本文關(guān)鍵詞：豬DCD供肝常溫機(jī)械灌注保存及其對(duì)膽管保存損傷的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:肝移植是治療各種終末期肝病肝功能衰竭可靠、有效途徑。擴(kuò)大供體器官來源,增加可以安全使用的供體器官數(shù)量,是解決供體器官相對(duì)短缺的有效方法,因此提高和改善心臟死亡后捐獻(xiàn)器官的質(zhì)量(Donation after circulatory death,DCD)至關(guān)重要。低溫冷保存(UW液,0-4℃)利用低溫條件下細(xì)胞酶反應(yīng)速率降低,對(duì)供肝可以保存20小時(shí)以上,一直以來被作為供肝保存的標(biāo)準(zhǔn)方案,但是,DCD供肝由于在器官獲取前血流動(dòng)力學(xué)不穩(wěn)定,相對(duì)于其他類型器官捐獻(xiàn)方式經(jīng)歷了較長熱缺血時(shí)間,此標(biāo)準(zhǔn)方案的保護(hù)作用明顯不足,肝移植后缺血性膽管損傷(Ischemic-type biliary lesions)、移植物功能恢復(fù)延遲(Delayed graft function,DGF)和原發(fā)性移植物無功能(Primary graft nonfunction,PNF)等并發(fā)癥高發(fā),亟需尋求更佳的器官保存方案。常溫機(jī)械灌注(Normothermic machine perfusion,NMP)模擬人體的生理?xiàng)l件,持續(xù)向供肝泵入氧合含血灌注液,在常溫下維持細(xì)胞的生理機(jī)能及代謝。本研究擬構(gòu)建簡單、穩(wěn)定、實(shí)用的NMP系統(tǒng),并探討NMP對(duì)豬DCD供肝保存期間膽管的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)分為兩部分:第一部分,NMP對(duì)豬DCD供肝膽管的保護(hù)作用。首先,構(gòu)建NMP保存裝置:采用離心泵、氧合器、恒溫水浴箱、連接管路、壓力感受器、流量計(jì)等部件構(gòu)建離體肝臟NMP保存裝置,其次利用NMP器官保存裝置對(duì)6只巴馬小型豬離體肝臟進(jìn)行NMP保存,觀察并比較灌注保存期間門靜脈和肝動(dòng)脈的壓力及流量、肝臟溫度、灌注液的生化指標(biāo)、膽汁分泌以及膽管病理等指標(biāo)變化。第二部分,研究機(jī)械灌注對(duì)豬DCD供肝保存期間膽管的修復(fù)作用:選用健康的巴馬小型豬24只,體重30-35Kg,雌雄不限,豬齡在10個(gè)月份以上,由解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,隨機(jī)分為兩組,心臟停跳40min后,NMP組以NMP保存6h,UW液組以UW液單純低溫保存6h,然后兩組均行原位肝移植手術(shù),分別于保存6h及再灌注后取膽管標(biāo)本,行病理學(xué)及免疫組化染色。結(jié)果:1.成功建立了NMP保存裝置,對(duì)小型豬肝臟體外灌注保存過程中,穩(wěn)定控制溫度、門靜脈和肝動(dòng)脈的壓力和流量,灌注保存液中ALT、AST、ALP、乳酸等指標(biāo)在保存開始時(shí)出現(xiàn)較高水平的升高,之后維持在穩(wěn)定水平,6h的膽汁分泌總量為27.6±0.59ml,采用Hansen提供的評(píng)價(jià)膽管損傷的半定量評(píng)分方法,兩組組織學(xué)評(píng)分分別為(12、10、9、8、7、10)VS(6、8、7、7、5、9),有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2.NMP組與冷保存組術(shù)后5天的存活率分別為100%和0,有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),NMP組的ALT、AST、LDH、Lac指標(biāo)均低于冷保存組,兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),膽管病理也顯示NMP組膽管損傷明顯輕于冷保存組。實(shí)驗(yàn)組膽管上皮及PBG結(jié)構(gòu)顯示彌漫的Ki-67染色的細(xì)胞,提示近期有細(xì)胞增殖。相反地,對(duì)照組Ki-67染色的細(xì)胞幾乎沒有。v WF染色顯示對(duì)照組膽管周圍靜脈叢出現(xiàn)較多的血小板聚集。結(jié)論1.NMP保存期間可以逆轉(zhuǎn)熱缺血后器官的能量匱乏狀態(tài),通過持續(xù)提供氧氣及營養(yǎng)底物,對(duì)供體器官有很好的保護(hù)作用。2.利用常溫機(jī)械灌注裝備修復(fù)熱缺血器官時(shí),對(duì)于熱缺血時(shí)間較長的器官也需進(jìn)行較長時(shí)間的修復(fù)。3.機(jī)械灌注對(duì)膽管的保護(hù)作用及促進(jìn)膽管屏障的恢復(fù)有利于阻止NAS發(fā)生。對(duì)于已經(jīng)受損的膽管,NMP通過對(duì)PBG、PVP的保護(hù)作用,促進(jìn)膽管上皮細(xì)胞再生也能起到修復(fù)作用。4.供體膽管通過NMP保存方法,可以轉(zhuǎn)變損傷的順序(CS組:熱缺血損傷—冷保存損傷—第二次的熱缺血—移植后灌注不足的熱缺血損傷)為(NMP組:熱缺血損傷—氧合的機(jī)械灌注—第二次的熱缺血損傷),減輕了三分之二的膽管的損傷。
【關(guān)鍵詞】：常溫機(jī)械灌注 膽管損傷 心死亡捐獻(xiàn) 膽管周圍靜脈叢膽管周圍腺體
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R657.3
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號(hào)說明10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 一、常溫機(jī)械灌注對(duì)DCD供肝膽管保存的影響13-24
• 1.1 對(duì)象和方法13-17
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.1.2 主要儀器和設(shè)備13-14
• 1.1.3 常溫機(jī)械灌注保存液14-15
• 1.1.4 DCD供肝切取15-16
• 1.1.5 實(shí)驗(yàn)分組16
• 1.1.6 常溫機(jī)械灌注保存裝置的連接及運(yùn)行16
• 1.1.7 觀察指標(biāo)及方法16-17
• 1.2 結(jié)果17-21
• 1.2.1 保存期間門靜脈和肝動(dòng)脈的灌注壓力、流量及肝臟保存溫度17-18
• 1.2.2 保存期間灌注保存液血?dú)饧半娊赓|(zhì)等指標(biāo)變化18-19
• 1.2.3 保存期間灌注液ALT、AST水平，每小時(shí)膽汁量19-20
• 1.2.4 膽管組織常規(guī)病理檢查20-21
• 1.3 討論21-23
• 1.4 小結(jié)23-24
• 二、常溫機(jī)械灌注對(duì)DCD供肝膽管保存期間修復(fù)的影響24-34
• 2.1 對(duì)象和方法24-27
• 2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑及器械設(shè)備24-25
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及手術(shù)25
• 2.1.3 觀察指標(biāo)和方法25-27
• 2.1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法27
• 2.2 結(jié)果27-31
• 2.2.1 手術(shù)基本情況及術(shù)后存活率27-28
• 2.2.2 血清學(xué)檢查28-29
• 2.2.3 膽管組織常規(guī)病理檢查29-30
• 2.2.4 膽管組織免疫組化染色結(jié)果30-31
• 2.3討論31-33
• 2.3.1 合成ATP，恢復(fù)供體器官能量儲(chǔ)備31-32
• 2.3.2 對(duì)膽管PBG及PVP結(jié)構(gòu)的保護(hù)，，促進(jìn)受損膽管修復(fù)32
• 2.3.3 減少缺血時(shí)間，減少移植前后膽管的缺血性損傷32-33
• 2.4 小結(jié)33-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明39-40
• 綜述 邊緣供肝用于肝移植的研究進(jìn)展40-48
• 綜述參考文獻(xiàn)45-48
• 致謝48-49
• 個(gè)人簡歷49

