腦源性微粒的提
發(fā)布時(shí)間：2021-10-11 14:10
目的:微粒（microparticle）是一種細(xì)胞激活或凋亡時(shí)所分泌的直徑在0.1-1um之間的細(xì)胞囊泡。近年來(lái),研究發(fā)現(xiàn)微�？梢越閷�(dǎo)某些疾病的發(fā)生,也可以作為感染、外傷的生物學(xué)標(biāo)記物,并且還具有潛在的治療價(jià)值,更為有意義的是,已有報(bào)道證實(shí)微粒作為物質(zhì)運(yùn)輸載體,發(fā)揮著細(xì)胞間m RNAs、micro RNAs、脂類與蛋白質(zhì)的傳遞作用。由此得到了基礎(chǔ)與臨床醫(yī)學(xué)研究越來(lái)越多的關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)BDMP的兩種提取方法進(jìn)行比較,探索流式細(xì)胞儀對(duì)微粒濃度的檢測(cè),并且探索凍存條件對(duì)BDMP的影響以及收集臨床TBI患者血漿標(biāo)本對(duì)其腦源性微粒（BDMP）含量進(jìn)行檢測(cè),試圖:（1）比較BDMP不同提取方法的特點(diǎn),為BDMP分離、純化工作奠定基礎(chǔ);（2）建立起一套關(guān)于微粒含量行之有效的檢測(cè)鑒定方法,為以后大規(guī)模開展BDMP的研究提供保障;（3）明確不同溫度環(huán)境下BDMP的變化規(guī)律,為BDMP的保存提供參考;（4）在目前已有研究證實(shí)鼠源性BDMP存在的基礎(chǔ)上,證實(shí)顱腦創(chuàng)傷（TBI）后患者血中也有BDMP的存在,為TBI后臨床患者凝血功能紊亂的發(fā)生機(jī)制提供新思路。方法:（1）通過應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)/RNA定量提取...
【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】：117 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
消化法與研磨法提取的BDMP的流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)結(jié)果A.消化法與研磨法提取的BDMP總數(shù)比較
圖 2 消化法與研磨法提取的 BDMP 內(nèi) RNA 含量檢測(cè)結(jié)果1.3 討論1.3.1 微粒的釋放微粒能夠從不同的體液中分離,包括胸腔積液[93],血漿[94, 95],房水[腹水[98, 99],羊水[100, 101],精液[102-104],唾液[95, 101]),鼻腔分泌物[105],腦脊液氣管肺泡灌洗液[107, 108],滑液[109, 110]),膽汁[111],尿液[112, 113]和痰[114]。微粒形成的不同環(huán)境對(duì)微粒的來(lái)源、結(jié)構(gòu)與功能都有影響。事微粒之間的差異很大,這導(dǎo)致了不同的研究背景下微粒的不同名稱[11通用術(shù)語(yǔ)經(jīng)常被用來(lái)描述細(xì)胞衍生的囊泡,包括“微�！�。然而,現(xiàn)在囊泡表示細(xì)胞分泌的各種囊泡的總稱，包括外泌體 exosomes[116]，微microvesicles[117],核外顆粒體（ectosomes）[118],膜顆粒 membrane par泌體樣囊泡（exosome-like vesicles）[120]和凋亡小體[121]apoptotic ves（microparticles）[122]。
式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè) BDMP 方法的設(shè)定。A.使用 Megamix 標(biāo)準(zhǔn)微粒確定 BDMP 的范圍。B. 為 BDMP 區(qū)域，圈選 P2 區(qū)域?yàn)闊晒鈽?biāo)準(zhǔn)品區(qū)域。C.圈選 P1 區(qū)域進(jìn)入，記錄 APC-AnnexinD. APC-AnnexinⅤ陰性對(duì)照。 方法的重現(xiàn)性分別取 3 份熒光標(biāo)準(zhǔn)品，用流式細(xì)胞儀檢測(cè) P2 區(qū)域顆粒的個(gè)數(shù)，連續(xù)計(jì)算 3 組數(shù)據(jù)的平均 RSD/%為 5.8%，結(jié)果見表 4。表 4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)熒光標(biāo)準(zhǔn)品（P2 區(qū)域顆粒個(gè)數(shù)）的日內(nèi)差樣本編號(hào)測(cè)定次數(shù)平均值 RSD/%1 2 3 4 51 200 198 232 230 235 219 8.42 159 182 171 182 167 172.2 5.43 260 236 242 248 242 245.6 3.7
本文編號(hào)：3430665
【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】：117 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
消化法與研磨法提取的BDMP的流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)結(jié)果A.消化法與研磨法提取的BDMP總數(shù)比較
圖 2 消化法與研磨法提取的 BDMP 內(nèi) RNA 含量檢測(cè)結(jié)果1.3 討論1.3.1 微粒的釋放微粒能夠從不同的體液中分離,包括胸腔積液[93],血漿[94, 95],房水[腹水[98, 99],羊水[100, 101],精液[102-104],唾液[95, 101]),鼻腔分泌物[105],腦脊液氣管肺泡灌洗液[107, 108],滑液[109, 110]),膽汁[111],尿液[112, 113]和痰[114]。微粒形成的不同環(huán)境對(duì)微粒的來(lái)源、結(jié)構(gòu)與功能都有影響。事微粒之間的差異很大,這導(dǎo)致了不同的研究背景下微粒的不同名稱[11通用術(shù)語(yǔ)經(jīng)常被用來(lái)描述細(xì)胞衍生的囊泡,包括“微�！�。然而,現(xiàn)在囊泡表示細(xì)胞分泌的各種囊泡的總稱，包括外泌體 exosomes[116]，微microvesicles[117],核外顆粒體（ectosomes）[118],膜顆粒 membrane par泌體樣囊泡（exosome-like vesicles）[120]和凋亡小體[121]apoptotic ves（microparticles）[122]。
式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè) BDMP 方法的設(shè)定。A.使用 Megamix 標(biāo)準(zhǔn)微粒確定 BDMP 的范圍。B. 為 BDMP 區(qū)域，圈選 P2 區(qū)域?yàn)闊晒鈽?biāo)準(zhǔn)品區(qū)域。C.圈選 P1 區(qū)域進(jìn)入，記錄 APC-AnnexinD. APC-AnnexinⅤ陰性對(duì)照。 方法的重現(xiàn)性分別取 3 份熒光標(biāo)準(zhǔn)品，用流式細(xì)胞儀檢測(cè) P2 區(qū)域顆粒的個(gè)數(shù)，連續(xù)計(jì)算 3 組數(shù)據(jù)的平均 RSD/%為 5.8%，結(jié)果見表 4。表 4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)熒光標(biāo)準(zhǔn)品（P2 區(qū)域顆粒個(gè)數(shù)）的日內(nèi)差樣本編號(hào)測(cè)定次數(shù)平均值 RSD/%1 2 3 4 51 200 198 232 230 235 219 8.42 159 182 171 182 167 172.2 5.43 260 236 242 248 242 245.6 3.7
本文編號(hào)：3430665
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