本文關(guān)鍵詞：慢性脊髓損傷SEP及病理相關(guān)性研究

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【摘要】：目的:通過椎管內(nèi)放置聚氨酯壓塊建立慢性脊髓壓迫模型,探討SEP在該模型相應(yīng)時間點與病理變化相關(guān)性。方法:取健康成年雄性SD大鼠96只,依次編號,隨機將其分為實驗組(n=48)與對照組(I組,n=48),其中實驗組大鼠行頸6節(jié)段椎板切除,暴露脊髓,并將可膨脹高分子材料放置于頸5節(jié)段椎管內(nèi)左后方側(cè),建立慢性脊髓壓迫模型;對照組中大鼠僅切除頸6節(jié)段椎板。在成功建立模型后第1天、2天、3天、7天、10天、14天、21天、28天,分別記錄相應(yīng)時間節(jié)點大鼠的BBB評分、SEP信號及脊髓損傷病理變化,并分別記錄為A組、B組、C組、D組、E組、F組、G組、H組,將對照組設(shè)為I組。觀察并記錄實驗組大鼠BBB評分,將SEP信號進行處理分析得出數(shù)據(jù),通過HE染色觀察受壓脊髓組織病理變化情況,采用TUNEL染色檢測損傷脊髓組織中細胞凋亡情況,并觀察細胞凋亡與壓迫時間的關(guān)系,最后通過免疫組化檢測GFAP蛋白在壓迫脊髓節(jié)段中的表達。結(jié)果:1.BBB評分:大鼠建模后至術(shù)后第3天期間,單側(cè)(左)前肢活動嚴重受限,步態(tài)異常,術(shù)后第3天(C組)BBB評分最低,術(shù)后第3天組(C組)與7天組(D組)存在統(tǒng)計學(xué)差異,隨后實驗組(A-H組)中大鼠評分逐漸增高,術(shù)后10天(E組)進入平臺期時,行為學(xué)評分接近對照組(I組),但差別無統(tǒng)計學(xué)意義;2.SEP信號:實驗組(A-H組)中大鼠SEP均可觀察到不同程度的信號波幅值降低、潛伏期延長,其中術(shù)后14天組(F組)尤為顯著,與E組、G組及I組比較存在統(tǒng)計學(xué)差異,隨著壓迫時間延長SEP信號曲線幅值升高,潛伏期縮短,波形逐漸穩(wěn)定,進入平臺期,但未能恢復(fù)至正常形態(tài);3.HE染色:所有實驗組顯微鏡下可見脊髓受壓處白質(zhì)疏松,出現(xiàn)疏網(wǎng)狀改變,部分可見脫髓鞘改變;神經(jīng)細胞受壓水腫;所有實驗組中標本均可見到不同程度的神經(jīng)細胞數(shù)目減少,還可觀察到膠質(zhì)細胞出現(xiàn)不同程度腫大,小膠質(zhì)細胞大量增生并包繞神經(jīng)細胞的現(xiàn)象,其中術(shù)后1、2、3天組(A-C組)脊髓標本中可見明顯脊髓水腫、液化,術(shù)后7天組中可見脊髓前角運動神經(jīng)元細胞出血壞死,數(shù)量減少,大量空泡形成;4.TUNEL染色:觀察到大鼠術(shù)后實驗組中凋亡神經(jīng)元陽性細胞計數(shù)逐漸增多,于術(shù)后14天(F組)達到峰值,并穩(wěn)定在該水平,其與術(shù)后7天組(D組)存在統(tǒng)計學(xué)差異,與術(shù)后21天組(G組)及28天組(H組)計數(shù)無明顯差別;5.免疫組織化學(xué):實驗組術(shù)后膠質(zhì)細胞數(shù)量明顯增多,其特征表現(xiàn)為GFAP染色陽性細胞數(shù)量增加及形態(tài)學(xué)變化,GFAP細胞計數(shù)達到峰值,與術(shù)后14天組(F組)及對照組(I組)存在統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),與術(shù)后28天組(H組)比較無明顯差別。結(jié)論:通過實驗證明,BBB評分:大鼠慢性脊髓損傷模型建立術(shù)后3天內(nèi)評分降低顯著,是聚氨酯壓塊快速膨脹壓迫脊髓,出現(xiàn)脊髓組織水腫。從術(shù)后10天開始,BBB評分進入穩(wěn)定期。SEP是有效評估慢性脊髓損傷的敏感方法,A-F組中大鼠SEP信號波幅逐漸降低,潛伏期逐漸延長,F組信號提示脊髓損傷最嚴重,隨后逐漸恢復(fù),術(shù)后21日進入平臺期,但未能恢復(fù)正常;HE染色:在建立模型后脊髓組織至術(shù)后14日病變最重,隨后細胞形態(tài)有所恢復(fù),脊髓神經(jīng)功能于術(shù)后21日起進入穩(wěn)定期;TUNEL染色:術(shù)后14天細胞凋亡的表達最為顯著,凋亡細胞為灰質(zhì)內(nèi)神經(jīng)元細胞及白質(zhì)中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞;免疫組化:術(shù)后21天標本經(jīng)免疫組化染色后變化最為明顯,GFAP的表達達到高峰,計數(shù)顯著高于A-E各組(p0.05)。綜上所述,該模型中大鼠慢性脊髓損傷最嚴重時期為術(shù)后14日,這也體現(xiàn)了SEP檢測結(jié)果與病理學(xué)染色結(jié)果的一致性。
【關(guān)鍵詞】：慢性脊髓損傷 可膨脹材料 動物模型 體感誘發(fā)電位 星形膠質(zhì)細胞
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R651.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 縮略語/符號說明9-10
• 前言10-15
• 研究現(xiàn)狀、成果10-13
• 研究目的、方法13-15
• 對象和方法15-28
• 結(jié)果28-37
• 討論37-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻47-50
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明50-51
• 綜述 下頸椎骨折脫位前路手術(shù)治療進展51-64
• 綜述參考文獻57-64
• 致謝64-65
• 個人簡歷65

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本文編號：909240