發(fā)布時(shí)間：2022-01-04 17:11

　　炎癥反應(yīng)在創(chuàng)傷性顱腦損傷（traumatic brain injury,TBI）后的繼發(fā)性損傷起著很重要的作用,其中小膠質(zhì)細(xì)胞的活化是腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的主要標(biāo)志。亞低溫治療可以在TBI的急性期起到一定的腦保護(hù)作用,然而其療效尚不夠肯定。由于參與TBI后小膠質(zhì)細(xì)胞激活的機(jī)制極為復(fù)雜,亞低溫腦保護(hù)的確切機(jī)制還有待闡明。我們的前期研究已經(jīng)證實(shí),TBI可誘導(dǎo)神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的自噬和凋亡。本研究評(píng)估了中重度TBI和亞低溫對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響,并研究了小膠質(zhì)細(xì)胞自噬/凋亡負(fù)性調(diào)節(jié)和toll樣受體4（tolllike receptor 4,TLR4）通路在其中可能發(fā)揮的作用。本研究使用清潔級(jí)SD大鼠,由液壓沖擊損傷裝置（fluid percussion injury,FPI）誘導(dǎo)中重度TBI模型,并通過(guò)全身麻醉下在冰浴降溫4小時(shí)來(lái)實(shí)現(xiàn)亞低溫。TBI后24小時(shí)處死所有大鼠,檢測(cè)損傷區(qū)大腦皮層及同側(cè)海馬的小膠質(zhì)細(xì)胞自噬/凋亡以及TLR4通路的相關(guān)指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示在TBI后亞低溫治療可以減少活化的小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量,抑制細(xì)胞自噬并促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞凋亡,這可能是通過(guò)自噬和細(xì)胞凋亡之間的負(fù)性調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)的。TL... 

【文章來(lái)源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬HE染色Figure1-1HEstainingoftheinjuredcortexandipsilateralhippocampus.在TBI后24小時(shí)，SNG，SHG，TNG和THG大鼠的損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬的HE染色（放大倍數(shù)，×100）

上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文11圖1-2損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬Iba-1陽(yáng)性細(xì)胞免疫熒光分析Figure1-2ImmunofluorescenceanalysisofIba-1-positivecellsintheinjuredcortexandipsilateralhippocampus（a）損傷區(qū)皮質(zhì)Iba-1陽(yáng)性細(xì)胞（白色箭頭）激光共聚焦照片。（放大倍數(shù)，×630）（b）同側(cè)海馬Iba-1陽(yáng)性細(xì)胞（白色箭頭）激光共聚焦照片。（放大倍數(shù)，×630）（c）損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬中Iba-1陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量統(tǒng)計(jì)。條形圖中的數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。****P<0.001。隨機(jī)選擇至少10個(gè)視野（放大倍數(shù)，×630）計(jì)數(shù)本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)染色和高分辨率激光共聚焦顯微鏡觀察，通過(guò)統(tǒng)計(jì)不同組中，10個(gè)隨機(jī)高倍鏡視野下cleavedcaspase3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的差異，評(píng)估TBI后24h大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的神經(jīng)細(xì)胞總體凋亡程度的變化。在TBI后的24h，TNG組中大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的cleavedcaspase3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，較SNG組中的相應(yīng)腦區(qū)顯著增加，表明大鼠腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞的總體凋亡水平顯著上升（TNG組：損傷區(qū)皮質(zhì)：23.2±2.39,P<0.001；同側(cè)海馬：23.1±2.47,P<0.001）。而在亞低溫治療后，THG組中大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的cleavedcaspase3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，較TNG組中的相應(yīng)腦區(qū)顯著降低，表明大鼠腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞的總體凋亡程度受到亞低溫治療的抑制（THG：損傷區(qū)

上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文12皮質(zhì)：13.3±1.49,P<0.001；同側(cè)海馬：11.70±1.57,P<0.001）。SNG組和SHG組中的相關(guān)指標(biāo)未見(jiàn)顯著差異。（圖1-3）圖1-3損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬cleavedcaspase3陽(yáng)性細(xì)胞免疫熒光分析Figure1-3Immunofluorescenceanalysisofcleavedcaspase3positivecellsintheinjuredcortexandipsilateralhippocampus（a）損傷區(qū)皮質(zhì)cleavedcaspase3陽(yáng)性細(xì)胞（白色箭頭）激光共聚焦照片。（放大倍數(shù)，×630）（b）同側(cè)海馬cleavedcaspase3陽(yáng)性細(xì)胞（白色箭頭）激光共聚焦照片。（放大倍數(shù)，×630）（c）損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬中cleavedcaspase3陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量統(tǒng)計(jì)。條形圖中的數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。****P<0.001。隨機(jī)選擇至少10個(gè)視野（放大倍數(shù)，×630）計(jì)數(shù)1.3.3TBI后小膠質(zhì)細(xì)胞自噬水平顯著上升，而亞低溫治療可以減弱這一效應(yīng)本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)染色和高分辨率激光共聚焦顯微鏡觀察，通過(guò)統(tǒng)計(jì)不同組中，10個(gè)隨機(jī)高倍鏡視野下Iba-1/LC3和Iba-1/Beclin-1雙陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的差異，評(píng)估TBI后24h大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的小膠質(zhì)細(xì)胞自噬水

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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