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L-抗壞血酸在改善大鼠DCD供肝常溫機械灌注灌注液中的應用研究

發(fā)布時間:2024-06-29 06:36
  目的:探討L-抗壞血酸應用于常溫機械灌注的灌注液中的最佳濃度及對大鼠DCD供肝的缺血再灌注損傷的改善作用。方法:將24只雄性wistar大鼠隨機分為靜態(tài)冷保存組(static cold storage,SCS)、常溫機械灌注組(normothermic machine perfusion,NMP)和L-抗壞血酸組(藥物濃度梯度分組分別為1m M、2m M、5m M、10m M),每組4只大鼠。采用剪開膈肌法建立大鼠心臟死亡模型并記錄時間,在心臟死亡30min后,取出大鼠肝臟,連接到大鼠肝臟體外常溫攜氧機械灌注系統(tǒng)中,灌注4h。同時設置不加L-抗壞血酸的常溫機械灌注對照組與用UW液進行冷保存的對照組。在常溫機械灌注過程中,分別于10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min、2h、3h、4h取灌注液1ml,檢測AST、ALT、LDH、-GT水平,根據酶學水平篩選最佳L-抗壞血酸濃度;并在灌注結束后取膽汁稱重;在常溫機械灌注或靜態(tài)冷保存4h后,留取肝組織標本行HE染色,觀察DCD大鼠肝組織形態(tài);PAS染色觀察DCD大鼠肝組織糖原消耗及補充情況;分別檢測D...

【文章頁數】:65 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖3.1大鼠離體肝臟灌流(isolatedperfusedratliver,IPRL)系統(tǒng)

圖3.1大鼠離體肝臟灌流(isolatedperfusedratliver,IPRL)系統(tǒng)

肝素德國sigma-aldrich公司胰島素江蘇萬邦生化醫(yī)藥集團有限責任公司異氟烷深圳市瑞沃德生命科技有限公司L-谷氨酰胺以色列BiologicalIndustries公司L-抗壞血酸德國SigmaAldrich公司雙抗(青霉素、鏈霉....


圖4.1灌注過程中AST、ALT、LDH、γ-GT變化趨勢(NMP組:0mM)

圖4.1灌注過程中AST、ALT、LDH、γ-GT變化趨勢(NMP組:0mM)

第4章結果21第4章結果4.1各組肝臟灌注過程中肝臟酶學比較如圖4.1為灌注過程中,10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min、120min、3h、4h,分別取灌注液檢測的酶學水平,AST、ALT、LDH、γ-GT變化趨勢;AST、ALT、....


圖4.3肝臟HE染色與Suzuki’s病理評分a).肝臟病理切片HE染色結果圖:保存結束后,HE染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50m);b).肝臟病理切片Suzuki’s評分.(***表示p<0.001,**表示p<0.01,*表示p<0.05,n=4).μμμ

圖4.3肝臟HE染色與Suzuki’s病理評分a).肝臟病理切片HE染色結果圖:保存結束后,HE染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50m);b).肝臟病理切片Suzuki’s評分.(***表示p<0.001,**表示p<0.01,*表示p<0.05,n=4).μμμ

第4章結果26圖4.3肝臟HE染色與Suzuki’s病理評分a).肝臟病理切片HE染色結果圖:保存結束后,HE染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50m);b).肝臟病理切片Suzuki’s評分.(***表示p<0.001,**表示p<0.01,*表示p<0.0....


圖4.4肝臟PAS染色保存結束后,PAS染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50μμμ

圖4.4肝臟PAS染色保存結束后,PAS染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50μμμ

第4章結果274.3各組肝臟糖原消耗比較各組肝臟保存4h后的PAS染色如圖4.4所示。SCS組肝細胞糖原儲存較少,基本消耗盡;NMP組肝細胞糖原儲存尚可,機械灌注過程中給予補充糖原;L-抗壞血酸組(5mM)肝細胞糖原儲存較好,L-抗壞血酸修復細胞,并于機械灌注過程中給予補充糖原。....



本文編號:3997312

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