目的:脊髓損傷是嚴重的脊柱疾病并發(fā)癥,常導致?lián)p傷節(jié)段以下肢體的嚴重功能障礙,其發(fā)病率逐年上升。外源干細胞的移植為脊髓損傷的治療提供了嶄新思路。骨髓間充質干細胞（BMSCs）的自我更新和增值能力較強、來源廣泛、分離培養(yǎng)簡單,但是由于移植后的BMSCs在宿主體內成活率及轉化率較低,因此限制了其廣泛應用。B cell lymphoma/leukemia gene 2（Bcl-2）被認為是能夠抑制細胞凋亡發(fā)生的抗凋亡基因,是調節(jié)細胞凋亡的基本成員,能對抗多種原因引起的細胞凋亡,。本實驗通過構建大鼠Bcl-2基因過表達載體,轉染BMSCs,將其移植入脊髓損傷大鼠的損傷部位,觀察療效。方法:1、培養(yǎng)和傳代大鼠BMSCs,使用倒置顯微鏡進行形態(tài)學觀察,用流式細胞術檢測細胞表面標志性抗原CD44、CD45和CD90。構建及鑒定Bcl-2基因慢表達載體,轉染BMSCs,以獲得Bcl-2過表達的BMSCs,使用RT-PCR和westernblot技術檢測Bcl-2的表達量,使用MTT檢測細胞的增值效率。2、健康雄性8周齡SD大鼠20只,隨機分為4組,每組5只大鼠,采用分點注射的方法,在大鼠脊髓損傷建模手術... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數】：49 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

左圖為光學倒置顯微鏡（×100）下觀察；右圖為熒光倒置顯微鏡（×100）下觀察

1 BMSCs 細胞鑒定第三代細胞培養(yǎng)第十二天時，用倒置顯微胞體向胞核收縮，細胞呈雙極或多極狀，胞細長且相互連接交叉，為典型的神經元細胞記物結果顯示： CD44 和 CD90 表達陽性，陽陰性，陽性率為 0.9%，結果如圖 2 所示。圖 1 左圖為光學倒置顯微鏡（×100）下觀察；右

RT-PCR檢測Bcl-2的表達

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]經Bcl-2基因修飾的骨髓間充質干細胞移植對缺血性心功能不全兔心功能及血管新生的影響[D]. 高青.河北醫(yī)科大學 2015
[2]hBDNF基因修飾骨髓間充質干細胞移植對大鼠脊髓損傷后神經細胞凋亡的影響[D]. 劉凱.福建醫(yī)科大學 2012



本文編號：3607477