本文關(guān)鍵詞：泛素特異性蛋白酶7阻低后對喉癌Hep2細(xì)胞的生物學(xué)特性影響的機(jī)制研究

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【摘要】：目的:泛素特異性蛋白酶7(ubiquitin specific protease 7,USP7)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著重要的聯(lián)系,已有研究表明USP7在喉癌組織中呈高表達(dá),阻低USP7后,喉癌細(xì)胞增殖能力、細(xì)胞周期及細(xì)胞侵襲能力等發(fā)生明顯改變,但機(jī)制不明。本研究通過siRNA(small interfering RNA)阻低USP7在喉癌Hep2細(xì)胞中的表達(dá),通過轉(zhuǎn)錄組測序篩選USP7阻低后的喉癌Hep2細(xì)胞中差異表達(dá)的基因,探討USP7對喉癌細(xì)胞的生物學(xué)行為的作用機(jī)制。方法:設(shè)計(jì)特異性siRNA在慢病毒介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染喉癌Hep2細(xì)胞株并特異性阻低USP7的表達(dá),提取mRNA后通過轉(zhuǎn)錄組測序篩選并分析USP7阻低后喉癌細(xì)胞的差異表達(dá)基因。結(jié)果:1.特異性的siRNA明顯阻低了喉癌細(xì)胞中USP7的表達(dá)。2.通過轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)發(fā)現(xiàn),與未給予任何處理的喉癌細(xì)胞組相比,siRNA阻低USP7后的喉癌細(xì)胞有57個(gè)基因上調(diào)(60.6%),37個(gè)基因下調(diào)(39.4%)。并且通過擴(kuò)大差異倍數(shù)(≥4倍),發(fā)現(xiàn)了SULT1A4、MTPN、CTF2IP1、BUSP5、SCLY、PI3等22個(gè)顯著上調(diào)基因,SULT1A3、TICAM2、MUC13、ARL17B等11個(gè)顯著下調(diào)基因。3.通過GO功能富集性分析發(fā)現(xiàn)差異基因主要集中在細(xì)胞循環(huán)與增殖、新陳代謝、正負(fù)調(diào)控、酶的催化活性、細(xì)胞凋亡、信號傳導(dǎo)、免疫應(yīng)答等方面。結(jié)論:USP7對喉癌細(xì)胞增殖能力、細(xì)胞周期以及細(xì)胞侵襲能力等生物學(xué)行為影響的可能機(jī)制涉及多個(gè)方面,主要與細(xì)胞循環(huán)與增殖、新陳代謝、正負(fù)調(diào)控、酶的催化活性、細(xì)胞凋亡、信號傳導(dǎo)、免疫應(yīng)答等有關(guān),其中一部分差異表達(dá)基因可能是喉癌細(xì)胞生物學(xué)治療的潛在靶標(biāo),但進(jìn)一步驗(yàn)證是必要的。
【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.65

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