抑制核轉錄因子κBp65對鼻咽癌CNE2細胞的生物學影響
本文關鍵詞: 鼻咽癌 核轉錄因子-κ Bp 小干擾核糖核酸 出處:《中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志》2017年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討核轉錄因子κBp65(NF-κBp65)沉默對鼻咽癌的生物學作用。方法構建NF-κBp65特異性小干擾核糖核酸(si RNA)質粒表達載體(p GPU6/RFP/Neo-NF-κBp65)和陰性對照質粒表達載體(p GPU6/RFP/Neo-NC)。采用非脂質體脂類轉染劑將重組質粒表達載體轉入人鼻咽癌CNE2細胞,建立NF-κBp65沉默的穩(wěn)定轉染CNE2細胞株(NF-κBp65沉默組)和陰性對照細胞株(陰性對照組);蛋白質印跡法(Western blot)分析癌細胞中NF-κBp65基因的表達水平,MTT實驗及流式細胞術分析癌細胞的增殖能力和細胞周期變化;復制裸鼠移植瘤模型,分析沉默NF-κBp65對癌細胞成瘤性的影響。結果成功獲得穩(wěn)定轉染CNE2細胞株,NF-κBp65沉默組細胞中NF-κBp65蛋白表達水平降低;NF-κBp65沉默后,CNE2細胞周期阻滯于S期,增殖速度減慢;NF-κBp65沉默組裸鼠移植瘤生長慢,重量輕,與陰性對照組和空白對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=14.386,P0.05)。結論 NF-κBp65沉默能降低鼻咽癌CNE2細胞的惡性生物學行為。
[Abstract]:Objective to investigate the biological effect of nuclear factor 魏 B p65 (NF- 魏 Bp65) silencing on nasopharyngeal carcinoma (NPC). Methods to construct NF- 魏 Bp65 specific small interfering RNA siRNAs (siRNAs). Plasmid expression vector pGPU 6% RFP / Neo-NF- 魏 Bp65) and negative control plasmid vector pGPU 6% RFP / Neo-NC). The recombinant plasmid expression vector was transfected into human nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE2 cells with non-liposome lipids. To establish the stable transfection of NF- 魏 Bp65 into CNE2 cell line (NF- 魏 Bp65 silencing group) and negative control cell line (negative control group); The expression of NF- 魏 Bp65 gene in cancer cells was analyzed by Western blot. MTT assay and flow cytometry were used to analyze the proliferation ability and cell cycle change of cancer cells. The effect of silencing NF- 魏 Bp65 on tumorigenicity of cancer cells was analyzed in nude mice. Results stable transfection of CNE2 cells was successfully achieved. The expression of NF- 魏 Bp65 protein was decreased in NF- 魏 Bp65 silencing group. After the silencing of NF- 魏 Bp65, the cell cycle of CNE2 was arrested in S phase, and the proliferation rate was slowed down. Compared with negative control group and blank control group, the growth of xenograft tumor in NF- 魏 Bp65 silencing group was slow and light, the difference was statistically significant (P < 0.05). Conclusion NF- 魏 Bp65 silencing can reduce the malignant biological behavior of nasopharyngeal carcinoma CNE2 cells.
【作者單位】: 桂林醫(yī)學院科學實驗中心;桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院;
【基金】:國家自然科學基金資助課題(No:81260344) 廣西自然科學基金資助課題(No:2013GXNSFAA019228) 廣西壯族自治區(qū)教育廳資助課題(No:LX2014274)
【分類號】:R739.63
【正文快照】: 鼻咽癌起源于鼻咽黏膜上皮,在我國南方和東南亞地區(qū)高發(fā),由于其發(fā)病部位隱匿,早期癥狀不明顯,確診時多數(shù)患者已達中晚期,因此,治療效果差,5年生存率低,主要原因是局部復發(fā)和遠處轉移[1]。核轉錄因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)是一個核轉錄因子家族,靜息狀
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