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振蕩電場通過調(diào)節(jié)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的遷移和分化促進(jìn)大鼠脊髓損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)

發(fā)布時間:2021-09-18 10:36
  目的:脊髓損傷(Spinal cord injury,SCI)是導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙的最常見原因之一,每年影響著全球數(shù)百萬人,受影響的個人、家庭和社會的財(cái)政成本是巨大的。SCI是一種預(yù)后不良的疾病,在目前的治療方法下,患者存在嚴(yán)重的自主感覺和運(yùn)動功能障礙,因此迫切需要新的有效的治療策略。振蕩電場刺激(Oscillating field stimulation,OFS)是一種新興的脊髓損傷治療技術(shù),具有良好的治療效果,在受傷的脊髓上施加電流可以促進(jìn)愈合和組織再生。然而,OFS導(dǎo)致脊髓損傷恢復(fù)的機(jī)制尚不完全清楚。OFS已被證實(shí)能調(diào)節(jié)Wnt信號通路,該通路與神經(jīng)干細(xì)胞(Neural stem cell,NSC)的分化有關(guān),但振蕩電場對SCI后內(nèi)源性NSC分化及相關(guān)神經(jīng)功能恢復(fù)的影響尚未見報道。本研究旨在探討振蕩電場是否能調(diào)節(jié)內(nèi)源性NSC的分化以修復(fù)SCI。方法:將成年SD雌性大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(振蕩電場治療)、脊髓損傷組和假手術(shù)組,構(gòu)建大鼠胸部(T9-T11)SCI模型,并將振蕩電場裝置植入損傷部位。用Basso-bettie-Bresnahan(BBB)評分評價大鼠脊髓損傷后運(yùn)動功能的... 

【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】:44 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

振蕩電場通過調(diào)節(jié)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的遷移和分化促進(jìn)大鼠脊髓損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)


大鼠術(shù)后運(yùn)動功能BBB評分情況

脊髓損傷,印跡,熒光,蛋白


安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文17圖3大鼠脊髓損傷后神經(jīng)元的免疫熒光和蛋白印跡法結(jié)果Fig3ResultsofIFandWBofneuronsafterspinalcordinjuryinrats免疫熒光和蛋白印跡法檢測術(shù)后3、7、14天神經(jīng)元的存活情況。A:脊髓損傷組和實(shí)驗(yàn)組術(shù)后3天免疫熒光染色結(jié)果;B:脊髓損傷組和實(shí)驗(yàn)組術(shù)后7天免疫熒光染色結(jié)果;C:脊髓損傷組和實(shí)驗(yàn)組術(shù)后14天免疫熒光染色結(jié)果;D:免疫熒光定量分析;E:術(shù)后14天的蛋白印跡法檢測結(jié)果;F:蛋白印跡法結(jié)果定量分析。標(biāo)尺為50mm,DAPI陽性細(xì)胞顯藍(lán)色;MAP2陽性細(xì)胞顯紅色;每組4只大鼠。*P﹤0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.5振蕩電場促進(jìn)脊髓損傷后神經(jīng)軸突再生NF-H是神經(jīng)細(xì)胞骨架的主要組成部分,是一種特異性的神經(jīng)絲標(biāo)記物,用于檢測脊髓切片損傷區(qū)域的軸突。為探討振蕩電場刺激對脊髓損傷后軸突再生的影響,我們用NF-H的免疫熒光染色來評估損傷部位軸突的再生。結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)組NF-H陽性神經(jīng)軸突的數(shù)量在術(shù)后各時間點(diǎn)均高于脊髓損傷組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05;圖4A-D)。為定量分析NF-H標(biāo)記的軸突,我們在脊髓損傷后14天對損傷的脊髓組織進(jìn)行Westernblot

脊髓損傷,軸突,印跡,熒光


安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文18檢測。通過定量分析得到的蛋白條帶的光密度值,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組的NF-H表達(dá)明顯高于脊髓損傷組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05;圖4E-F)。圖4大鼠脊髓損傷后神經(jīng)軸突的免疫熒光和蛋白印跡法結(jié)果Fig4ResultsofIFandWBofaxonsafterspinalcordinjuryinrats免疫熒光和蛋白印跡法檢測術(shù)后3、7、14天神經(jīng)軸突的再生情況。A:脊髓損傷組和實(shí)驗(yàn)組術(shù)后3天免疫熒光染色結(jié)果;B:脊髓損傷組和實(shí)驗(yàn)組術(shù)后7天免疫熒光染色結(jié)果;C:脊髓損傷組和實(shí)驗(yàn)組術(shù)后14天免疫熒光染色結(jié)果;D:免疫熒光定量分析;E:術(shù)后14天的蛋白印跡法檢測結(jié)果;F:蛋白印跡法結(jié)果定量分析。標(biāo)尺為50mm,DAPI陽性細(xì)胞顯藍(lán)色;NF-H陽性軸突顯紅色;每組4只大鼠。*P﹤0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.6振蕩電場促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞向少突膠質(zhì)細(xì)胞分化為探討振蕩電場對內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞向少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的影響,分別于術(shù)后3、7、14天對Nestin和少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞標(biāo)記物NG2進(jìn)行熒光雙標(biāo)染色。結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組的

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]振蕩電場刺激治療脊髓損傷的研究進(jìn)展[J]. 潘素穎,張廣浩,霍小林,宋濤.  國際生物醫(yī)學(xué)工程雜志. 2010 (06)



本文編號:3399984

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