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 Stefan Kienlein;Wenzel Schoening;Anne Andert;Daniela Kroy;Ulf Peter Neumann;Maximilian Schmeding;;Biliary complications in liver transplantation: Impact of anastomotic technique and ischemic time on short- and long-term outcome[J];World Journal of Transplantation;2015年04期

2 王騰飛;楊濤;張威;方振宇;王洪海;劉蕾;張海明;王玉亮;;曲美他嗪降低大鼠脂肪肝缺血再灌注損傷的研究[J];天津醫(yī)藥;2015年12期

3 魏林;朱志軍;高偉;楊濤;曾志貴;李俊杰;;肝中靜脈完全劈分的成人間劈離式肝移植臨床研究[J];中華肝臟外科手術(shù)學(xué)電子雜志;2013年02期

4 ;Effects of warm ischemia time on biliary injury in rat liver transplantation[J];World Journal of Gastroenterology;2012年43期

5 M Thamara PR Perera;Simon R Bramhall;;Current status and recent advances of liver transplantation from donation after cardiac death[J];World Journal of Gastrointestinal Surgery;2011年11期

6 葉U_發(fā);明英姿;趙杰;彭貴主;張毅;;64例脂肪變性供肝臨床肝移植療效分析[J];中華肝膽外科雜志;2013年02期

7 石蕊;;邊緣供肝在移植中的應(yīng)用[J];中華器官移植雜志;2009年07期

8 朱曉峰;廖海華;何曉順;馬毅;王東平;王國棟;胡安兵;鞠衛(wèi)強(qiáng);巫林偉;邰強(qiáng);;脂肪供肝對(duì)肝移植術(shù)后早期肝功能和預(yù)后的影響[J];中華普通外科雜志;2008年07期

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本文編號(hào)：305882