本文關鍵詞： 壓力 微環(huán)境 仿生培養(yǎng) 角膜內皮細胞　出處：《眼科》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討體外壓力仿生培養(yǎng)系統(tǒng)下不同梯度壓力對角膜內皮細胞形態(tài)和功能的調控作用。設計實驗性研究。研究對象兔角膜內皮細胞。方法將體外培養(yǎng)的第一代兔角膜內皮細胞分為五組:A組為無壓力常規(guī)培養(yǎng)(空白對照),B組為正常壓力仿生培養(yǎng)(15 mmHg),C組為壓力波動組,將壓力設為15mmHg、25 mmHg、20 mmHg、10 mmHg,D組30 mmHg壓力培養(yǎng),E組50 mmHg壓力培養(yǎng)。細胞均培養(yǎng)24h,免疫法鑒定原代角膜內皮細胞,HE染色和電鏡觀察細胞形態(tài)的改變,流式細胞術檢測細胞活性。主要指標角膜內皮細胞的形態(tài)、存活率。結果獲取的所有細胞證實為角膜內皮細胞表型,無角膜上皮細胞及基質細胞污染。五組細胞分別培養(yǎng)24h后,經HE染色和電鏡檢測發(fā)現(xiàn)正常壓力微環(huán)境培養(yǎng)的角膜內皮細胞排列緊密,六邊形細胞居多,細胞表面微絨毛豐富,細胞核染色質豐富,而高壓力培養(yǎng)的角膜內皮細胞活性差,細胞間隙加大。經流式細胞術分析顯示,正常壓力組、30 mmHg組、壓力波動組、50 mmHg組的角膜內皮細胞培養(yǎng)24 h后細胞存活率分別為(98.16±0.45)%、(78.83±1.65)%、(70.2±3.54)%、(41.33±0.25)%(P=0.016)。高壓力培養(yǎng)組中隨著壓力的升高和持續(xù)時間延長,細胞活性顯著下降。結論正常壓力微環(huán)境培養(yǎng)對角膜內皮細胞形態(tài)和功能具有正向調節(jié)作用,而高壓力對角膜內皮細胞具有損傷性,并隨時間延長而加重。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of different gradient pressure on the morphology and function of corneal endothelial cells in vitro under the pressure bionic culture system. To design an experimental study on rabbit corneal endothelial cells. Methods the first generation of cultured rabbit corneal endothelial cells in vitro was used to investigate the effects of different gradient pressures on the morphology and function of corneal endothelial cells. Rabbit corneal endothelial cells were divided into five groups:. Group A was cultured without stress (. Blank control). Group B was a normal pressure bionic culture group with 15 mm HgG and C group was a pressure fluctuation group. The pressure was set at 15mm HgG 25 mmHg + 20 mmHg for 10 mmHg. Group D was cultured under pressure for 30 mmHg and group E was cultured under pressure for 50 mmHg. All the cells were cultured for 24 hours. The primary corneal endothelial cells were identified by HE staining and the morphological changes were observed by electron microscope. Main outcome measures: morphology and survival rate of corneal endothelial cells. Results all the obtained cells were confirmed as corneal endothelial cell phenotypes. No corneal epithelial cells and stromal cells were contaminated. After cultured for 24 hours in the five groups, HE staining and electron microscopy showed that the corneal endothelial cells cultured under normal pressure microenvironment were closely arranged, and hexagonal cells were the majority. The microvilli on the surface of the cells were abundant, the nuclear chromatin was abundant, but the activity of corneal endothelial cells in high pressure culture was poor, and the intercellular gap was enlarged. Flow cytometry analysis showed that the normal pressure group was 30 mmHg group. The survival rate of corneal endothelial cells cultured for 24 hours in the pressure fluctuating group was 98.16 鹵0.45 and 78.83 鹵1.65% respectively. 70.2 鹵3.54 and 41.33 鹵0.25 respectively. In the high pressure culture group, the pressure increased and the duration prolonged with the increase of pressure. Conclusion normal pressure microenvironment culture can positively regulate the morphology and function of corneal endothelial cells, while high pressure can damage corneal endothelial cells and increase with time.
【作者單位】： 南昌大學;江西新視界眼科醫(yī)院;中山眼科中心;南昌愛爾眼科;南昌大學附屬眼科醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學基金(30801263)
【分類號】：R772.2
【正文快照】： 近年干細胞領域的研究證實,組織的微環(huán)境不同,導致組織干細胞的發(fā)育方向也不同,這提示細胞的微環(huán)境對其生理功能具有重要的調控作用[1]。Koizumi和Yuriko等[2-3]運用氣-液相技術,模擬活體角膜上皮細胞處于空氣和淚液交互作用形成的 氣-液面環(huán)境,培養(yǎng)的角膜上皮細胞連接更為緊

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 張翠英;劉華;;角膜內皮細胞的損傷及促進其修復的因素[J];醫(yī)學綜述;2007年11期

