[目的]椎間盤退變(Intervertebral degenerative disc,IVDD)是脊柱退行性疾病的病理基礎,引起下腰痛的重要原因。目前,臨床上針對IVDD的治療手段主要以緩解臨床癥狀為主,并不能阻止、延緩或逆轉IVDD病理進程,尚無有效的防治措施。IVDD是一個繁瑣的過程,它的發(fā)生及復發(fā)率高且危害大,受多要素、復雜機制調節(jié),對IVDD發(fā)生的具體機制尚不清楚。研究證明髓核細胞的凋亡和數量減少會導致細胞外基質合成減少,破壞細胞外基質合成與降解動態(tài)平衡,可導致椎間盤退變。在脊柱椎間盤退變的進程中,炎癥反應是其一個主要的病理變化,非編碼小RNA(MicroRNAs、miRNAs)參與調控細胞的增殖、分化、凋亡和炎癥反應。但是,MicroRNAs在炎癥反應條件下如何參與調控髓核細胞外基質降解的作用還不完全清楚。因此,本研究旨在:體外培養(yǎng)髓核細胞及構建髓核細胞炎癥損傷模型,研究miRNA-503在IL-1β引起的人椎間盤髓核細胞外基質降解中的作用,為防治椎間盤退變提供理論及實驗依據。[方法]1.第一部分,(1)收集10例因椎間盤突出癥在椎間孔孔鏡下摘除的椎間盤髓核標本[Pfirrma...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．?１?．人髓核細胞甲苯胺藍染色（１０?Ｘ?）??２．?２?ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測髄核細胞角蛋白１９ｍＲＮＡ的鑒定結果??

利用甲苯胺藍可將細胞質內蛋白多糖染成藍色的特點，我們將髓核細胞爬片??后行甲苯胺藍染色。染色結果顯示甲苯胺藍為陽性表現，所培養(yǎng)髓核細胞胞漿呈??藍色，且胞核附近著色程度較深（圖２．１），提示所培養(yǎng)髓核細胞合成聚集蛋白??聚糖。蘇木素復染，細胞核呈藍色。??圖２．?１?．人髓核細胞....

圖１．分離培養(yǎng)的椎間盤髓核細胞形態(tài)圖（２００Ｘ）??

與其他細胞相接觸，２０天細胞呈后放射狀、片狀，３０天后呈團簇狀??生長分布，Ｐ０代髓核細胞胞漿內分泌顆粒較少，Ｐ１代髓核細胞胞漿內分泌顆粒??明顯增多。（圖１）??——??ｍ：：ｒ?－??■■ＨＩ??２１??

圖2.3.1K19擴增曲線圖

用ＲＴ－ＰＣＲ檢測Ｋ－１９在人的髓核細胞中與人纖維環(huán)細胞中的表達情況，與對??照組相比，可以發(fā)現人的髓核細胞中的Ｋ－１９顯著高表達（Ｐ＜０．?０５）。因此進一??步證實培養(yǎng)的髓核細胞的真實可靠性，為后續(xù)細胞實驗奠定了基礎。??Ｋｅｒａｔｉｎ１９??１５－．??〇??Ｃ?＊＊＊??....

圖２．?３．?３?Ｋ１９ｍＲＮＡ在人的髓核細胞中與人纖維環(huán)細胞中相比顯著高表達

利用甲苯胺藍可將細胞質內蛋白多糖染成藍色的特點，我們將髓核細胞爬片??后行甲苯胺藍染色。染色結果顯示甲苯胺藍為陽性表現，所培養(yǎng)髓核細胞胞漿呈??藍色，且胞核附近著色程度較深（圖２．１），提示所培養(yǎng)髓核細胞合成聚集蛋白??聚糖。蘇木素復染，細胞核呈藍色。??圖２．?１?．人髓核細胞....

本文編號：4028805