國產多孔鉭對體外誘導SD大鼠骨髓間充質干細胞成軟骨分化的影響
發(fā)布時間:2021-10-24 14:48
目的 研究TGF-β1和IGF-1對國產多孔鉭復合SD大鼠BMSCs向軟骨細胞誘導,觀察多孔鉭-BMSCs復合物細胞分泌功能及對軟骨相關因子COL-II、AGG和COL-X表達影響,從而探討國產多孔鉭復合BMSCs后對軟骨損傷修復的影響,以期為臨床軟骨修復提供理論與實驗依據(jù)。方法 1肉眼及掃描電鏡觀察國產多孔鉭支架材料的形態(tài)特征。2 SD大鼠BMSCs的獲取、培養(yǎng)、純化。3 BMSCs鑒定:取第3代BMSCs,進行成骨細胞、成軟骨細胞、成脂細胞誘導14天,分別行茜素紅、Alcian blue、油紅O染色。4國產多孔鉭與第3代BMSCs共培養(yǎng),CCK-8測定BMSCs不同時間點細胞的增殖。5第3代BMSCs與多孔鉭共培養(yǎng),成軟骨誘導SEM和TEM觀察細胞生長情況。6實驗分組:TGF-β1+BMSCs組(A組)、TGF-β1+BMSCs+多孔鉭組(B組)、TGF-β1+IGF-1+BMSCs組(C組)、TGF-β1+IGF-1+BMSCs+多孔鉭組(D組)。7各組成軟骨誘導7、14、21天行ELISA檢測國產多孔鉭支架復合BMSCs后細胞分泌COL-II、AGG、COL-X功能的影響。8各...
【文章來源】:華北理工大學河北省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
國產多孔鉭支架的形態(tài)結構
未貼壁的紅細胞、BMSCs 和造血干細胞被去除,貼壁的細胞散在分布,呈紡錘形、三角形和不規(guī)則形(圖2B),死細胞較多。4~6d 貼壁細胞增加,形成大小不等的細胞集落,集落間相互連接、融合,大部分細胞伸出偽足,呈多角形,死細胞較前減少(圖 2C)。7~9d細胞生長旺盛,細胞呈漩渦狀密集生長,排列有一定方向性(圖 2D,圖 2E),第10d 鋪滿瓶底 80~90%(圖 2F)。A B CFDE
A:第 1d;B:第 3d;C:第 5d;D:第 7d;E:第 9d;F:第 10d圖 2 倒置相差顯微鏡觀察原代 BMSCs(×100)Fig.2 Primary BMSCS was observed by inverted phase contrast microscope (×100)1.2.3 SD 大鼠 BMSCs 傳代培養(yǎng)傳代后的 BMSCs 生長迅速,3~5d 即可傳代一次。傳代后細胞均勻分布,大1h 后開始貼壁,呈長梭形,成纖維細胞樣,體積較原代大,漩渦狀密集生長,見少量死細胞(圖 3)。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]體外誘導骨髓間充質干細胞定向分化為軟骨細胞:轉化生長因子β1、胰島素樣生長因子1的協(xié)同刺激作用[J]. 譚榮邦,陳宏明,羅世官,李日著,曾德創(chuàng). 中國組織工程研究. 2018(17)
[2]生物力學信號誘導骨髓間充質干細胞分化的現(xiàn)狀[J]. 孫凌璐,蘇雪蓮,何曉蘭,包廣潔,康宏. 口腔醫(yī)學研究. 2018(01)
[3]TGF-β1誘導馬鹿茸MSCs軟骨分化及c-myc基因的表達[J]. 韓春梅,王姍姍,高慶華,鄭永富,馬夢婷,張勤. 生物技術通報. 2016(03)
[4]多孔鉭顆粒在下頜骨缺損修復中的作用[J]. 鐘建鑫,節(jié)云峰,羅金英,張倩,朱璨,汪昆,王曉亮,周繼祥. 第三軍醫(yī)大學學報. 2015(12)
[5]堿性成纖維細胞生長因子對國產多孔鉭-軟骨細胞復合物軟骨細胞表型維持及去分化的影響[J]. 張輝,王茜,趙陽,甘洪全,王輝,畢成,李琪佳,王志強. 第二軍醫(yī)大學學報. 2015(03)
