目的:成骨細(xì)胞作為骨組織形成與修復(fù)的重要細(xì)胞與激素性股骨頭壞死關(guān)系密切,研究發(fā)現(xiàn)糖皮質(zhì)激素的過(guò)量應(yīng)用可引起骨組織受到氧化性損傷,造成成骨細(xì)胞凋亡,而氧自由基（reactive oxygen species,ROS）作為介導(dǎo)氧化應(yīng)激性損傷的重要分子,其在激素誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡過(guò)程的來(lái)源及作用機(jī)制尚未明確,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外建立高濃度地塞米松（dexamethasone,DEX）環(huán)境,探討還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-reduced,NADPH）氧化酶（NADPH oxidase,NOX）介導(dǎo)的ROS生成對(duì)成骨細(xì)胞凋亡的影響機(jī)制。方法:取第3代小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞,設(shè)空白對(duì)照組;地塞米松組（DEX組）;地塞米松+ROS清除劑（N-乙酰半胱氨酸,NAC）組（DEX+NAC組）;NAC組;地塞米松+NOX抑制劑（二亞苯基碘,DPI）組（DEX+DPI組）;DPI組。按實(shí)驗(yàn)分組干預(yù)培養(yǎng)24 h,1.倒置顯微鏡下觀察成骨細(xì)胞形態(tài)。2.MTT法檢測(cè)成骨細(xì)胞活性。3.免疫熒光染色檢測(cè)成骨細(xì)胞內(nèi)ROS的生成。4.An... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察（倒置相差顯微鏡×100）

附圖形態(tài)學(xué)觀察（倒置相差顯微鏡 ×100）。a、空白對(duì)照組；b、NAC 組；d、NAC 組；e、DEX+DPI 組 f、DPI 組。b 組成骨形，細(xì)胞突起及細(xì)胞數(shù)目減少，a、c、d、e 及 f 組成骨細(xì)胞呈

圖 3 免疫熒光染色檢測(cè)細(xì)胞內(nèi) ROS 生成，A：免疫熒光顯微鏡 ×100 B：ROS相對(duì)生成率。相對(duì)于空白對(duì)照組，DEX 組細(xì)胞 ROS 產(chǎn)生明顯增加，DEX+DPI和 DEX+NAC 組結(jié)果與 DEX 組結(jié)果對(duì)比細(xì)胞內(nèi) ROS 產(chǎn)生明顯減少。（x ±s, n=3，**: P＜0.01, ***: P＜0.001, #: P＜0.01vs.DEX 組）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)胞凋亡在激素性股骨頭壞死中作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 張華峰,徐倩.  中華老年骨科與康復(fù)電子雜志. 2016(02)



本文編號(hào)：3377794