本文關(guān)鍵詞： 噪聲性聾 蛋氨酸 連接蛋白26 連接蛋白30 治療 爆震性聾 預(yù)防 預(yù)后　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分噪聲對(duì)動(dòng)物造成的聽力損失及藥物防治研究目的:噪聲嚴(yán)重影響聽力,在所有聾病中噪聲性聾(Noise induced hearing loss,NIHL)占有很高的比例,而其現(xiàn)有的保護(hù)及治療措施卻不能達(dá)到滿意的效果。蛋氨酸是人體8種必需氨基酸之一,在維持健康狀態(tài)中發(fā)揮重要作用,其分子中含有甲基,是體內(nèi)代謝、合成過程的甲基供體。蛋氨酸及其代謝產(chǎn)物的抗氧化作用也對(duì)DNA及蛋白質(zhì)起到了保護(hù)作用。人體組織細(xì)胞廣泛存在由連接蛋白組成的縫隙連接(Gap junction,GJ),而連接蛋白26(Connexin26,Cx26)及連接蛋白30(Connexin30,Cx30)是內(nèi)耳中組成縫隙連接的重要組成部分,在耳蝸發(fā)育及功能維持方面起到重要做用。本文通過制作噪聲聾動(dòng)物模型,應(yīng)用聽覺腦干反應(yīng)(Auditory brainstem response,ABR)檢測(cè)、免疫熒光組織化學(xué)染色等方法來研究噪聲對(duì)耳蝸組織的損害及蛋氨酸對(duì)其保護(hù)及治療作用,另外,觀察Cx26、Cx30在此過程中的變化。方法:40只雌性昆明小鼠,隨機(jī)分為4組:(1)空白對(duì)照組(n=10)(2)純?cè)肼暯M(n=10)(3)保護(hù)組,蛋氨酸+噪聲(n=10)(4)治療組,噪聲+蛋氨酸(n=10)。(1):自由生活,實(shí)驗(yàn)組給藥同時(shí)按同等體重量給予腹腔注射生理鹽水3天。(2)給予小鼠白噪聲,107—110dB,10小時(shí)/天,連續(xù)3天。同樣按同等體重量給予腹腔注射生理鹽水3天。(3)腹腔注射2.5%D-蛋氨酸,按600mg/Kg體重給藥,1次/天,連續(xù)3天,之后給予白噪聲,107—110dB,10小時(shí)/天,連續(xù)3天。(4)給予白噪聲,107—110dB,10小時(shí)/天,連續(xù)3天。之后腹腔注射2.5%D-蛋氨酸(D-methionine,D-Met),按600mg/Kg體重給藥,1次/天,連續(xù)3天。四組小鼠造模前后均行ABR檢測(cè)來評(píng)估小鼠聽力水平。在最后一次ABR檢測(cè)后在將小鼠麻醉,心臟灌注,顯微鏡下迅速取小鼠耳蝸。耳蝸組織鋪片或切片,行抗肌球蛋白-Ⅵ(Myosin-Ⅵ,Myo-Ⅵ)免疫熒光染色,觀察毛細(xì)胞丟失情況;抗Connexin26及抗Connexin30免疫熒光染色,觀察耳蝸連接蛋白的表達(dá)的變化情況。進(jìn)而研究蛋氨酸在以上方面對(duì)噪聲導(dǎo)致的聽力損失有無保護(hù)及治療作用。利用spss22軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表達(dá),以p0.05為結(jié)果存在顯著性差異的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果:1一般觀察結(jié)果:對(duì)照組動(dòng)物正常成長(zhǎng),活潑好動(dòng),耳廓對(duì)聲反應(yīng)敏銳。純?cè)胍艚M小鼠略顯消沉,耳廓反應(yīng)遲鈍,消瘦。保護(hù)組及治療組小鼠略顯躁動(dòng),耳廓反應(yīng)可。2聽覺腦干反應(yīng)(abr)測(cè)試結(jié)果:實(shí)驗(yàn)前各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物聽力閾值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;實(shí)驗(yàn)后四組小鼠abr閾值分別為:空白對(duì)照組:15.50±4.38dbspl,純?cè)肼暯M:40.00±14.14dbspl,保護(hù)組:28.06±9.57dbspl,治療組:22.81±4.82dbspl,四組之間兩兩比較,保護(hù)組和治療組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),其它兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)�？瞻讓�(duì)照組造模前后閾值變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),故可排除年齡相關(guān)的耳聾因素。3抗myosin-Ⅵ染色結(jié)果:四組標(biāo)本基底膜鋪片染色后觀察,對(duì)照組內(nèi)、外毛細(xì)胞排列整齊,無毛細(xì)胞倒伏、變性、缺失的情況。純?cè)肼暯M外毛細(xì)胞出現(xiàn)排列錯(cuò)亂,輪廓模糊,變性、缺失的情況,內(nèi)毛細(xì)胞未見損壞。保護(hù)組和治療組內(nèi)毛細(xì)胞(innerhaircells,ihc)未見損壞,外毛細(xì)胞(outerhaircells,ohc)可見散在缺失,結(jié)構(gòu)較清晰。