本文關(guān)鍵詞：巨噬細(xì)胞糖皮質(zhì)激素受體信號在小鼠皮膚傷口修復(fù)中的調(diào)控作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景創(chuàng)傷修復(fù)(wound healing)是生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中一個非常熱點(diǎn)的問題。人們在炎癥細(xì)胞、組織細(xì)胞、細(xì)胞因子、生長因子以及細(xì)胞外基質(zhì)等方面都對創(chuàng)傷修復(fù)做了大量的研究,使我們對機(jī)體的這種復(fù)雜的生物學(xué)過程有了更進(jìn)一步的認(rèn)識。巨噬細(xì)胞(macrophage)在創(chuàng)傷修復(fù)中的作用,尤其得到大家的關(guān)注,并對其做了深入的研究,認(rèn)為巨噬細(xì)胞在創(chuàng)傷修復(fù)的各個階段(炎癥反應(yīng)期、細(xì)胞增殖與肉芽形成期和組織重塑期)都發(fā)揮著十分重要的作用。沒有巨噬細(xì)胞就不能完成創(chuàng)傷修復(fù),或者巨噬細(xì)胞的功能發(fā)生障礙也會明顯影響整個創(chuàng)傷修復(fù)的進(jìn)程。糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid,GC)作為一種抗炎和免疫抑制藥物在臨床上得到廣泛的應(yīng)用,然而長時間、大劑量或者不規(guī)范的使用也會帶來一系列嚴(yán)重的不良反應(yīng)和并發(fā)癥,有時甚至影響生命。延遲創(chuàng)傷修復(fù)作為GC的一個不良反應(yīng)在臨床上和動物實驗中早已被大家觀察和認(rèn)識到,雖然人們也做了初步的探索,但是到目前為止對其中的機(jī)制仍沒有得到全面和詳細(xì)的闡明�；谏鲜鲅芯勘尘�,本文以小鼠皮膚傷口修復(fù)為實驗?zāi)Ｐ?以地塞米松(dexamethasone,Dex)作為GC的經(jīng)典代表,從巨噬細(xì)胞的角度探討GC延遲傷口修復(fù)的作用及其機(jī)制。第一部分糖皮質(zhì)激素延遲小鼠皮膚傷口愈合與傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目減少有關(guān)目的:1.證實GC延遲小鼠皮膚傷口愈合;2.證實GC減少小鼠皮膚傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目;3.研究GC對小鼠皮膚傷口局部組織及巨噬細(xì)胞的糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor,GR)水平的影響。方法:小鼠皮膚傷口修復(fù)模型制作完成后,實驗組和對照組分別用Dex和PBS處理,在大體水平每天測量傷口直徑、隔天拍照傷口愈合情況;傷后第7天取兩組小鼠皮膚傷口局部組織進(jìn)行蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色,在顯微鏡下觀察測量傷口直徑并拍照;傷后第7天分別用免疫組織化學(xué)法和流式細(xì)胞術(shù)對兩組小鼠皮膚傷口局部組織巨噬細(xì)胞的數(shù)目進(jìn)行檢測;傷后第7天用Real-time PCR對兩組小鼠皮膚傷口局部組織以及局部巨噬細(xì)胞的GR的m RNA水平進(jìn)行檢測。結(jié)果:1.創(chuàng)傷后第6天和第9天實驗組和對照組傷口直徑分別為3.2±0.2mm,1.9±0.1mm(***,p0.001)和2.5±0.1mm,1.0±0.2mm(***,p0.001);傷后第7天在組織學(xué)水平測量實驗組和對照組傷口直徑分別為3.2±0.2mm,1.2±0.4mm(**,p0.01);可以看出實驗組小鼠皮膚傷口愈合明顯延遲。2.用免疫組織化學(xué)法對傷后第7天傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示每個高倍鏡視野下F4/80+(巨噬細(xì)胞的表面標(biāo)志物)細(xì)胞數(shù)實驗組和對照組分別為18.0±1.7,37.3±3.5(**,p0.01);用流式細(xì)胞儀分析檢測,得到一致的結(jié)果,即Dex可以明顯減少傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目。3.對傷后第7天傷口局部組織以及局部巨噬細(xì)胞GR的m RNA水平進(jìn)行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Dex可以顯著提高傷口局部組織和局部巨噬細(xì)胞GR的轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)論:GC可以減少傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目,從而延遲小鼠皮膚傷口愈合,并且可能是通過GR信號發(fā)揮作用的。