目的:本課題旨在研究高壓氧聯(lián)合電針對脊髓損傷大鼠髓鞘相關(guān)抑制蛋白（Nogo-A及NgR受體）的影響。方法:將84只雌性SD大鼠隨機(jī)分為4組,依次為模型組、高壓氧治療組電針治療組及聯(lián)合治療組。采用Allen′s打擊法打擊大鼠,實(shí)驗(yàn)重物5g,高度為4cm。造模成功后,模型組不進(jìn)行干預(yù),高壓氧治療組治療壓力為2.0ATA,用純氧洗艙10min,再減壓15min出艙,總治療時(shí)間85min,每日1次;電針治療組選取大鼠大椎、命門、腰陽關(guān)和長強(qiáng)穴各刺入5mm達(dá)硬模外,采用華佗牌SDZ-2型電針治療儀,疏密波,以2Hz頻率,強(qiáng)度適中,以針刺處肌肉輕微抖動(dòng),適應(yīng)后雙下肢癱瘓肌肉出現(xiàn)有節(jié)律性收縮為宜,治療時(shí)間為20min;聯(lián)合治療組治療方法為聯(lián)合高壓氧和電針治療。分別在損傷3d、7d、14d進(jìn)行取材,對損傷區(qū)域進(jìn)行脊髓BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分、HE染色及RT-qPCR法進(jìn)行Nogo-A、NgR mRNA基因檢測。結(jié)果:損傷后3、7和14d聯(lián)合治療組、高壓氧治療組和電針治療組BBB評(píng)分均高于模型組,認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）,且聯(lián)合治療組評(píng)分均高于高壓氧治療組與電針治療組（P<0.001）,... 

【文章來源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各組 BBB 評(píng)分趨勢,圖中顯示出聯(lián)合治療組在 3、7 和 14d BBB 評(píng)分均呈上升趨勢 且均高于其余三組,高壓氧治療組和電針治療組運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分呈上升趨勢,兩組評(píng)分曲線基 本重合,無明顯差異。模型組評(píng)分趨勢升高,但不同時(shí)間段均未高于其余三組。

在光學(xué)顯微鏡下可以看到:正常神經(jīng)細(xì)胞(如圖3-2)細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核清晰可見,細(xì)胞完整,細(xì)胞間的連接無異常,無細(xì)胞損傷出血,無炎癥細(xì)胞浸潤。而模型組(如圖3-3)背景均損傷出血,細(xì)胞腫脹,周圍有炎癥滲出,部分出血壞死,炎性細(xì)胞大量聚集,部分膠質(zhì)細(xì)胞壞死溶解,周圍神經(jīng)由于缺血、缺氧,核皺縮,形成空泡狀(周圍裂隙增寬)。經(jīng)高壓氧和電針治療后:損傷部位膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增生,炎癥細(xì)胞減少,周圍神經(jīng)元細(xì)胞缺血缺氧減輕,凋亡減少。皺縮的神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)治療后反應(yīng)性的恢復(fù),核質(zhì)變得清晰,還可以較清楚地看到神經(jīng)元細(xì)胞從皺縮到恢復(fù)的痕跡(箭頭所示)。隨著損傷時(shí)間的推移,治療組膠質(zhì)纖維增生,神經(jīng)細(xì)胞得到明顯改善;而模型組細(xì)胞瓦解,形成空泡,膠質(zhì)纖維少量增生,神經(jīng)損傷修復(fù)不明顯。3.3 RT-qPCR檢測Nogo-A及 NgR的基因表達(dá)量

經(jīng)RT-qPCR方法測出CT值,采用2-??ct值法計(jì)算出Nogo-A基因的表達(dá)濃度后,符合正態(tài)分布,經(jīng)單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)后得出各組與模型組相比較的基因表達(dá)濃度的均值、F值及P值(如表3-2),并建立了各組不同時(shí)間表達(dá)濃度柱狀圖(組間比較圖3-4、組內(nèi)比較圖3-5)。可以得出,在損傷后3、7和14d,高壓氧組、電針組和聯(lián)合組的Nogo-A mRNA表達(dá)量均低于模型組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。并且聯(lián)合治療組Nogo-A mRNA表達(dá)量低于高壓氧治療組和電針治療組,高壓氧治療組與電針治療組相比較無明顯意義。此外,同組內(nèi)不同時(shí)間比較,無論是損傷3、7還是14d,同組Nogo-A mRNA表達(dá)量無明顯變化,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在RT-qPCR儀器中,檢測NgR在脊髓損傷3天前的表達(dá)量也極少(CT值均在35以上)或無法顯示,所以采用2-??ct值法計(jì)算出Nogo-A基因的表達(dá)濃度的均值(表3-3),由于原數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后采用單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)后得出各組與模型組表達(dá)濃度相比較的均值、F值及P值(表3-4),并建立相應(yīng)柱狀圖(如圖3-6和圖3-7)。在損傷后7d高壓氧治療組與、電針治療組和聯(lián)合治療組NgR mRNA表達(dá)量與模型組比,F值為8.52,P<0.05,所以電針治療組和聯(lián)合治療組NgR mRNA表達(dá)量均低于模型組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。并且聯(lián)合治療組NgR mRNA表達(dá)量低于高壓氧治療組和電針治療組,高壓氧治療組與電針治療組相比無明顯差異。另外,各組內(nèi)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)出無論是治療7d還是14d,各組內(nèi)NgR mRNA的表達(dá)量變化不大,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。圖3-5各組內(nèi)Nogo-a mRNA表達(dá)趨勢,圖中柱形圖黑色代表模型組、深灰色代表電針治療組、灰色代表高壓氧治療組,淺灰色代表聯(lián)合治療組。各組從左往右分別為損傷后3、7和14d的Nogo-a mRNA表達(dá)量,各組間不同時(shí)間段柱狀圖高度無明顯差異。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3358156