本文關(guān)鍵詞：全麻藥物對培養(yǎng)大鼠皮層星形膠質(zhì)細胞興奮性和遞質(zhì)釋放的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景與目的:星形膠質(zhì)細胞已被證明在興奮后可釋放出多種神經(jīng)遞質(zhì)至突觸間隙,并作用于突觸前膜及突觸后膜,這些由星形膠質(zhì)細胞釋放出的神經(jīng)遞質(zhì)被稱為膠質(zhì)遞質(zhì)。因此,星形膠質(zhì)細胞被認(rèn)為是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(the central nervous system,CNS)突觸信息傳遞及調(diào)控過程的重要組成部分。本實驗旨在探究全身麻醉藥物對皮層星形膠質(zhì)細胞的作用,觀察全身麻醉藥物對星形膠質(zhì)細胞鈣瞬變(Calcium transients)及膠質(zhì)遞質(zhì)釋放的影響,分析其可能作用機制,為全麻機制研究提供新思路。方法:培養(yǎng)并純化大鼠皮層星形膠質(zhì)細胞,免疫熒光染色技術(shù)觀察膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)表達,鑒定星形膠質(zhì)細胞純度;反射熒光成像系統(tǒng)(reflected fluorescence system)動態(tài)觀察全身麻醉藥物丙泊酚(propofol)、氯胺酮(Ketamine,Ket)以及右旋美托咪啶(dexmedtomidine,Dex)對二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)誘發(fā)星形膠質(zhì)細胞胞內(nèi)鈣瞬變的影響;應(yīng)用ELISA法檢測胞內(nèi)三磷酸肌醇(inositol triphosphate,IP3)的水平變化;應(yīng)用液相色譜技術(shù),觀察全麻藥物作用下皮層星形膠質(zhì)細胞釋放谷氨酸(glutatmate,Glu),γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA),絲氨酸(Serine,Ser)的情況;最后使用M型乙酰膽堿受體受體(muscarinic type acetylcholine receptor)阻斷劑與N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-asparate,NMDA)受體阻斷劑,明確全麻藥物對星形膠質(zhì)細胞作用的靶點受體。結(jié)果:1.免疫熒光染色鑒定所培養(yǎng)皮層星形膠質(zhì)細胞純度大于90%;2.100 n M~100μM ADP均可誘發(fā)培養(yǎng)的皮層星形膠質(zhì)細胞[Ca2+]i升高,即鈣瞬變,且呈濃度依賴趨勢。其中100 n M ADP可誘發(fā)[Ca2+]i的輕度上升,但不具有統(tǒng)計學(xué)意義,而1μM、10μM、100μM的ADP則能誘發(fā)出顯著的[Ca2+]i上升,且差異顯著(P0.01),經(jīng)測算ADP激活培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞的半數(shù)有效濃度為208.04±14.94 n M;3.Ket可呈濃度依賴性抑制10μM ADP誘發(fā)的星形膠質(zhì)細胞鈣瞬變,且半抑制濃度值為236.23±3.62μM;而Propofol(100μM)和Dex(50μM、100μM)未能對10μM ADP誘導(dǎo)產(chǎn)生的星形膠質(zhì)細胞鈣瞬變產(chǎn)生明顯影響(P0.05);4.1μM ADP可顯著提升星形膠質(zhì)細胞內(nèi)IP3水平(P0.01);然而Ket、M型乙酰膽堿受體阻斷劑阿托品(Atropine)和NMDA受體阻斷劑(AP5)均對10μM ADP作用下星形膠質(zhì)細胞內(nèi)IP3水平?jīng)]有影響(P0.05);5.Ket并不影響ADP作用下星形膠質(zhì)細胞Glu,Ser的釋放水平(P0.05)。結(jié)論:1.Ket,Propofol,Dex三種麻醉藥物中,僅有Ket可以有效抑制ADP誘發(fā)的星形膠質(zhì)細胞鈣瞬變,且呈濃度依賴趨勢;2.ADP的應(yīng)用可以顯著提升星形膠質(zhì)細胞內(nèi)IP3水平;3.細胞內(nèi)IP3途徑可能沒有參與Ket抑制ADP誘發(fā)星形膠質(zhì)細胞鈣瞬變的作用機制;4.Ket抑制ADP誘發(fā)星形膠質(zhì)細胞鈣瞬變并不能有效影響Glu,和Ser的釋放。
【關(guān)鍵詞】：全身麻醉 星形膠質(zhì)細胞 鈣瞬變 氯胺酮 谷氨酸
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R614
【目錄】：

• 中英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-19
• 結(jié)果19-32
• 討論32-37
• 本實驗的不足和可深化之處37-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻39-45
• 綜述45-54
• 參考文獻50-54
• 致謝54-55
• 作者簡介55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 傅艷妮;劉玲;何波;郭明炎;劉安民;曹銘輝;;氯胺酮對原代培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞縫隙連接的影響[J];中華實驗外科雜志;2015年11期

2 李燁;張家驊;吳建云;;大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞的培養(yǎng)和鑒定[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2010年04期

  本文關(guān)鍵詞：全麻藥物對培養(yǎng)大鼠皮層星形膠質(zhì)細胞興奮性和遞質(zhì)釋放的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：326818