目的:探討外源性硫化氫（H2S）是否可以調節(jié)燒傷血清干預下大鼠表皮細胞中miRNA-455含量及燒傷大鼠血清細胞中miRNA-455含量。方法:將大鼠及大鼠表皮細胞作為研究對象。動物層次:選取體重在350-400g之間雄性SD大鼠20只。將其隨機分為3組:正常對照組、燒傷組、燒傷+Na HS組。其中燒傷組、燒傷+Na HS組經(jīng)麻醉后背部制作燒傷面積為30%的III°燒傷模型。燒傷+Na HS組,分別于燒傷后1d、2d于腹腔注射56μmol/L的Na HS溶液0.4ml/100g。正常對照組、燒傷組、燒傷+Na HS組相同條件飼養(yǎng),并于燒傷2d、3d后,腹主動脈采血,制備血清,提取各組血清中miRNA采用q PCR方法檢測各組中miRNA-455含量。細胞層次:大鼠表皮細胞隨機分為3組:正常組、燒傷血清組、燒傷血清+Na HS組。3組細胞同步化培養(yǎng)后,將3組細胞分別接種至6孔板中培養(yǎng),正常組繼續(xù)使用胎牛血清培養(yǎng),燒傷血清組、燒傷血清+Na HS組,則使用10%燒傷大鼠血清培養(yǎng)基干預4h。在燒傷血清+Na HS組用濃度為150μmol/L的Na HS溶液分別干預1、4、24h后。提取各組表... 

【文章來源】：青海大學青海省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

擴增曲線（擴增前期原料和酶豐富的情況下，產(chǎn)物呈對數(shù)增長，隨著原料耗竭和酶失活，擴增曲線達到平臺期，產(chǎn)物不再生成，曲線平滑）

青海大學碩士學位論文第二章材料與方法12融解分析模式：融解曲線95℃60秒鐘(RampRate4.4℃/秒)55℃30秒鐘(RampRate2.2℃/秒)95℃30秒鐘(RampRate0.11℃/秒，AcquisitionMode:Continuous，Acquisitions:5per℃)1cycle降溫50℃30秒鐘(RampRate2.2℃/秒)1cycle檢測結束后查看溶解曲線、擴增曲線，根據(jù)所得的Ct值按公式計算出各組的目的基因的相對表達量2-ΔΔCt。圖2.1擴增曲線（擴增前期原料和酶豐富的情況下，產(chǎn)物呈對數(shù)增長，隨著原料耗竭和酶失活，擴增曲線達到平臺期，產(chǎn)物不再生成，曲線平滑）圖2.2溶解曲線（擴增產(chǎn)物的溶解曲線為單一峰，沒有雜峰，產(chǎn)物的特異性強，無非特異擴增，沒有引物二聚體存在）

青海大學碩士學位論文第二章材料與方法15圖2.3.2miRNA-455靶基因編碼蛋白網(wǎng)絡相互作用圖因為本實驗主要目的為驗證外源性硫化氫與燒傷大鼠體內miRNA-455含量變化關系，靶基因預測的相關部分，只是為后續(xù)可能的科研工作提供思路。故粗略篩選出在大鼠體內與miRNA-455相關性較大數(shù)各基因，具體的各基因功能在此省略。后續(xù)具體及更為詳細的工作需在進行后續(xù)可能的課題中進行大量詳細的繼續(xù)探索。2.9統(tǒng)計學分析本實驗數(shù)據(jù)為計量資料，用均數(shù)±標準差（x±s）描述，使用SPSS軟件22.0進行統(tǒng)計學處理，所選統(tǒng)計學方法為獨立樣本t檢驗（ttest），選取α=0.05作為檢驗水準。


本文編號：3267287