第一部分 丙泊酚對小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響及其機(jī)制研究目的觀察丙泊酚對小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響及其機(jī)制。方法將小膠質(zhì)細(xì)胞BV-2分為7組,分別是空白對照組、丙泊酚組、LPS組、LPS復(fù)合丙泊酚組、IL-4組、IL-4復(fù)合丙泊酚組,溶劑DMSO對照組�？瞻讓φ战M的細(xì)胞加入沒有血清的DMEM/F12培養(yǎng)液;丙泊酚組細(xì)胞加入丙泊酚30μM;LPS組細(xì)胞加入LPS1μg/ml;LPS復(fù)合丙泊酚組細(xì)胞加入LPS 1μg/ml預(yù)處理1小時,然后加入丙泊酚30μM干預(yù)24h;IL-4組加入20ng/mLIL-4;IL-4復(fù)合丙泊酚組加入20ng/mLIL-4預(yù)處理1小時,然后加入丙泊酚30μM干預(yù)24h;溶劑DMSO對照組加入溶劑0.1%的DMSO。進(jìn)行形態(tài)學(xué)的觀察以及酶聯(lián)免疫吸附法測定細(xì)胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10、Arg-1水平確定小膠質(zhì)細(xì)胞M1、M2活化模型的建立；同時采用MTT比色實驗法測定丙泊酚干預(yù)后的活化小膠質(zhì)細(xì)胞活性,探討丙泊酚對小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響；并觀察丙泊酚對靜息小膠質(zhì)細(xì)胞以及活化小膠質(zhì)細(xì)胞M1、M2釋放炎癥因子的影響;此外采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)測... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖－１小膠質(zhì)細(xì)胞激活后釋放大量炎癥因子對神經(jīng)系統(tǒng)的影響??促炎癥因子釋放，造成神經(jīng)損傷?抑炎癥因子釋放

制星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌炎癥因子。因此，我們推測丙泊酚也有可能是通過下調(diào)??ＴＬＲ４－Ｐ３８ＭＡＰＫ信號通路抑制ＭＧ細(xì)胞過度活化，從而達(dá)到保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的作用（見??圖４）。??為此，本課題以ＴＬＲ４－Ｐ３８ＭＡＰＫ信號通路為切入點，采用ＭＧ細(xì)胞株ＢＶ－２細(xì)??胞，觀察丙泊釀對活化ＭＧ細(xì)胞的Ｍｌ和Ｍ２模型表達(dá)炎癥因子的影響。從細(xì)胞、分??子水平，觀察丙泊酚調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞活化過程，并驗證丙泊酚通過ＴＬＲ４－Ｐ３８ＭＡＰＫ??信號通路調(diào)控ＭＧ的炎癥反應(yīng)，從信號通路的角度闡明丙泊酚對ＰＯＣＤ影響的具體??機(jī)制。同時從臨床水平，與七氟烷麻醉比較，觀察丙泊釀對老年胸腰椎手術(shù)患者術(shù)后??認(rèn)知功能的影響，進(jìn)一步為臨床防治ＰＯＣＤ提供新的思路和依據(jù)。??３??

孕〗褐氏赴?罨?褪鹺筧現(xiàn)?δ艿撓跋旒盎?蒲袑]??放，發(fā)現(xiàn)ＬＰＳ組小膠質(zhì)細(xì)胞上清液中ＩＬ－ｌｐ、ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ水平均明顯高于對照組和??溶劑對照組（尸＜０．００１），空白對照組和溶劑對照組未見明顯差異（戶＞０．０５）（見圖２Ａ，??Ｂ，?Ｃ）〇??Ａ，?＊＊＊?Ｂ?林＊??ｒ?＿?ｔ：?＿??ｉｉ〇〇－?｜鐵｜?ｉ?３００＇??＾?５０－?＝ｉ２Ｑ〇?—？?？｜?—－??Ｊｇ?■?■?１００ｉＢ?■?Ｍ??／?＞?／??本＊氺??Ｃ?６０Ｏ－｜??ｆ?闕??！?４〇〇－?ｍｓｍ??！?＿??９?？＞＆：？？??｜?２〇〇－，職ｙ，?：：：：：：：＊：：：：：??ＪＲ?■?Ｂ??／?，／??圖２：空白對照組和ＬＰＳ組、ＤＭＳＯ溶劑對照組的上清液ＩＬ－ｌｐ、ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ含量??比較結(jié)果。＊＊＊Ｐ＜?０．００１?ｖｓ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，??１．４．２．２?ＩＬ－４促進(jìn)ＭＧ細(xì)胞釋放炎癥因子ＩＬ－４、ＩＬ－１０、Ａｒｇ－１??為了驗證ＩＬ－４能刺激ＭＧ細(xì)胞活化，我們通過ＥＬＩＳＡ檢測上清液炎癥因子的釋??放，發(fā)現(xiàn)ＩＬ－４組小膠質(zhì)細(xì)胞上清液中ＩＬ－４、ＩＬ－１０、Ａｒｇ－１水平均髙于對照組和溶劑??對照組（Ｐ０．００１）

【參考文獻(xiàn)】：
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