目的 研究TGF-β1和IGF-1對(duì)國(guó)產(chǎn)多孔鉭復(fù)合SD大鼠BMSCs向軟骨細(xì)胞誘導(dǎo),觀察多孔鉭-BMSCs復(fù)合物細(xì)胞分泌功能及對(duì)軟骨相關(guān)因子COL-II、AGG和COL-X表達(dá)影響,從而探討國(guó)產(chǎn)多孔鉭復(fù)合BMSCs后對(duì)軟骨損傷修復(fù)的影響,以期為臨床軟骨修復(fù)提供理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法 1肉眼及掃描電鏡觀察國(guó)產(chǎn)多孔鉭支架材料的形態(tài)特征。2 SD大鼠BMSCs的獲取、培養(yǎng)、純化。3 BMSCs鑒定:取第3代BMSCs,進(jìn)行成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、成脂細(xì)胞誘導(dǎo)14天,分別行茜素紅、Alcian blue、油紅O染色。4國(guó)產(chǎn)多孔鉭與第3代BMSCs共培養(yǎng),CCK-8測(cè)定BMSCs不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞的增殖。5第3代BMSCs與多孔鉭共培養(yǎng),成軟骨誘導(dǎo)SEM和TEM觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。6實(shí)驗(yàn)分組:TGF-β1+BMSCs組（A組）、TGF-β1+BMSCs+多孔鉭組（B組）、TGF-β1+IGF-1+BMSCs組（C組）、TGF-β1+IGF-1+BMSCs+多孔鉭組（D組）。7各組成軟骨誘導(dǎo)7、14、21天行ELISA檢測(cè)國(guó)產(chǎn)多孔鉭支架復(fù)合BMSCs后細(xì)胞分泌COL-II、AGG、COL-X功能的影響。8各... 

【文章來(lái)源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

國(guó)產(chǎn)多孔鉭支架的形態(tài)結(jié)構(gòu)

未貼壁的紅細(xì)胞、BMSCs 和造血干細(xì)胞被去除，貼壁的細(xì)胞散在分布，呈紡錘形、三角形和不規(guī)則形（圖2B），死細(xì)胞較多。4~6d 貼壁細(xì)胞增加，形成大小不等的細(xì)胞集落，集落間相互連接、融合，大部分細(xì)胞伸出偽足，呈多角形，死細(xì)胞較前減少（圖 2C）。7~9d細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛，細(xì)胞呈漩渦狀密集生長(zhǎng)，排列有一定方向性（圖 2D，圖 2E），第10d 鋪滿瓶底 80~90%（圖 2F）。A B CFDE

A：第 1d；B：第 3d；C：第 5d；D：第 7d；E：第 9d；F：第 10d圖 2 倒置相差顯微鏡觀察原代 BMSCs（×100）Fig.2 Primary BMSCS was observed by inverted phase contrast microscope (×100)1.2.3 SD 大鼠 BMSCs 傳代培養(yǎng)傳代后的 BMSCs 生長(zhǎng)迅速，3~5d 即可傳代一次。傳代后細(xì)胞均勻分布，大1h 后開(kāi)始貼壁，呈長(zhǎng)梭形，成纖維細(xì)胞樣，體積較原代大，漩渦狀密集生長(zhǎng)，見(jiàn)少量死細(xì)胞（圖 3）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為軟骨細(xì)胞:轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1、胰島素樣生長(zhǎng)因子1的協(xié)同刺激作用[J]. 譚榮邦,陳宏明,羅世官,李日著,曾德創(chuàng).  中國(guó)組織工程研究. 2018(17)
[2]生物力學(xué)信號(hào)誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化的現(xiàn)狀[J]. 孫凌璐,蘇雪蓮,何曉蘭,包廣潔,康宏.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2018(01)
[3]TGF-β1誘導(dǎo)馬鹿茸MSCs軟骨分化及c-myc基因的表達(dá)[J]. 韓春梅,王姍姍,高慶華,鄭永富,馬夢(mèng)婷,張勤.  生物技術(shù)通報(bào). 2016(03)
[4]多孔鉭顆粒在下頜骨缺損修復(fù)中的作用[J]. 鐘建鑫,節(jié)云峰,羅金英,張倩,朱璨,汪昆,王曉亮,周繼祥.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(12)
[5]堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)國(guó)產(chǎn)多孔鉭-軟骨細(xì)胞復(fù)合物軟骨細(xì)胞表型維持及去分化的影響[J]. 張輝,王茜,趙陽(yáng),甘洪全,王輝,畢成,李琪佳,王志強(qiáng).  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(03)
[6]Bone tissue engineering via nanostructured calcium phosphate biomaterials and stem cells[J]. Ping Wang,Liang Zhao,Jason Liu,Michael D Weir,Xuedong Zhou,Hockin H K Xu.  Bone Research. 2014(03)
[7]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)成軟骨細(xì)胞的動(dòng)態(tài)觀察[J]. 馮均偉,王躍,呂波,郝鵬,唐六一,朱建新,朱宗東,譚波.  中國(guó)組織工程研究. 2013(36)
[8]骨髓基質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 劉俊賓,朱懷仕.  中醫(yī)正骨. 2008(07)



本文編號(hào)：3455470