2 王雅娜;顏偉年;葉宇峰;董映;;外減壓法娩核對角膜內皮細胞的影響[J];實用醫(yī)學雜志;2009年19期

3 潘作新,石珍榮,孫為榮;有關角膜內皮細胞的觀察[J];青島醫(yī)學院學報;1979年02期

4 王東初;角膜內皮細胞[J];國外醫(yī)學.眼科學分冊;1984年05期

5 王麗婭;角膜內皮細胞活性的檢測[J];國外醫(yī)學.眼科學分冊;1997年03期

6 張忠偉;宋彩萍;;超聲乳化白內障吸除術后角膜內皮細胞損傷及修復的臨床分析[J];中國處方藥;2014年06期

7 趙紹貞,孫慧敏,袁佳琴;準分子激光屈光性角膜切削術對角膜內皮細胞的影響[J];眼科研究;2000年02期

8 楊亞波,姚克,杜新華,夏文琴;準分子激光原位角膜磨鑲術后角膜內皮細胞的變化[J];中華眼科雜志;2002年01期

9 王旭,謝立信,史偉云;外源基因轉入角膜內皮細胞的實驗研究[J];中華眼科雜志;2002年02期

10 王平,姜德詠;近視對青少年及兒童角膜內皮細胞的影響[J];中華眼科雜志;2003年02期

相關會議論文 前10條

1 蘇紅英;;角膜內皮細胞計的護理操作與應用[A];全國五官科護理學術交流暨專題講座會議論文匯編[C];2005年

2 董仰曾;;原發(fā)性閉角型青光眼對角膜內皮細胞的影響[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

3 丁蕾;申家泉;唐俠;;急性閉角型青光眼角膜內皮細胞功能的相關影響因素分析[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

4 史芳榮;劉洛如;杜獻芳;張東魁;;準分子激光原位角膜磨鑲術對角膜內皮細胞的影響[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

5 陳斯;;不同年齡段年齡相關性白內障患者角膜內皮細胞情況研究[A];2011年浙江省眼科學術會議論文集[C];2011年

6 俞頌平;施天嚴;范大軍;陳戰(zhàn)巧;李穎;;白內障超聲乳化術后角膜內皮細胞的研究[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

7 俞頌平;施天嚴;范大軍;王少云;;白內障超聲乳化術后角膜內皮細胞的研究[A];2007年浙江省眼科學術會議論文集[C];2007年

8 徐海銘;洪朝陽;;虹膜固定型PR-IOL植入術矯正高度近視對角膜內皮細胞影響的臨床觀察[A];浙江省中西醫(yī)結合學會眼科專業(yè)委員會第九次學術年會暨省級繼續(xù)教育學習班論文匯編[C];2006年

9 林嬡;徐錦堂;陳建蘇;吳靜;;非促分裂型haFGF對角膜內皮細胞的保護作用[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

10 張少維;邢怡橋;艾明;楊安懷;葉美紅;梅海峰;;硅油取出聯(lián)合超聲乳化人工晶體植入術對角膜內皮細胞的影響[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

相關博士學位論文 前4條

1 李東侃;人β-神經生長因子基因轉染體外培養(yǎng)貓角膜內皮細胞促進其分裂再生的實驗研究[D];青島大學;2004年

2 羅文娟;人血小板源性生長因子基因B轉染體外培養(yǎng)貓角膜內皮細胞的生物學效應[D];青島大學;2005年

3 趙清梅;山羊角膜上皮細胞與角膜內皮細胞分離培養(yǎng)研究[D];西北農林科技大學;2008年

4 宋靜;小分子化合物J2作用于大鼠角膜細胞的體外及體內實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2011年

相關碩士學位論文 前10條

1 熊思盈;不同術式對高度近視合并白內障患者角膜內皮細胞的影響[D];桂林醫(yī)學院;2016年

2 李嫻;急性高眼壓對大鼠角膜內皮細胞屏障功能及泵功能的影響[D];南華大學;2016年

3 胡曉琴;兔角膜內皮細胞壓力仿生培養(yǎng)及調控機制的研究[D];南昌大學;2008年

4 梁玲玲;角膜內皮細胞壓力調控及高壓力損傷機制的研究[D];南昌大學;2010年

5 袁媛;激光對角膜內皮細胞的影響[D];華中科技大學;2007年

6 丁蕾;急性閉角型青光眼患者角膜內皮細胞功能的相關影響因素分析[D];山東大學;2007年

7 賈艷紅;深低溫冷凍保存角膜內皮細胞活性的實驗研究[D];鄭州大學;2007年

8 高彥;人胎兒角膜內皮細胞的體外培養(yǎng)和性質鑒定[D];青島大學;2009年

9 于秋濤;家兔（Oryctolagus curiculus）角膜內皮細胞系的建立及其生物相容性研究[D];中國海洋大學;2005年

10 呂明原;急性閉角型青光眼超聲乳化術后角膜內皮細胞的損傷及相關影響因素的研究[D];青島大學;2011年

，

本文編號：1454557