目的:骨肉瘤(Osteosarcoma,Os)是兒科和青少年最常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤之一,一種罕見的間質(zhì)腫瘤,主要發(fā)生在長骨干骺端,尤其是股骨遠(yuǎn)端、脛骨近端和肱骨。骨肉瘤約占原發(fā)性骨惡性腫瘤的20%,占惡性腫瘤的0.5%。骨肉瘤多發(fā)生在骨骺區(qū),骨骺區(qū)血供豐富,血行轉(zhuǎn)移發(fā)生率高,發(fā)生早,進(jìn)展快。以前的研究表明,如果不及時治療,80%的骨肉瘤患者會發(fā)展為肺轉(zhuǎn)移,這通常是致命的。目前,用于治療骨肉瘤的藥物包括阿霉素、異環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤和順鉑。有些患者化療后預(yù)后差或耐藥,盡管有不同的治療組合,但均難以改善。此外,高劑量的化療藥物有副作用。因此,深入探討研究骨肉瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制,并進(jìn)一步的尋找靶點(diǎn)為骨肉瘤基因治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本研究目的在于探討TRIP6是否通過NF-κB信號通路影響骨肉瘤細(xì)胞的某些行為學(xué)。例如侵襲、遷移、增殖和凋亡。方法:首先根據(jù)說明書的要求配置培養(yǎng)基,再用事先配置好的培養(yǎng)基培養(yǎng)U2OS和MG63兩種骨肉瘤細(xì)胞系。通過構(gòu)建人四質(zhì)粒,分別為sh RNA-TRIP6質(zhì)粒、sh NC質(zhì)粒、pcDNA Flag TRIP6質(zhì)粒和p EX-1質(zhì)粒。sh RNA-TRIP6質(zhì)粒組為沉默T...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖1.TRIP6在人骨肉瘤細(xì)胞系和骨肉瘤組織中表達(dá)增加

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士論文24圖1.TRIP6在人骨肉瘤細(xì)胞系和骨肉瘤組織中表達(dá)增加。(A)Westernblot檢測U2OS、MG63、hFOB1.19細(xì)胞中TRIP6蛋白的表達(dá)水平。采用GAPDH作為內(nèi)參。(B)Westernblot的定量結(jié)果。數(shù)據(jù)歸一化為GAPDH。(C)Wes....

圖2.TRIP6在Os細(xì)胞增殖中起作用

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士論文26用，因?yàn)門RIP6的過表達(dá)抑制了Os的凋亡，而沉默則促進(jìn)了Os的凋亡。圖2.TRIP6在Os細(xì)胞增殖中起作用。(A)Westernblot分析TRIP6沉默的U2OS細(xì)胞系中TRIP6蛋白的表達(dá)水平，并(B)定量分析。(C)Westernblot分析TRI....

圖4.TRIP6敲低和過表達(dá)觀察NF-κB信號通道在Os細(xì)胞的作用

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士論文31達(dá)水平降低和NF-κBP65表達(dá)水平的增加。綜上所述，本研究結(jié)果提示P65可能參與了TRIP6對Os細(xì)胞的增殖作用。圖4.TRIP6敲低和過表達(dá)觀察NF-κB信號通道在Os細(xì)胞的作用。(A)westernblotting檢測的蛋白表達(dá)水平IκBα,P65和....

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