外毛細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)算毛細(xì)胞存活率,各組之間存活率兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。4抗connexin26及connexin30免疫熒光組織化學(xué)染色結(jié)果:對(duì)照組基底膜、血管紋及螺旋韌帶部位有豐富的connexin26和connexin30蛋白表達(dá);純?cè)肼暯M耳蝸基底膜(basilarmembrane,bm)、血管紋(striavascularis,sv)及螺旋韌帶(spiralligament,sl)部位的cx26及cx30蛋白表達(dá)出現(xiàn)顯著下降;保護(hù)組及治療組耳蝸組織基底膜、血管紋及螺旋韌帶cx26及cx30蛋白表達(dá)亦有不同程度的下降,但較純?cè)肼暯M下降程度輕。第二部分強(qiáng)噪聲對(duì)人耳造成的聽力損害及藥物防治研究目的:噪聲嚴(yán)重影響人們生活質(zhì)量,長(zhǎng)期接觸高強(qiáng)度噪聲或短暫爆炸性劇烈噪聲均會(huì)造成噪聲性耳聾(noiseinducedhearingloss,nihl),目前對(duì)噪聲導(dǎo)致的聽力損失的保護(hù)及治療的措施仍處于探索階段。由于人體耳蝸組織研究的限制性,本文欲通過回顧性分析近十年內(nèi)因爆震導(dǎo)致聽力損傷的患者的診治過程及聽力特點(diǎn),結(jié)合本課題中動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分的組織學(xué)研究,來探索治療因噪聲導(dǎo)致的聽力損失的有效方法。方法:本課題通過收集自2007-2016年10年間因爆震傷就診于白求恩國際和平醫(yī)院并入院治療的75例106耳部隊(duì)官兵患者。通過采集患者基本信息、聽力檢查結(jié)果及治療方法,來分析與爆震性聾(Explosive Deafness,ED)預(yù)后及其相關(guān)因素。結(jié)果:1經(jīng)過7-15天的綜合治療后,有16耳痊愈,33耳不同程度好轉(zhuǎn),57耳無效,總有效率為46.23%。伴耳鳴、耳悶、耳痛癥狀者,經(jīng)治療后上述癥狀有不同程度的減輕。2預(yù)后與發(fā)病時(shí)長(zhǎng)的關(guān)系:患者治療效果隨發(fā)病時(shí)間越長(zhǎng),效果越不好,治療的總有效率越低。結(jié)論:1噪聲可導(dǎo)致聽力損失,并可從形態(tài)學(xué)上反映出來,且蛋氨酸對(duì)噪聲性聾有保護(hù)和治療作用;2連接蛋白Connexin26及Connexin30參與了噪聲導(dǎo)致的聽力下降的發(fā)病機(jī)制,并可從免疫熒光組織化學(xué)染色體現(xiàn)出來;3蛋氨酸對(duì)噪聲導(dǎo)致的Connexin26及Connexin30表達(dá)下降有一定的保護(hù)及治療作用。4爆震性耳聾的預(yù)后與治療干預(yù)時(shí)間有密切關(guān)系,治療越及時(shí),越有可能達(dá)到好的效果。5目前對(duì)爆震性耳聾的治療方法有效,但總體有效率不高,治療方法仍需改善提高。
[Abstract]:Objective to study the drug prevention and treatment of hearing loss and noise on the first part: animal caused by noises seriously affect the hearing, all mitochendrial noise deafness (Noise induced hearing loss, NIHL) a high proportion, and the existing protection and treatment measures can not achieve satisfactory results. 8 kinds of human essential amino acid methionine is one, play an important role in maintaining the health of the state, the molecules containing methyl, in vivo metabolism, synthesis process of methyl donor. The antioxidant effect of methionine and its metabolites to the protective effect of DNA and protein in human tissue cells. Widespread gap junction protein composed of connection (Gap junction, GJ). And connexin 26 (Connexin26, Cx26) and connexin 30 (Connexin30, Cx30) is an important component of gap junctions in the inner ear, can maintain plays an important in cochlear development and function 鍋氱敤.鏈枃閫氳繃鍒朵綔鍣０鑱嬪姩鐗╂ā鍨，

本文編號(hào)：1465348