目的研究不同濃度右美托咪定對(duì)糖氧剝奪/再灌注（OGD/R）誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。方法應(yīng)用全反式維甲酸（ATRA）和十四烷酰佛波醇乙酯酸（TPA）序貫誘導(dǎo)人源性神經(jīng)母細(xì)胞瘤（SH-SY5Y）分化為神經(jīng)細(xì)胞,均分為六組。選擇OGD12h/R12h構(gòu)建OGD/R模型。D0、D1、D2、D3、D4、D5組在OGD開始即刻分別加入右美托咪定0、0.1、1、10、100、1 000μmol/L。于再灌注12h后,采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,流式細(xì)胞凋亡法檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平,以觀察不同濃度右美托咪定對(duì)OGD/R誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。隨后選擇保護(hù)效果確切組,應(yīng)用Westernblot法檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmic reticulum,ER）應(yīng)激特異性蛋白-中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF）含量以及促凋亡蛋白Caspase-3活性和CHOP含量。結(jié)果與D0組比較,D1、D2組細(xì)胞存活率和細(xì)胞凋亡率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;D4、D5組細(xì)胞存活率明顯下降,細(xì)胞凋亡率明顯升高（P<... 

【文章來(lái)源】：臨床麻醉學(xué)雜志. 2017,33(08)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

ａＰ＜０．０１圖１Ｄ０組與Ｄ３組神經(jīng)細(xì)胞ＭＡＮＦ、ｃａｓｐａｓｅ－３與ＣＨＯＰ表達(dá)水平的比較注：與Ｄ０組

蕊J‘砂n3組

ＭＡＮＦ及促凋亡蛋白的關(guān)系。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法檢測(cè)顯示：與Ｄ０組比較，右美托咪定１０μＭ明顯上調(diào)了ＭＡＮＦ的表達(dá)（Ｐ＜０．０１），并抑制了促凋亡蛋白ｃａｓｐａｓｅ－３和ＣＨＯＰ的表達(dá)（Ｐ＜０．０１）（圖１）。注：與Ｄ０組比較，ａＰ＜０．０１圖１Ｄ０組與Ｄ３組神經(jīng)細(xì)胞ＭＡＮＦ、ｃａｓｐａｓｅ－３與ＣＨＯＰ表達(dá)水平的比較Ｄ３組細(xì)胞存活率明顯高于，細(xì)胞凋亡率明顯低于Ｄ０組（Ｐ＜０．０１），Ｄ４、Ｄ５組細(xì)胞存活率明顯低于，細(xì)胞凋亡率明顯高于Ｄ０組（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）（表１，圖２）。表１六組ＯＧＤ／Ｒ后神經(jīng)細(xì)胞的存活率和凋亡率的比較（％）組別存活率凋亡率Ｄ０組５２．１５±０．９６４８．５５±１．５９Ｄ１組５１．７２±１．９６４８．３４±１．１８Ｄ２組５１．９７±０．３９５２．２１±０．９４Ｄ３組６４．７８±２．７６ａ３１．０９±０．８３ａＤ４組４５．６９±２．３０ｂ６１．２８±１．３１ａＤ５組１９．９３±４．２２ａ９６．８７±１．３８ａ注：與Ｄ０組比較，ａＰ＜０．０１，ｂＰ＜０．０５討論近些年來(lái)關(guān)于右美托咪定的神經(jīng)保護(hù)作用報(bào)道很多［８］，但具體的細(xì)胞水平的作用機(jī)制仍不明確。本研究根據(jù)以往的研究方法［６，９］，通過(guò)ＡＴＲＡ與ＴＰＡ序貫成功誘導(dǎo)ＳＨ－ＳＹ５Ｙ分化為成熟神經(jīng)元細(xì)胞表型，繼而以細(xì)胞實(shí)驗(yàn)先期剝奪糖氧，后期再灌圖２ＯＧＤ／Ｒ后流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果注復(fù)氧的ＯＧＤ／Ｒ模型模擬臨床缺血－再灌

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)糖氧剝奪/再灌注誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J]. 孫瑞,劉珺,沈玉君,沙曼琪,徐勝春,沈玉先.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2015(06)
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本文編號(hào)：3511967