本文關(guān)鍵詞：ZHX3基因沉默對(duì)BMSCs中smad3、smad4、RUNX2表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討鋅指蛋白和同源框3(zinc fingers and homeoboxes 3,ZHX3)基因沉默后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中smad3、smad4、RUNX相關(guān)基因2(RUNX2)表達(dá)的變化。方法復(fù)蘇培養(yǎng)BMSCs,構(gòu)建ZHX3干擾的慢病毒載體并包裝獲得重組病毒顆粒,轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs作為ZHX3沉默組,同時(shí)設(shè)空載病毒轉(zhuǎn)染BMSCs作為載體對(duì)照組及不施加任何處理因素的BMSCs當(dāng)做空白對(duì)照組。熒光顯微鏡下計(jì)算細(xì)胞轉(zhuǎn)染率并通過(guò)免疫印跡技術(shù)觀察轉(zhuǎn)染是否成功;采用堿性磷酸酶和茜素紅染色檢測(cè)各組成骨誘導(dǎo)后細(xì)胞的成骨能力;通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫印跡技術(shù)定性定量檢測(cè)ZHX3沉默后smad3、smad4、RUNX2表達(dá)趨勢(shì)的變化。結(jié)果(1)BMSCs轉(zhuǎn)染后,熒光顯微鏡下可觀察到ZHX3沉默組和載體對(duì)照組呈現(xiàn)明顯的綠色熒光,而空白對(duì)照組未見(jiàn)熒光;免疫印跡結(jié)果顯示沉默組ZHX3基因的表達(dá)水平顯著低于兩個(gè)對(duì)照組。(2)空白對(duì)照組,載體對(duì)照組,ZHX3沉默組均可見(jiàn)堿性磷酸酶陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞及礦化結(jié)節(jié),但后者數(shù)量均小于前兩者。(3)免疫熒光結(jié)果顯示,smad3、smad4的陽(yáng)性表達(dá)主要定位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),而RUNX2主要定位于細(xì)胞核。3組細(xì)胞均觀察到陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞,且空白對(duì)照組與載體對(duì)照組之間熒光強(qiáng)度沒(méi)有顯著差異,但ZHX3基因沉默組的熒光強(qiáng)度顯著低于兩個(gè)對(duì)照組。(4)免疫印跡方法檢測(cè)smad3、smad4、RUNX2的條帶在空白對(duì)照組和載體對(duì)照組中沒(méi)有顯著差異,但兩組均顯著高于ZHX3沉默組(P0.05)。結(jié)論ZHX3基因沉默后BMSCs體外成骨能力延遲可能通過(guò)下調(diào)smad3、smad4、RUNX2來(lái)發(fā)揮作用。
【關(guān)鍵詞】：鋅指蛋白和同源框3 基因沉默 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 smad3 smad4 RUNX相關(guān)基因2
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R68
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語(yǔ)8-9
• 前言9-10
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法10-15
• 結(jié)果15-22
• 討論22-25
• 結(jié)論25-27
• 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 附錄31-41
• 一、文獻(xiàn)綜述 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨相關(guān)通路的研究進(jìn)展31-38
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 二、在學(xué)期間科研成績(jī)38-39
• 三、致謝39-40
• 四、個(gè)人簡(jiǎn)介40-41

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 俞光巖;曹彤;鄒曉暉;張學(xué)慧;傅歆;彭雙清;鄧旭亮;李盛林;劉鶴;肖苒;歐陽(yáng)宏偉;彭暉;陳曉;趙增明;王曉穎;方海琴;路璐;任玉蘭;徐明明;;基于人胚胎干細(xì)胞健康安全評(píng)價(jià)體系的構(gòu)建[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2016年01期

2 Md Shaifur Rahman;Naznin Akhtar;Hossen Mohammad Jamil;Rajat Suvra Banik;Sikder M Asaduzzaman;;TGF-β/BMP signaling and other molecular events: regulation of osteoblastogenesis and bone formation[J];Bone Research;2015年01期

3 李季;秦書(shū)儉;包翠芬;�，幉�;屈惠瑩;;ZHX3基因轉(zhuǎn)染BMSCs及對(duì)體外成骨能力的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志;2014年02期

4 萬(wàn)曉晨;劉翠平;陳海嘯;李繼承;;TGF-β/BMPs、Wnt和MAPK信號(hào)通路在間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化中的作用[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2008年06期

5 楊曉;;Smad4介導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β信號(hào)調(diào)節(jié)骨骼發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的功能[J];生命科學(xué);2008年02期

6 陳琛;葉冬梅;邵淑娟;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β/Smad信號(hào)通路研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2006年02期

7 王運(yùn)濤,鄭啟新,郭曉東;野生型Smad3基因促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年18期

  本文關(guān)鍵詞：ZHX3基因沉默對(duì)BMSCs中smad3、smad4、RUNX2表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：392735