本文關(guān)鍵詞：聚乙二醇水凝膠膜為載體的人角膜上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)研究　出處：《眼科》2016年06期 　論文類(lèi)型：期刊論文

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【摘要】：目的觀察人角膜上皮細(xì)胞(corneal limbal epithelial cells,CLEC)的生物學(xué)特性,探討CLEC在普通培養(yǎng)皿和聚乙二醇水凝膠膜(poly(ethylene glycol)-based hydrogel films,PHF)上的增殖率差異。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)研究。研究對(duì)象人角膜上皮細(xì)胞。方法采用組織塊培養(yǎng)法體外擴(kuò)增CLEC,待細(xì)胞生長(zhǎng)至指數(shù)生長(zhǎng)期,分別種植于普通培養(yǎng)皿和PHF上,倒置顯微鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn),利用免疫熒光對(duì)其鑒定,利用CCK-8比色法觀察兩組細(xì)胞相對(duì)增殖率(relative growth rate,RGR)的差異。主要指標(biāo)光鏡下CLEC的生長(zhǎng),AE1染色,CCK-8比色法的吸光度(optical density,OD)值。結(jié)果光鏡下可見(jiàn)CLEC在普通培養(yǎng)皿和PHF上均能移行擴(kuò)增、融合成片,在PHF上的生長(zhǎng)速度與普通培養(yǎng)皿組相近。兩組細(xì)胞AE1熒光染色均呈陽(yáng)性,PHF組陽(yáng)性率(73.26%±8.84%)與普通培養(yǎng)皿組(70.84%±3.51%)基本相同。PHF組在12 h(0.89±0.06)、24 h(1.13±0.10)、48 h(1.24±0.03)的OD值與普通培養(yǎng)皿組(0.89±0.03、1.08±0.04、1.28±0.09)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.79,0.36,0.76)。PHF組細(xì)胞在12 h(99.12%±4.81%)、24 h(103.74%±5.55%)、48 h(97.83%±13.37%)的RGR均大于75%,各時(shí)間點(diǎn)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.37,0.90)。結(jié)論P(yáng)HF可以作為體外擴(kuò)增角膜上皮細(xì)胞的良好載體。
[Abstract]:......
【作者單位】： 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一臨床醫(yī)院眼科;哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二臨床醫(yī)院內(nèi)分泌科;山東省青島市膠州市人民醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：黑龍江省杰出青年科學(xué)基金(JC2016019) 黑龍江省屬科研院所自擬課題項(xiàng)目(201608)
【分類(lèi)號(hào)】：R772.2
【正文快照】： 角膜緣干細(xì)胞(limbal stem cells,LSC)是角膜上皮細(xì)胞(corneal limbal epithelial cells,CLEC)再生的源泉,若手術(shù)、外傷、感染等因素?fù)p傷了LSC,出現(xiàn)角膜緣干細(xì)胞缺陷,則會(huì)導(dǎo)致角膜完整性喪失和透明度降低,最終導(dǎo)致角膜結(jié)膜化、血管化、眼表慢性炎癥等改變[1]。角膜干細(xì)胞移植

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