本文關(guān)鍵詞：生物硅—微球支架材料結(jié)合AFDR修復(fù)大鼠顱骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景骨缺損的發(fā)生有創(chuàng)傷、感染、腫瘤、以及各種先天性疾病等原因,發(fā)生率可達(dá)5%-10%,其修復(fù)是臨床上較難解決的問題。骨缺損的治療主要是通過骨移植來填充、修復(fù),骨移植按來源不同可分為自體骨移植、同種異體骨移植及異種骨移植等。自體骨移植因具有骨傳導(dǎo)和骨誘導(dǎo)的雙重作用,不產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng),且愈合較迅速,一直被看作是骨移植的金標(biāo)準(zhǔn)。但是由于自體骨來源有限,以及同種異體骨和異種骨的免疫排斥反應(yīng)或缺乏生物活性,其臨床應(yīng)用受到了限制。為了克服異體骨、自體骨及異種骨在骨缺損修復(fù)中所存在的種種問題,通過組織工程合成理想的人工骨修復(fù)材料成為骨組織工程的研究熱點(diǎn)。生物硅-微球支架材料,由國家地質(zhì)實(shí)驗(yàn)測試中心提供,是在生物-硅化仿生新礦物材料的基礎(chǔ)上制備的一種新型骨材料。該材料具有骨傳導(dǎo)的作用,與天然骨有相似的結(jié)構(gòu),具有一定孔隙和空間鏈接。中藥骨碎補(bǔ)(drynaria rhizome, DR)具有補(bǔ)腎益精,強(qiáng)健筋骨,活血散瘀,消腫止痛的作用。研究證實(shí)骨碎補(bǔ)總黃酮(assemble flavone of drynaria rhizome, AFDR)具有促進(jìn)骨折愈合、抗骨質(zhì)疏松、抗炎止痛的作用,且能夠降低血脂,改善微循環(huán),對腎臟有一定的保護(hù)作用等。應(yīng)用生物硅-微球支架材料修復(fù)骨缺損,結(jié)合使用AFDR,可能增強(qiáng)骨修復(fù)能力,減輕創(chuàng)傷反應(yīng)。研究目的觀察和比較生物硅-微球支架材料(biological silicon-microsphere scaffolds,BSMS)結(jié)合骨碎補(bǔ)總黃酮(AFDR)修復(fù)骨缺損的效果,探討中西醫(yī)結(jié)合對骨缺損的探索治療。研究方法1.組織相容性實(shí)驗(yàn)：12只SD大鼠,按取材時間不同分為3組。在大鼠脊柱一側(cè)背部皮膚作長約2cm的縱行切口,深筋膜分離,植入大小約5mm×5 mm×2mm的生物硅-微球支架材料。術(shù)后于2、4、8周三個時間點(diǎn)處死大鼠,組織標(biāo)本行蘇木精-伊紅(HE)染色,觀察切片組織學(xué)變化。2.大鼠顱骨缺損實(shí)驗(yàn)：54只SD大鼠,隨機(jī)分為3組。A組：生物硅-微球支架材料(BSMS)+去離子水(deionized water, DW),18只,DW灌胃4-12周。B組：生物硅-微球支架材料+骨碎補(bǔ)總黃酮(AFDR),18只,AFDR灌胃4-12周。C組：羥基磷灰石(Hydroxyapatite, HA)+DW,只,DW灌胃4-12周。實(shí)驗(yàn)SD大鼠顱骨缺損造模直徑約lcm,分4、8、12周三個時間點(diǎn)處死大鼠取材。進(jìn)行HE染色、Masson染色觀察組織學(xué)變化；Ⅰ型膠原免疫組化、堿性磷酸酶免疫組化及骨鈣素免疫組化,用顯微鏡采集圖像,分析各觀察指標(biāo)光密度值,進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。研究結(jié)果生物硅-微球支架材料(BSMS)植入大鼠體內(nèi)未見明顯的炎性反應(yīng)及對周圍組織的毒害作用。BSMS+AFDR組的組織學(xué)可觀察大量的血管、纖維組織長入材料內(nèi)部,大量骨樣組織形成,骨修復(fù)效果及材料溶解程度優(yōu)于其它兩組。堿性磷酸酶免疫組化的平均積分光密度(average integrated optical density, AIOD)值：AFDR組在4周、8周時與DW組及HA組比較有統(tǒng)計學(xué)差異,在12周時與HA組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)；Ⅰ型膠原免疫組化AIOD值：AFDR組在4周、8周、12周時與DW組和HA組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)；骨鈣素免疫組化AIOD值：AFDR組在4周、8周、12周時與DW組和HA組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。免疫組化的光密度值分析表明,BSMS+AFDR組較其它兩組陽性表達(dá)明顯。結(jié)論1. BSMS具有良好的生物組織相容性。2. BSMS結(jié)合AFDR可有效修復(fù)大鼠較大的骨缺損。3. BSMS結(jié)合AFDR提高堿性磷酸酶、Ⅰ型膠原蛋白及骨鈣素的陽性表達(dá),促進(jìn)骨基質(zhì)形成和礦化,從而加速骨修復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：骨缺損 骨碎補(bǔ)總黃酮 生物硅-微球支架材料 修復(fù) 組織相容性