[6]Bone tissue engineering via nanostructured calcium phosphate biomaterials and stem cells[J]. Ping Wang,Liang Zhao,Jason Liu,Michael D Weir,Xuedong Zhou,Hockin H K Xu. Bone Research. 2014(03)
[7]骨髓間充質干細胞體外誘導成軟骨細胞的動態(tài)觀察[J]. 馮均偉,王躍,呂波,郝鵬,唐六一,朱建新,朱宗東,譚波. 中國組織工程研究. 2013(36)
[8]骨髓基質干細胞軟骨分化的實驗研究[J]. 劉俊賓,朱懷仕. 中醫(yī)正骨. 2008(07)
本文編號:3455470
【文章來源】:華北理工大學河北省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
國產多孔鉭支架的形態(tài)結構
未貼壁的紅細胞、BMSCs 和造血干細胞被去除,貼壁的細胞散在分布,呈紡錘形、三角形和不規(guī)則形(圖2B),死細胞較多。4~6d 貼壁細胞增加,形成大小不等的細胞集落,集落間相互連接、融合,大部分細胞伸出偽足,呈多角形,死細胞較前減少(圖 2C)。7~9d細胞生長旺盛,細胞呈漩渦狀密集生長,排列有一定方向性(圖 2D,圖 2E),第10d 鋪滿瓶底 80~90%(圖 2F)。A B CFDE
A:第 1d;B:第 3d;C:第 5d;D:第 7d;E:第 9d;F:第 10d圖 2 倒置相差顯微鏡觀察原代 BMSCs(×100)Fig.2 Primary BMSCS was observed by inverted phase contrast microscope (×100)1.2.3 SD 大鼠 BMSCs 傳代培養(yǎng)傳代后的 BMSCs 生長迅速,3~5d 即可傳代一次。傳代后細胞均勻分布,大1h 后開始貼壁,呈長梭形,成纖維細胞樣,體積較原代大,漩渦狀密集生長,見少量死細胞(圖 3)。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]體外誘導骨髓間充質干細胞定向分化為軟骨細胞:轉化生長因子β1、胰島素樣生長因子1的協(xié)同刺激作用[J]. 譚榮邦,陳宏明,羅世官,李日著,曾德創(chuàng). 中國組織工程研究. 2018(17)
[2]生物力學信號誘導骨髓間充質干細胞分化的現(xiàn)狀[J]. 孫凌璐,蘇雪蓮,何曉蘭,包廣潔,康宏. 口腔醫(yī)學研究. 2018(01)
[3]TGF-β1誘導馬鹿茸MSCs軟骨分化及c-myc基因的表達[J]. 韓春梅,王姍姍,高慶華,鄭永富,馬夢婷,張勤. 生物技術通報. 2016(03)
[4]多孔鉭顆粒在下頜骨缺損修復中的作用[J]. 鐘建鑫,節(jié)云峰,羅金英,張倩,朱璨,汪昆,王曉亮,周繼祥. 第三軍醫(yī)大學學報. 2015(12)
[5]堿性成纖維細胞生長因子對國產多孔鉭-軟骨細胞復合物軟骨細胞表型維持及去分化的影響[J]. 張輝,王茜,趙陽,甘洪全,王輝,畢成,李琪佳,王志強. 第二軍醫(yī)大學學報. 2015(03)
[6]Bone tissue engineering via nanostructured calcium phosphate biomaterials and stem cells[J]. Ping Wang,Liang Zhao,Jason Liu,Michael D Weir,Xuedong Zhou,Hockin H K Xu. Bone Research. 2014(03)
[7]骨髓間充質干細胞體外誘導成軟骨細胞的動態(tài)觀察[J]. 馮均偉,王躍,呂波,郝鵬,唐六一,朱建新,朱宗東,譚波. 中國組織工程研究. 2013(36)
[8]骨髓基質干細胞軟骨分化的實驗研究[J]. 劉俊賓,朱懷仕. 中醫(yī)正骨. 2008(07)
本文編號:3455470
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