目的:探討L-抗壞血酸應(yīng)用于常溫機(jī)械灌注的灌注液中的最佳濃度及對(duì)大鼠DCD供肝的缺血再灌注損傷的改善作用。方法:將24只雄性wistar大鼠隨機(jī)分為靜態(tài)冷保存組(static cold storage,SCS)、常溫機(jī)械灌注組(normothermic machine perfusion,NMP)和L-抗壞血酸組(藥物濃度梯度分組分別為1m M、2m M、5m M、10m M),每組4只大鼠。采用剪開膈肌法建立大鼠心臟死亡模型并記錄時(shí)間,在心臟死亡30min后,取出大鼠肝臟,連接到大鼠肝臟體外常溫?cái)y氧機(jī)械灌注系統(tǒng)中,灌注4h。同時(shí)設(shè)置不加L-抗壞血酸的常溫機(jī)械灌注對(duì)照組與用UW液進(jìn)行冷保存的對(duì)照組。在常溫機(jī)械灌注過程中,分別于10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min、2h、3h、4h取灌注液1ml,檢測(cè)AST、ALT、LDH、-GT水平,根據(jù)酶學(xué)水平篩選最佳L-抗壞血酸濃度;并在灌注結(jié)束后取膽汁稱重;在常溫機(jī)械灌注或靜態(tài)冷保存4h后,留取肝組織標(biāo)本行HE染色,觀察DCD大鼠肝組織形態(tài);PAS染色觀察DCD大鼠肝組織糖原消耗及補(bǔ)充情況;分別檢測(cè)D...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1大鼠離體肝臟灌流（isolatedperfusedratliver,IPRL）系統(tǒng)

肝素德國(guó)sigma-aldrich公司胰島素江蘇萬邦生化醫(yī)藥集團(tuán)有限責(zé)任公司異氟烷深圳市瑞沃德生命科技有限公司L-谷氨酰胺以色列BiologicalIndustries公司L-抗壞血酸德國(guó)SigmaAldrich公司雙抗（青霉素、鏈霉....

圖4.1灌注過程中AST、ALT、LDH、γ-GT變化趨勢(shì)（NMP組：0mM）

第4章結(jié)果21第4章結(jié)果4.1各組肝臟灌注過程中肝臟酶學(xué)比較如圖4.1為灌注過程中，10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min、120min、3h、4h,分別取灌注液檢測(cè)的酶學(xué)水平，AST、ALT、LDH、γ-GT變化趨勢(shì)；AST、ALT、....

圖4.3肝臟HE染色與Suzuki’s病理評(píng)分a).肝臟病理切片HE染色結(jié)果圖：保存結(jié)束后，HE染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50m)；b).肝臟病理切片Suzuki’s評(píng)分.(***表示p<0.001,**表示p<0.01,*表示p<0.05，n=4).μμμ

第4章結(jié)果26圖4.3肝臟HE染色與Suzuki’s病理評(píng)分a).肝臟病理切片HE染色結(jié)果圖：保存結(jié)束后，HE染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50m)；b).肝臟病理切片Suzuki’s評(píng)分.(***表示p<0.001,**表示p<0.01,*表示p<0.0....

圖4.4肝臟PAS染色保存結(jié)束后，PAS染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50μμμ

第4章結(jié)果274.3各組肝臟糖原消耗比較各組肝臟保存4h后的PAS染色如圖4.4所示。SCS組肝細(xì)胞糖原儲(chǔ)存較少，基本消耗盡；NMP組肝細(xì)胞糖原儲(chǔ)存尚可，機(jī)械灌注過程中給予補(bǔ)充糖原；L-抗壞血酸組（5mM）肝細(xì)胞糖原儲(chǔ)存較好，L-抗壞血酸修復(fù)細(xì)胞，并于機(jī)械灌注過程中給予補(bǔ)充糖原。....

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