目的:1.研究小劑量超短波治療對(duì)脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）后早期A(yíng)1型星形膠質(zhì)細(xì)胞分化的影響。2.小劑量超短波治療聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）移植對(duì)脊髓損傷后大鼠損傷周?chē)切文z質(zhì)細(xì)胞的影響方法:1.將60只SD大鼠隨機(jī)分成3組:假手術(shù)組（n=4）,對(duì)照組（n=28）,干預(yù)組（n=28）,假手術(shù)組僅暴露T10脊髓但不給予打擊;對(duì)照組,暴露T10節(jié)段脊髓后給予Allen’s打擊制備SCI模型,并不給予任何治療;干預(yù)組,給予Allen’s打擊致SCI,并在損傷后24h開(kāi)始給予小劑量超短波（ultra shortwave,USW）治療,每日1次,每周5次,每次7min,直至取材前。SCI大鼠運(yùn)動(dòng)功能用Basso Beattie Bresnahan（BBB）評(píng)分進(jìn)行評(píng)價(jià),SCI大鼠取材后分別對(duì)受損脊髓組織進(jìn)行固定、脫水沉糖、冰凍縱向切片,使用免疫熒光法檢測(cè)A1型星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)、小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)、IBA-1/P65⁺細(xì)胞數(shù)及P65入核細(xì)胞數(shù)。2.將90... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

脊髓損傷大鼠造模示意圖（A-B）脊髓損傷模型打擊過(guò)（C）

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文42.2.2小劑量USW治療SCI術(shù)后第1天，給予干預(yù)組大鼠每天1次，每周5d的小劑量超短波干預(yù)，具體方法如下：每次治療前，先打開(kāi)小功率USW治療儀。以損傷區(qū)域?yàn)榛鶞?zhǔn)，將2號(hào)電極（直徑為4cm）對(duì)置放于受損脊髓兩側(cè)，電極與大鼠皮膚保持2cm間隙（上海產(chǎn)五官超短波治療儀，功率為14W，波長(zhǎng)7.37m,實(shí)際輸出功率約11W，每天7min）。2.2.3大鼠后肢的運(yùn)動(dòng)功能觀(guān)察為了保證實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性，所有SCI大鼠在造模前及造模后1d、3d、5d、7d，14d進(jìn)行BBB運(yùn)動(dòng)功能行為學(xué)評(píng)估。BBB評(píng)分完全癱瘓的大鼠為0分，正常大鼠21分，SCI大鼠的功能情況介于兩者之間，每1只入組的大鼠觀(guān)察4min。圖1脊髓損傷大鼠造模示意圖（A-B）脊髓損傷模型打擊過(guò)（C）大鼠脊髓損傷后損傷區(qū)域圖2脊髓損傷大鼠小劑量USW治療(A)與行為學(xué)分析（B）（B）BBB行為學(xué)觀(guān)察

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文63結(jié)果3.1SCI早期大鼠運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分對(duì)于BBB評(píng)分，所有的大鼠在造模前及假手術(shù)大鼠在術(shù)后蘇醒均為21分。造模后1d對(duì)照組、干預(yù)組BBB評(píng)分均處于0分，這證實(shí)SCI大鼠打擊模型建立的成功。隨著時(shí)間推移，對(duì)照組、干預(yù)組大鼠BBB評(píng)分逐漸上升，這代表SCI大鼠運(yùn)動(dòng)在不加任何干預(yù)的情況也可以恢復(fù)一部分；對(duì)照組、干預(yù)組自第3d起兩條曲線(xiàn)在逐漸向上的過(guò)程中，在同一時(shí)間點(diǎn)相比，干預(yù)組數(shù)值高于對(duì)照組，這代表從數(shù)值上看，干預(yù)組恢復(fù)程度快與對(duì)照組（圖2A）。大鼠SCI后14d時(shí)BBB評(píng)分，干預(yù)組高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），這代表干預(yù)組SCI大鼠相比對(duì)照組表現(xiàn)出更好的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)（圖3）。3.2IBA-1/P65免疫熒光IBA-1是小膠質(zhì)細(xì)胞的特異性標(biāo)志物，在假手術(shù)組脊髓組織當(dāng)中，小膠質(zhì)細(xì)胞呈現(xiàn)長(zhǎng)梭狀。SCI后，小膠質(zhì)細(xì)胞及浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞共同發(fā)揮免疫作用，吞噬過(guò)細(xì)胞的巨噬細(xì)胞呈現(xiàn)大而圓的多核狀。熒光顯微鏡下觀(guān)察發(fā)現(xiàn)，SCI后對(duì)照組、干預(yù)組1-3d時(shí)脊髓組織周?chē)∧z質(zhì)細(xì)胞數(shù)量快速升高，SCI后1d兩組間浸潤(rùn)細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)量無(wú)明顯差異(p=0.4848)。SCI后3-7d兩組小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量處于緩慢上升圖3SCI后各組運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況(A)SCI后早期組BBB行為學(xué)評(píng)分(B)SCI后14d時(shí)兩組BBB行為學(xué)評(píng)分**P<0.01


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