目的:探討外源性硫化氫（H2S）是否可以調(diào)節(jié)燒傷血清干預(yù)下大鼠表皮細(xì)胞中miRNA-455含量及燒傷大鼠血清細(xì)胞中miRNA-455含量。方法:將大鼠及大鼠表皮細(xì)胞作為研究對(duì)象。動(dòng)物層次:選取體重在350-400g之間雄性SD大鼠20只。將其隨機(jī)分為3組:正常對(duì)照組、燒傷組、燒傷+Na HS組。其中燒傷組、燒傷+Na HS組經(jīng)麻醉后背部制作燒傷面積為30%的III°燒傷模型。燒傷+Na HS組,分別于燒傷后1d、2d于腹腔注射56μmol/L的Na HS溶液0.4ml/100g。正常對(duì)照組、燒傷組、燒傷+Na HS組相同條件飼養(yǎng),并于燒傷2d、3d后,腹主動(dòng)脈采血,制備血清,提取各組血清中miRNA采用q PCR方法檢測(cè)各組中miRNA-455含量。細(xì)胞層次:大鼠表皮細(xì)胞隨機(jī)分為3組:正常組、燒傷血清組、燒傷血清+Na HS組。3組細(xì)胞同步化培養(yǎng)后,將3組細(xì)胞分別接種至6孔板中培養(yǎng),正常組繼續(xù)使用胎牛血清培養(yǎng),燒傷血清組、燒傷血清+Na HS組,則使用10%燒傷大鼠血清培養(yǎng)基干預(yù)4h。在燒傷血清+Na HS組用濃度為150μmol/L的Na HS溶液分別干預(yù)1、4、24h后。提取各組表... 

【文章來(lái)源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

擴(kuò)增曲線（擴(kuò)增前期原料和酶豐富的情況下，產(chǎn)物呈對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，隨著原料耗竭和酶失活，擴(kuò)增曲線達(dá)到平臺(tái)期，產(chǎn)物不再生成，曲線平滑）

青海大學(xué)碩士學(xué)位論文第二章材料與方法12融解分析模式：融解曲線95℃60秒鐘(RampRate4.4℃/秒)55℃30秒鐘(RampRate2.2℃/秒)95℃30秒鐘(RampRate0.11℃/秒，AcquisitionMode:Continuous，Acquisitions:5per℃)1cycle降溫50℃30秒鐘(RampRate2.2℃/秒)1cycle檢測(cè)結(jié)束后查看溶解曲線、擴(kuò)增曲線，根據(jù)所得的Ct值按公式計(jì)算出各組的目的基因的相對(duì)表達(dá)量2-ΔΔCt。圖2.1擴(kuò)增曲線（擴(kuò)增前期原料和酶豐富的情況下，產(chǎn)物呈對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，隨著原料耗竭和酶失活，擴(kuò)增曲線達(dá)到平臺(tái)期，產(chǎn)物不再生成，曲線平滑）圖2.2溶解曲線（擴(kuò)增產(chǎn)物的溶解曲線為單一峰，沒(méi)有雜峰，產(chǎn)物的特異性強(qiáng)，無(wú)非特異擴(kuò)增，沒(méi)有引物二聚體存在）

青海大學(xué)碩士學(xué)位論文第二章材料與方法15圖2.3.2miRNA-455靶基因編碼蛋白網(wǎng)絡(luò)相互作用圖因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)主要目的為驗(yàn)證外源性硫化氫與燒傷大鼠體內(nèi)miRNA-455含量變化關(guān)系，靶基因預(yù)測(cè)的相關(guān)部分，只是為后續(xù)可能的科研工作提供思路。故粗略篩選出在大鼠體內(nèi)與miRNA-455相關(guān)性較大數(shù)各基因，具體的各基因功能在此省略。后續(xù)具體及更為詳細(xì)的工作需在進(jìn)行后續(xù)可能的課題中進(jìn)行大量詳細(xì)的繼續(xù)探索。2.9統(tǒng)計(jì)學(xué)分析本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）描述，使用SPSS軟件22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，所選統(tǒng)計(jì)學(xué)方法為獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)（ttest），選取α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。


本文編號(hào)：3267287