發(fā)布時(shí)間：2021-09-02 20:36

　　近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),間隙連接蛋白43（connexin43,Cx43）的表達(dá)與皮膚傷口愈合關(guān)系密切。皮膚創(chuàng)傷后,傷口內(nèi)部及其周圍組織中Cx43的表達(dá)瞬時(shí)下調(diào),可以加快皮膚傷口愈合的速率,提高傷口愈合的質(zhì)量。參與皮膚傷口修復(fù)的細(xì)胞主要有三種:成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞。有關(guān)Cx43與傷口愈合分子機(jī)制的研究表明:Cx43表達(dá)下調(diào)可以加快成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞的遷移速率,提高成纖維細(xì)胞和角化形成細(xì)胞增殖能力及角化細(xì)胞的分化能力。但Cx43是否影響血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能尚不清楚。已知血管內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)參與皮膚傷口愈合的整個(gè)過(guò)程。在炎癥階段,白細(xì)胞需要滲漏穿過(guò)毛細(xì)血管內(nèi)皮層,到達(dá)創(chuàng)傷部位引發(fā)炎癥反應(yīng)。而在增殖階段,血管內(nèi)皮細(xì)胞是傷口處血管新生的主要細(xì)胞,新生血管可以為傷口區(qū)域細(xì)胞的遷移、增殖提供氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)�；谘軆�(nèi)皮細(xì)胞對(duì)傷口愈合的重要性,本文研究分析Cx43下調(diào)對(duì)于血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響。人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）是最常用的血管內(nèi)皮細(xì)胞模型,而且它對(duì)包括炎癥因子在內(nèi)的多種體內(nèi)因子均具有良好的反應(yīng)性。因此,本文選擇HUVECs作為體外研究模型。小干擾RNA（si RNA）能夠特... 

【文章來(lái)源】：華僑大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

間隙連接蛋白43及通道結(jié)構(gòu)模式圖

第一章 引言因此，將炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度控制在合理的范圍內(nèi)有利于促進(jìn)傷口的愈合，往往皮膚損傷后，引起過(guò)度的炎癥反應(yīng)，適當(dāng)?shù)慕档脱装Y反應(yīng)的強(qiáng)度能很好改善傷口愈合的速率和質(zhì)量。炎癥反應(yīng)最重要的目的是將白細(xì)胞送到損傷部位，白細(xì)胞從血液中游出，到達(dá)損傷部位是炎癥反應(yīng)最重要的特質(zhì)，白細(xì)胞經(jīng)歷白細(xì)胞邊集、粘附、游出等階段到達(dá)損傷部位[61]。正常情況下，白細(xì)胞隨血液在血管中流動(dòng)，并不斷地與血管壁發(fā)生碰撞。損傷發(fā)生時(shí)，血液流動(dòng)的速度減慢，白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞間的更易發(fā)生碰撞，并且由于血流切應(yīng)力減下，白細(xì)胞就會(huì)在血管壁上形成滾動(dòng)。接著，由于內(nèi)皮細(xì)胞中選擇素粘附分子與白細(xì)胞中配體的相互作用，使得白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的接觸也變得越來(lái)越緊密，最后，穩(wěn)定粘附與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面，進(jìn)一步穿過(guò)血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入血管外組織[38]。

圖 2.1 HUVEC 體外創(chuàng)傷模型示意圖2 細(xì)胞免疫熒光染色事先將無(wú)菌的細(xì)胞爬片置于 24 孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的 HU于爬片上，補(bǔ)足培養(yǎng)基后置于 37℃、5% 二氧化碳培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)待細(xì)胞匯合度達(dá)到 100%時(shí)，用 10 μL 的槍頭制造創(chuàng)傷，然后去除原培S 浸洗 2 次，之后更換 10% FBS 的新鮮培養(yǎng)基。將其置于 37℃、5%的 CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng) 0.5 h、1 h、3 h、6 h、48 h 后，去除原有培養(yǎng)基，用 PBS 浸洗 3 次，每次 3 min。每孔加入 4%的多聚甲醛 200 μL，固定爬片 20 min， 然后去除多聚S 浸洗玻片 3 次，每次 5 min。樣品用 0.25% Triton X-100（PBS 配制配置）通透 10 min，之后用 P次，每次 5 min。2%的 BSA（用 PBST 稀釋）室溫封閉 1 h。吸水紙吸掉封閉液，除陰性對(duì)照加 25 μL 的 2%的 BSA 外，其余每張

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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