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R318.08;R683.5
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 英文縮略詞11-12
• 文獻(xiàn)綜述12-38
• 綜述1 骨碎補(bǔ)及骨碎補(bǔ)總黃酮(AFDR)的研究概況12-20
• 1 成分研究12
• 2 藥理作用12-15
• 2.1 促進(jìn)骨折愈合作用12-13
• 2.2 抗骨質(zhì)疏松作用13
• 2.3 抗炎作用13-14
• 2.4 保護(hù)腎臟的作用及預(yù)防藥物性耳聾14
• 2.5 調(diào)節(jié)血脂、改善微循環(huán)障礙14
• 2.6 護(hù)牙健齒作用14-15
• 2.7 其它藥理作用15
• 2.8 用藥安全性評價15
• 3 總結(jié)和展望15-16
• 參考文獻(xiàn)16-20
• 綜述2 修復(fù)骨缺損的支架材料應(yīng)用進(jìn)展20-30
• 1 無機(jī)材料20-22
• 1.1 磷酸鈣陶瓷20-21
• 1.2 納米羥基磷灰石21
• 1.3 生物活性玻璃21-22
• 2 可降解的生物高分子材料22-23
• 2.1 聚乳酸、聚羥基乙酸22
• 2.2 幾丁質(zhì)及其衍生物22-23
• 2.3 纖維蛋白凝膠23
• 2.4 藻酸鹽(alginates)23
• 3 組織工程骨支架的制備23-24
• 4 展望24-26
• 參考文獻(xiàn)26-30
• 綜述3 中醫(yī)對骨折的認(rèn)識及治療30-38
• 1 中醫(yī)骨傷的發(fā)展30-31
• 2 中醫(yī)對骨折病因病機(jī)的認(rèn)識31-32
• 2.1 外因31
• 2.2 內(nèi)因31-32
• 2.3 骨折損傷的病機(jī)32
• 3 骨折的中醫(yī)治療32-34
• 3.1 手法復(fù)位與夾板固定32-33
• 3.2 骨折的藥物治療33-34
• 4 總結(jié)和展望34-36
• 參考文獻(xiàn)36-38
• 前言38-40
• 第一部分 生物硅-微球支架材料的組織相容性研究40-46
• 引言40
• 1 材料和方法40-43
• 1.1 主要設(shè)備儀器及試劑40
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料：生物硅-微球支架材料40
• 1.3 動物分組40-41
• 1.4 動物模型建立41
• 1.5 標(biāo)本采集41
• 1.6 蠟塊制作41-43
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果43
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動物一般狀況43
• 2.2 大體觀察43
• 2.3 HE染色觀察43
• 3 討論43-44
• 4 結(jié)論44-45
• 5 附圖片45-46
• 第二部分 生物硅-微球支架材料結(jié)合AFDR修復(fù)大鼠顱骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究46-70
• 引言46
• 1 材料和方法46-51
• 1.1 主要設(shè)備儀器及試劑46-47
• 1.2 動物分組47
• 1.3 藥物劑量47-48
• 1.4 建立動物模型48
• 1.5 標(biāo)本采集48
• 1.6 蠟塊制作48-49
• 1.7 切片脫蠟HE染色程序49
• 1.8 膠原Masson染色程序49-50
• 1.9 免疫組化石蠟切片染色程序50-51
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果51-55
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動物一般狀況51-52
• 2.2 大體觀察52
• 2.3 HE染色及Masson染色觀察52
• 2.4 免疫組化結(jié)果52-55
• 3 討論55-57
• 3.1 骨損傷修復(fù)過程55-56
• 3.2 生物硅-微球支架材料結(jié)合骨碎補(bǔ)總黃酮修復(fù)骨缺損56-57
• 4. 結(jié)論57-58
• 5 附圖58-70
• 參考文獻(xiàn)70-72
• 致謝72-73
• 個人簡歷73

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本文編號：306411