第二部分糖皮質(zhì)激素通過抑制巨噬細(xì)胞遷移導(dǎo)致傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目減少目的:探討GC導(dǎo)致小鼠皮膚傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目減少的初步機(jī)制。方法:首先我們用ELISA法檢測了實驗組和對照組小鼠血清中趨化因子CXCL1,CXCL2的水平,并用流式細(xì)胞術(shù)對體外培養(yǎng)的兩組巨噬細(xì)胞表面的趨化因子受體CXCR2的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測。然后我們分別用經(jīng)典的體內(nèi)細(xì)胞遷移實驗和體外Trans-well實驗對Dex和PBS處理的巨噬細(xì)胞遷移能力進(jìn)行了評估,并對遷移后巨噬細(xì)胞CXCR2的表達(dá)進(jìn)行了檢測,最后從形態(tài)學(xué)上對體外培養(yǎng)的兩組巨噬細(xì)胞進(jìn)行了觀察。結(jié)果:與對照組相比,實驗組小鼠血清中CXCL1,CXCL2的水平明顯降低;流式細(xì)胞術(shù)檢測到體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞趨化因子受體CXCR2的平均熒光強(qiáng)度(mean fluorescence intensity,MFI)實驗組較對照組也明顯減弱;體內(nèi)細(xì)胞遷移實驗和體外Trans-well實驗對巨噬細(xì)胞遷移能力進(jìn)行評估,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Dex可以明顯抑制巨噬細(xì)胞的遷移,另外對遷移后的巨噬細(xì)胞趨化因子受體CXCR2水平進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示實驗組巨噬細(xì)胞CXCR2顯著降低。體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察表明Dex可以抑制巨噬細(xì)胞偽足的生長。結(jié)論:GC可能是通過下調(diào)CXCL1/2-CXCR2來抑制巨噬細(xì)胞的遷移,從而導(dǎo)致小鼠皮膚傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目減少。第三部分糖皮質(zhì)激素通過糖皮質(zhì)激素受體信號減少傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目并延遲皮膚傷口愈合目的:初步探討GC使傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目減少,導(dǎo)致小鼠皮膚傷口愈合延遲的信號通路。方法:我們采用了GR的阻斷劑——米非司酮(mifepristone,RU486)阻斷GC-GR信號通路后,再次進(jìn)行了小鼠皮膚傷口修復(fù)實驗。將小鼠分為三組:PBS組,每天腹腔注射PBS;Dex組,每天腹腔注射Dex溶液(5mg/kg);Dex+RU486組,每天注射Dex溶液(5mg/kg)和RU486溶液(2mg/kg)。然后同第一部分,我們分別從大體水平和組織學(xué)水平評估小鼠皮膚傷口愈合情況,并用免疫組織化學(xué)法和流式細(xì)胞術(shù)檢測傷口局部巨噬細(xì)胞的數(shù)目,同時檢測傷口局部巨噬細(xì)胞GR的水平。結(jié)果:從大體水平和組織學(xué)水平得到的結(jié)果均發(fā)現(xiàn):Dex+RU486組小鼠皮膚傷口愈合速度明顯較Dex組加快,幾乎接近PBS組小鼠皮膚傷口愈合速度。免疫組織化學(xué)法和流式細(xì)胞術(shù)檢測傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目,結(jié)果顯示:小鼠皮膚傷口局部巨噬細(xì)胞(F4/80+和CD11b+F4/80+細(xì)胞)數(shù)目Dex+RU486組和PBS組接近,都較Dex組顯著增加。此外流式細(xì)胞術(shù)對傷口局部巨噬細(xì)胞GR的水平檢測的結(jié)果顯示:Dex+RU486組小鼠傷口巨噬細(xì)胞GR的MFI較Dex組明顯減弱,而與PBS組無差異。Dex+RU486組小鼠傷口巨噬細(xì)胞GR的MFI較Dex組明顯減弱,而與PBS組無差異。結(jié)論:GC確實是通過GC-GR信號抑制巨噬細(xì)胞遷移到創(chuàng)傷局部從而導(dǎo)致小鼠皮膚傷口延遲愈合。
【關(guān)鍵詞】：傷口修復(fù) 巨噬細(xì)胞 糖皮質(zhì)激素
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R641
【目錄】：

