發(fā)布時間：2021-06-13 13:23

　　目的:通過實驗研究PKM2在骨肉瘤MG-63細胞的相對表達量來研究腫瘤微環(huán)境中THP-1來源單核細胞在誘導分化成巨噬細胞后其表型可能會發(fā)生的變化。初步探討骨肉瘤中PKM2和腫瘤相關(guān)巨噬細胞TAM之間的相關(guān)性。方法:1.通過siRNA干擾技術(shù)使骨肉瘤MG-63細胞的PKM2水平明顯降低。2.應用qRT-PCR方法測定siRNA轉(zhuǎn)染后的MG-63細胞中PKM2的表達情況。3.Transwell小室構(gòu)建間接共培養(yǎng)模型,把低表達PKM2的骨肉瘤MG-63細胞與經(jīng)過PMA誘導處理后的THP-1細胞共同組成體外間接共培養(yǎng)模型,模擬腫瘤微環(huán)境。4.共培養(yǎng)結(jié)束后用流式細胞技術(shù)測定單核巨噬細胞中CD209+細胞的比例,根據(jù)結(jié)果來初步分析巨噬細胞誘導后的分化表型。結(jié)果:1.為了研究腫瘤微環(huán)境中PKM2在骨肉瘤細胞中的表達情況,實驗通過設(shè)計、合成并且轉(zhuǎn)染siRNA,結(jié)果發(fā)現(xiàn)骨肉瘤MG-63細胞通過PKM2-siRNA均能使PKM2表達顯著降低,與無效序列組以及正常培養(yǎng)組相比,實驗組中PKM2表達量的改變顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。2.實驗組經(jīng)過PMA處理后與低表達PKM2的骨肉瘤MG-... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

qRT-PCR檢測siRNA干擾后骨肉瘤細胞MG-63中PKM2表達水平（*表示與無關(guān)序列組比較差異顯著；#表示與正常對照組比較差異顯）

圖 3 流式細胞檢測單核細胞表面的 CD209 受體相對比例（*表示與無關(guān)序列組比較差異顯著；#表示與正常對照組比較差異顯表 5 流式細胞檢測單核細胞表面受體 CD209 的相對比例ups 1 2 3 均數(shù)± KB 組 0.35 0.30 0.29 0.31 NC 組 0.22 0.31 0.28 0.27 si609 組 0.12 0.13 0.14 0.13示與無關(guān)序列組比較差異顯著；#表示與正常對照組比較差異顯）

【參考文獻】：
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