目的:探究miR-134在骨肉瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用及其相關(guān)作用機制,并為未來骨肉瘤臨床治療中新的治療機制和作用靶點提供理論依據(jù),為治療骨肉瘤提供新思路。方法:（1）qRT-PCR檢測人骨肉瘤細胞系Saos-2、MG-63及人軟骨細胞系CHON-001中miR-134和MMP1及MMP3的表達情況,并比較其差異。免疫組織化學染色法檢測人骨肉瘤樣本及正常骨組織中MMP1和MMP3的表達差異情況。（2）利用慢病毒轉(zhuǎn)染人骨肉瘤Saos-2細胞,qRT-PCR驗證其轉(zhuǎn)染效率,使其miR-134過表達,以轉(zhuǎn)染miR-134-Control慢病毒的細胞作為對照組,通過細胞劃痕實驗檢測miR-134對骨肉瘤細胞遷移能力的影響。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Saos-2細胞使其miR-134過表達,并通過Transwell實驗檢測miR-134對骨肉瘤細胞侵襲能力的影響。（3）利用慢病毒轉(zhuǎn)染使其穩(wěn)定高表達miR-134的骨肉瘤細胞系Saos-2,構(gòu)建人骨肉瘤裸鼠移植移植瘤模型,檢測miR-134在體內(nèi)對骨肉瘤生長的影響;肺組織HE染色觀察其對裸鼠體內(nèi)骨肉瘤肺轉(zhuǎn)移的影響,同時利用qRT-PCR、免疫組化、ELISA及Weste... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

AmiR-134在各細胞系中的表達；BMMP1和MMP3在各細胞系中的表達

圖 2-2 MMP1 和 MMP3 在人骨肉瘤組織中呈高表達3 討論先前的研究表明 miR-134 的過表達與骨肉瘤的病理進程有著密切的聯(lián)系[29]，同時，基質(zhì)金屬蛋白酶在體內(nèi)的表達也通過多種方式參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展。本研究發(fā)現(xiàn)在骨肉瘤細胞及組織中，miR-134 與 MMP1 和 MMP3 的表達呈負相關(guān)，這與之前的研究即過表達 miR-134 可通過抑制 MMP7 及 MMP9 從而降低非小細胞肺癌腫瘤細胞的遷移和侵襲能力結(jié)論 致[34]。4 結(jié)論本研究中發(fā)現(xiàn) miR-134 與 MMP1 和 MMP3 的表達呈負相關(guān)，提示 miR-134 的異常低

圖 2-1 A 慢病毒轉(zhuǎn)染后熒光表達效率；B 慢病毒轉(zhuǎn)染后 miR-134 表達情況2.2 過表達 miR-134 抑制 Saos-2 細胞的遷移能力細胞劃痕實驗結(jié)果顯示，miR-134 組細胞在 12h、24h 的遷移率均明顯低于 Contro組細胞。見圖 2-2，（**p＜0.001）。圖 2-2 劃痕實驗 12h 和 24h 細胞遷移情況及遷移率的比較2.3 過表達 miR-134 抑制 Saos-2 細胞的侵襲能力


本文編號：3600890