• 英文縮略詞表6-8
• 中文摘要8-12
• 英文摘要12-17
• 前言17-20
• 第一部分 糖皮質(zhì)激素延遲小鼠皮膚傷口愈合與傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目減少有關(guān)20-32
• 材料和方法20-27
• 實驗結(jié)果27-30
• 討論30-32
• 第二部分 糖皮質(zhì)激素通過抑制巨噬細(xì)胞遷移導(dǎo)致傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目減少32-41
• 材料和方法32-37
• 實驗結(jié)果37-39
• 討論39-41
• 第三部分 糖皮質(zhì)激素通過糖皮質(zhì)激素受體信號減少傷口局部巨噬細(xì)胞數(shù)目并延遲皮膚傷口愈合41-48
• 材料和方法41-43
• 實驗結(jié)果43-47
• 討論47-48
• 全文小結(jié)48-49
• 參考文獻(xiàn)49-54
• 附錄54-56
• 致謝56-57
• 綜述57-66
• 參考文獻(xiàn)63-66

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;豚鼠巨噬細(xì)胞經(jīng)P_(204)處理后的抗石英細(xì)胞毒作用[J];國外醫(yī)學(xué)參考資料(衛(wèi)生學(xué)分冊);1976年04期

2 鄧俠進(jìn);;巨噬細(xì)胞的抗癌作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1979年02期

3 陸天才;;疾病對肺巨噬細(xì)胞的影響[J];煤礦醫(yī)學(xué);1982年01期

4 郭瑞清;祝彼得;;一種分離巨噬細(xì)胞的簡單方法[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1990年02期

5 謝志堅;巨噬細(xì)胞異質(zhì)性[J];醫(yī)學(xué)綜述;2001年06期

6 饒艷;運(yùn)動及神經(jīng)內(nèi)分泌對巨噬細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)[J];體育與科學(xué);2002年05期

7 朱金元;;吸煙對肺巨噬細(xì)胞的影響[J];浙江醫(yī)學(xué)教育;2003年01期

8 張俊峰;過氧化物酶體增殖物激活受體與單核/巨噬細(xì)胞系[J];醫(yī)學(xué)綜述;2004年03期

9 韋錦學(xué);顧軍;;巨噬細(xì)胞的激活誘導(dǎo)死亡[J];生命科學(xué);2006年02期

10 李曉曦;郭寧;曹雪濤;;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞促進(jìn)腫瘤生長與轉(zhuǎn)移的研究現(xiàn)狀[J];中國腫瘤生物治療雜志;2008年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 史玉玲;王又明;豐美福;;巨噬細(xì)胞激活作用的研究[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

2 吳國明;周輝;;巨噬細(xì)胞和創(chuàng)傷纖維化[A];2009年浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

3 李奇;王海杰;;透明質(zhì)酸對于淋巴結(jié)巨噬細(xì)胞運(yùn)動的影響[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

4 劉革修;歐大明;劉軍花;黃紅林;廖端芳;;丙丁酚在體外能抑制巨噬細(xì)胞脂質(zhì)氧化介導(dǎo)的低密度脂蛋白氧化并調(diào)節(jié)氧化巨噬細(xì)胞的分泌功能[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊）[C];1999年

5 葉金善;楊麗霞;郭瑞威;;環(huán)氧化酶-2/前列腺素E_2在血管緊張素Ⅱ刺激巨噬細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子中的作用[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

6 秦帥;陳希;孔德明;;構(gòu)建由綠色熒光標(biāo)記巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因斑馬魚系[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌代謝學(xué)術(shù)會論文匯編[C];2012年

7 武劍華;徐惠綿;;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在胃癌中的相關(guān)研究[A];第9屆全國胃癌學(xué)術(shù)會議暨第二屆陽光長城腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2014年

8 何軍;;血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體升高巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

9 宋盛;周非凡;邢達(dá);;PDT誘導(dǎo)的凋亡細(xì)胞對巨噬細(xì)胞NO合成的影響[A];第七屆全國光生物學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2010年

