;多藥耐藥在鼻咽癌中的作用及藥物逆轉(zhuǎn)的相關(guān)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 宗井鳳;基于調(diào)強(qiáng)放療的鼻咽癌臨床分期研究以及EB病毒miRNA-BART7在臨床中的應(yīng)用價(jià)值[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

3 鄧旭斌;Evi-1通過RAS/PI3K/AKT通路促進(jìn)鼻咽癌的進(jìn)展[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

4 宋青翠;CD21在鼻咽上皮的表達(dá)及介導(dǎo)游離EBV發(fā)生潛伏性感染的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

5 汪庚明;KAI1/CD82基因在鼻咽癌中的表達(dá)及其與鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

6 王凡;鼻咽癌組織差異miRNA表達(dá)譜篩選和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

7 夏鈾鈾;HMGA2對鼻咽癌惡性生物學(xué)行為的影響及機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

8 周文;鼻咽癌染色體12p12-11區(qū)段擴(kuò)增基因的篩選及其功能研究[D];中南大學(xué);2010年

9 覃綱;免疫球蛋白M與鼻咽癌的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2007年

10 鄭英;基于鼻咽癌潛在靶標(biāo)的活體光學(xué)成像與靶向治療研究[D];華中科技大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 溫江妹;斯鈣素2表達(dá)與鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移及預(yù)后的相關(guān)性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 崔曉飛;LMP1和Siah1在鼻咽癌組織中的表達(dá)情況及其預(yù)后和相關(guān)性分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 楊青青;長鏈非編碼RNA在鼻咽癌患者中差異表達(dá)的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 楊國軍;朊蛋白在鼻咽癌中表達(dá)及意義的研究[D];石河子大學(xué);2015年

5 吳姍姍;鼻咽癌組織咽拭涂片拉曼光譜研究[D];福建師范大學(xué);2015年

6 馬，

本文編號：1490625