目的與意義:腰痛是當(dāng)代社會(huì)中的多發(fā)病與常見病,在人群中十分普遍。70%至85%的人曾患過腰痛,且首次發(fā)作后再次發(fā)作的概率很高。椎間盤退變(Intervertebral disc degeneration,IVDD)的基本病理特征是髓核細(xì)胞的衰老與凋亡、細(xì)胞外基質(zhì)的降解、椎間盤進(jìn)行性的纖維化。近來有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),椎間盤退變與代謝性疾病,尤其是與糖尿病具有明顯的相關(guān)性,但具體機(jī)制尚未有深入研究。本實(shí)驗(yàn)擬探究高糖微環(huán)境對(duì)椎間盤退行性變的影響以及NF-κB信號(hào)通路在其中的作用,進(jìn)一步揭示高糖誘導(dǎo)椎間盤髓核細(xì)胞退變的機(jī)制,為延緩、阻止椎間盤退變提供研究基礎(chǔ),為治療IVDD帶來新的策略和方法。研究方法:1、高糖微環(huán)境誘導(dǎo)IVDD發(fā)病:使用5.5 mmol/L、15mmol/L、30 mmol/L、100 mmol/L不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基培養(yǎng)髓核細(xì)胞,RT-PCR檢測髓核細(xì)胞MMP-3、MMP-13、Aggrecan、CollagenⅡ的表達(dá);2、高糖微環(huán)境通過NF-κB信號(hào)通路調(diào)控IVDD發(fā)病:使用Bay11-7082抑制NF-κB信號(hào)通路激活,再使用RT-PCR、Western Blot檢測髓核細(xì)...

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
前言
1 高糖誘導(dǎo)的退變椎間盤髓核細(xì)胞模型的建立
    1.1 引言
    1.2 材料與方法
        1.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        1.2.3 椎間盤標(biāo)本收集
        1.2.4 原代髓核細(xì)胞提取與培養(yǎng)
        1.2.5 髓核細(xì)胞凍存
        1.2.6 髓核細(xì)胞復(fù)蘇
        1.2.7 不同濃度葡萄糖培養(yǎng)髓核細(xì)胞
        1.2.8 RT-PCR
        1.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 髓核細(xì)胞形態(tài)
        1.3.2 RT-PCR檢測結(jié)果
    1.4 討論
    1.5 結(jié)論
2 高糖通過轉(zhuǎn)錄因子NF-κB誘導(dǎo)椎間盤髓核細(xì)胞退變
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 Bay11-7082 抑制 NF-κB 信號(hào)通路
        2.2.4 RT-PCR
        2.2.5 Western Blot檢測
        2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 RT-PCR檢測NF-κB通路抑制后細(xì)胞外基質(zhì)與金屬蛋白酶的表達(dá)
        2.3.2 Western Blot檢測MMP-3、MMP-13 蛋白表達(dá)
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
3 結(jié)束語
    3.1 主要工作與創(chuàng)新點(diǎn)
    3.2 后續(xù)研究工作
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表或錄用的論文



本文編號(hào)：4008491