10 張磊;朱建華;黃元偉;姚航平;;血管緊張素Ⅱ?qū)奘杉?xì)胞(THP-1重細(xì)胞)凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體表達(dá)的影響[A];浙江省免疫學(xué)會第五次學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2004年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 通訊員 李靜 記者 胡德榮;惡性腫瘤巨噬細(xì)胞未必皆“惡人”[N];健康報;2014年

2 蘭克;以嘗試用巨噬細(xì)胞治癱瘓[N];科技日報;2000年

3 薛佳;免疫系統(tǒng)——人體的“衛(wèi)士”[N];保健時報;2009年

4 記者 胡德榮;鐵泵蛋白“維穩(wěn)”鐵代謝作用首次闡明[N];健康報;2011年

5 侯嘉 何新鄉(xiāng);硒的神奇功能[N];中國食品質(zhì)量報;2003年

6 唐穎 倪兵 陳代杰;巨噬細(xì)胞泡沫化抑制劑研究快步進(jìn)行[N];中國醫(yī)藥報;2006年

7 劉元江;新發(fā)現(xiàn)解釋腫瘤為何易成“漏網(wǎng)之魚”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2007年

8 本報記者 侯嘉 通訊員 何新鄉(xiāng);今天你補(bǔ)硒了嗎[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2003年

9 左志剛;升血小板藥使用注意[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

10 記者 許琦敏;“鐵泵”蛋白幫助回收鐵元素[N];文匯報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周赤燕;巨噬細(xì)胞MsrA對動脈粥樣硬化的干預(yù)研究[D];武漢大學(xué);2013年

2 章桂忠;TIPE2蛋白調(diào)控細(xì)胞增殖和炎癥的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

3 張瑜;DKK1抑制巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積及其相關(guān)分子機(jī)制[D];山東大學(xué);2015年

4 孟濤;異丙酚對心臟收縮功能的抑制作用及其對巨噬細(xì)胞分泌功能調(diào)節(jié)的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

5 周興;基于酵母微囊構(gòu)建新型口服巨噬細(xì)胞靶向遞送系統(tǒng)的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 蔣興偉;Tim-3對巨噬細(xì)胞極化的調(diào)控機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

7 劉伯玉;清道夫受體A介導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬鉤端螺旋體研究[D];上海交通大學(xué);2013年

8 楊紹俊;miRNA-155介導(dǎo)ESAT-6誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制及其在結(jié)核診斷中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 翟光耀;單核/巨噬細(xì)胞Ly6C~(low)亞群在心肌梗死后瘢痕形成期的抗炎特性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

10 韓露;TRB3介導(dǎo)的脂肪組織巨噬細(xì)胞極化與糖尿病冠狀動脈病變關(guān)系的研究[D];山東大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張譯丹;鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑調(diào)控巨噬細(xì)胞表型對實驗性矽肺的作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 盧文冉;HCV core蛋白作用的巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清對肝細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李文建;載脂蛋白E影響巨噬細(xì)胞因子表達(dá)及分型的機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 曹爽;高糖對巨噬細(xì)胞TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 寧程程;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在子宮內(nèi)膜癌雌激素敏感性中的作用及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

6 高龍;PLD4在腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞抑制結(jié)腸癌增殖中的作用研究[D];成都醫(yī)學(xué)院;2015年

7 丁弋娜;TLR4在肺癌相關(guān)巨噬細(xì)胞極性轉(zhuǎn)化及其調(diào)控機(jī)制的研究[D];杭州師范大學(xué);2016年

8 袁震;砷對巨噬細(xì)胞和肝細(xì)胞膽固醇流出及相關(guān)基因ABCA1和ABCG1表達(dá)的影響[D];杭州師范大學(xué);2016年

9 李曉琴;Fc99抑制單核/巨噬細(xì)胞表達(dá)Tenascin-C及緩解關(guān)節(jié)炎癥狀的研究[D];南京大學(xué);2014年

10 王凱凱;綠豆肽的結(jié)構(gòu)鑒定及對小鼠巨噬細(xì)胞免疫活性物質(zhì)的影響作用研究[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：巨噬細(xì)胞糖皮質(zhì)激素受體信號在小鼠皮膚傷口修復(fù)中的調(diào)控作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：373589