發(fā)布時間：2021-10-11 10:49

　　目的:通過構建成人心肌缺氧/復氧損傷模型,探討瑞芬太尼后處理對成人心肌缺氧/復氧損傷的保護效應,進一步觀察三種阿片受體（μ、δ、κ）在此效應中的作用,以及此效應是否通過細胞外調節(jié)蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2）信號通路轉導,調控水通道蛋白-4（aquaporin-4,AQP-4）表達,減輕心肌水腫程度而實現。方法:通過剪取完整成人右心耳肌小梁,建立心肌缺氧/復氧損傷模型,將66條肌小梁隨機分為11組,正常對照組（C組）:肌小梁以復氧液灌注210 min,未行缺氧/復氧;缺氧/復氧組（HR組）:肌小梁缺氧90 min/復氧120 min;10^-11、10^-10或10^-99 M瑞芬太尼后處理組（LRP、MRP或HRP組）:肌小梁缺氧90 min/復氧120 min,在缺氧結束前10 min開始分別灌注10^-11、10^-10或10^-99 M瑞芬太尼至復氧開始后10 min停止;μ、δ或κ受體拮抗... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數】：57 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

右心耳肌小梁結構網

10材料與方法1材料1.1實驗標本經福建醫(yī)科大學附屬協和醫(yī)院臨床研究倫理審查委員會審批及患者知情同意，取成年心臟瓣膜置換患者的右心耳組織（約10×6mm），置于含預冷氧合改良臺式液的密閉瓶中，10分鐘內轉運至實驗室。在顯微外科顯微鏡下，將整塊右心耳組織解剖出合適獨立的肌小梁(長度≥3mm,直徑≤1mm)用于實驗，每個右心耳組織可取2~3條符合要求的肌小梁。解剖操作時間控制在10分鐘內。組織入選標準：成人患者體外循環(huán)下瓣膜置換手術的右心耳標本。組織排除標準：患者出現病理生理改變包括房性心律失常和（或）服用抗心律失常藥物、右心室心力衰竭、糖尿病和（或）服用降血糖藥物。圖1右心耳肌小梁結構網圖2心臟手術中剪取的右心耳組織1.2主要試劑試劑廠家品牌

162方法2.1建立心肌缺氧/復氧損傷模型依據Walker等[17]人的操作技術方法,將符合實驗要求的肌小梁兩端心房壁楔形區(qū)域均用7/0縫合絲線結扎，其中一端接張力換能器，另一端接水浴槽底部固定桿，連接好的肌小梁垂直懸吊在37℃恒溫水浴槽中，調零后，無牽拉置放30min。肌小梁一旦懸掛，通過二塊鉑電極板，給予肌條連續(xù)方波電刺激(刺激頻率1Hz,刺激持續(xù)時間5ms,刺激強度為120%閾刺激)。穩(wěn)定期：隨后施加張力前負荷，從0g負荷開始，每5min增加0.05g的前負荷，肌條也隨之被拉長至一定距離，至獲得最大發(fā)展張力時停止牽拉，穩(wěn)定30~60min,此時為穩(wěn)定的最適前負荷。然后開始缺氧/復氧處理。缺氧期：處理時間90min,缺氧灌注液持續(xù)孵育肌小梁，以缺氧氣體（95%N2+5%CO2）持續(xù)飽和，電刺激頻率改為4Hz,其他參數不變。復氧期：處理時間120min,復氧灌注液持續(xù)孵育肌小梁，以復氧氣體（95%O2+5%CO2）持續(xù)飽和，電刺激參數與穩(wěn)定期相同。實驗結束后，測量肌小梁的長度（Length）及重量(Mass)，并計算肌小梁的橫截面積（cross-sectionalarea,CSA），如CSA＞1mm2則排除研究。CSA計算公式：其中Mass、Length分別為肌小梁質量、長度；ρ為肌小梁密度，評估為1mg/mm3。圖3肌小梁缺氧/復氧損傷模型簡圖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Post-conditioning with gradually increased reperfusion provides better cardioprotection in rats[J]. Guo-ming Zhang,Yu Wang,Tian-de Li,Xiao-yan Li,Shao-ping Su,Yuan-yuan Sun,Xiu-hua Liu.  World Journal of Emergency Medicine. 2014(02)
[2]脊髓內MAPK-ERK通路在心肌缺血再灌注損傷中的作用[J]. 蔣萌,王霖,蔣海河.  中國當代兒科雜志. 2013(05)



本文編號：3430359