本文關(guān)鍵詞：仿生斜交疊層組織工程纖維環(huán)支架的構(gòu)建及評估，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:1.采用濕紡法制備取向PCL/SF混合微米纖維膜;2.評估PCL/SF混合微米纖維膜的生物安全性和生物相容性;3.應用兔AF細胞-PCL/SF混合纖維膜復合體構(gòu)建±30°斜交疊層組織工程纖維環(huán)支架。方法:1.以PCL和SF為原材料,以HFIP為溶劑建立PCL/SF-HFIP共混紡絲液,以濕紡法制備取向PCL/SF混合微米纖維膜,并通過體視顯微鏡、SEM等觀察纖維膜的表面形態(tài)、纖維直徑及排列方向,通過FTIR分析檢測混合材料化學成分,并分別檢測層間纖維交叉與平行排列時纖維膜的力學性能。2.分離培養(yǎng)兔AF細胞并培養(yǎng)至P2代,CCK-8法檢測混合材料浸提液細胞毒性,將P2代細胞種植到纖維膜上體外培養(yǎng)7天后,通過LIVE/DEAD染色共聚焦圖像及SEM圖像評估混合纖維膜的生物相容性。3.將細胞-混合纖維膜復合體體外培養(yǎng)3天后,構(gòu)建±30°斜交疊層組織工程纖維環(huán)支架,并通過組織學及免疫組化染色評估細胞-支架復合體的生物學行為及其用于纖維環(huán)組織工程的可行性。結(jié)果:1.體視及SEM圖像觀察可見纖維排列方向較為一致,直徑較為均一,纖維表面較粗糙,凹凸不平,混合微米纖維的直徑為18.05±3.51μm;層間纖維角度為±30°交叉排列及平行排列狀態(tài)下拉伸彈性模量分別為9.91±0.63MPa和8.25±1.09 MPa,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);FTIR分析表明混合材料具有PCL和SF的化學成分特征。2.CCK-8增殖檢測顯示隨著時間進行OD值增長趨勢明顯。浸提液組不同時間點之間OD值差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。培養(yǎng)至第10天時與對照組間差異出現(xiàn)統(tǒng)計學意義(P0.05)。LIVE/DEAD染色共聚焦圖像顯示AF細胞與混合纖維膜復合培養(yǎng)后生長活性良好,細胞數(shù)量較多且能夠沿纖維方向取向生長。SEM圖像顯示細胞能夠黏附于材料表面并分泌大量細胞外基質(zhì)。3.斜交疊層組織工程纖維環(huán)固定牢固,截面可見各層間基本無分層,接觸較好。HE染色可見AF細胞呈長梭形,能夠黏附于纖維表面,混合纖維交叉取向結(jié)構(gòu)能夠在圖像中分辨。甲苯胺藍及番紅O染色為陽性,陽性區(qū)域主要集中在外層及層間的空隙處。I型膠原免疫組化染色為陽性,顯淺棕色,均勻分布在支架纖維之間。結(jié)論:1、本實驗中以濕紡法制備了PCL/SF混合微米纖維膜,其纖維排列方向一致,直徑均勻;將其按±30°斜交疊層排列時具有一定的力學強度。2、取向排列的PCL/SF混合纖維能夠引導AF細胞在混合纖維表面取向性黏附、增殖及分泌大量細胞外基質(zhì),具備良好的生物安全性和生物相容性,是構(gòu)建組織工程纖維環(huán)的理想支架載體。3、本實驗中應用細胞-混合纖維膜復合體構(gòu)建了模擬外層纖維環(huán)±30°斜交疊層結(jié)構(gòu)的仿生纖維環(huán)支架,能夠為AF細胞在支架中的生存及ECM的分泌提供結(jié)構(gòu)支持,可以用于構(gòu)建組織工程化纖維環(huán)組織。
【關(guān)鍵詞】：纖維環(huán) 組織工程 斜交疊層 聚己內(nèi)酯 絲素蛋白 濕紡法 支架
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R318.08;R681.5
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語/符號說明11-12
• 前言12-15
• 研究現(xiàn)狀、成果12-14
• 研究目的、方法14-15
• 一、聚己內(nèi)酯/絲素蛋白混合微米纖維膜的制備與表征15-24
• 1.1 對象和方法15-17
• 1.1.1 實驗材料及試劑15
• 1.1.2 實驗試劑配制15
• 1.1.3 實驗儀器15-16
• 1.1.4 實驗方法16-17
• 1.2 結(jié)果17-20
• 1.2.1 大體觀察17-18
• 1.2.2 掃描電鏡觀察18
• 1.2.3 混合纖維膜化學成分分析18
• 1.2.4 混合纖維膜的力學性能測定18-20
• 1.3 討論20-23
• 1.3.1 支架材料的選擇20-21
• 1.3.2 濕紡法構(gòu)建取向聚己內(nèi)酯/絲素蛋白混合微米纖維膜21-22
• 1.3.3 混合微米纖維膜的理化特性22-23
• 1.4 小結(jié)23-24
• 二、聚己內(nèi)酯/絲素蛋白混合微米纖維膜的生物相容性評估24-30
• 2.1 對象和方法24-26
• 2.1.1 實驗材料及試劑24
• 2.1.2 實驗試劑配制24-25
• 2.1.3 實驗儀器25
• 2.1.4 實驗方法25-26
• 2.2 結(jié)果26-28
• 2.2.1 細胞增殖分析(CCK-8檢測)26
• 2.2.2 LIVE/DEAD染色及掃描電鏡觀察纖維膜上的細胞行為26-28
• 2.3 討論28-29
• 2.3.1 纖維環(huán)組織工程種子細胞28
• 2.3.2 混合材料的生物相容性28-29
• 2.4 小結(jié)29-30
• 三、±30°仿生斜交疊層結(jié)構(gòu)組織工程纖維環(huán)的構(gòu)建30-38
• 3.1 對象和方法30-32
• 3.1.1 實驗材料及試劑30
• 3.1.2 實驗試劑配制30
• 3.1.3 實驗儀器30
• 3.1.4 實驗方法30-32
• 3.2 結(jié)果32-35
• 3.2.1 大體觀察32
• 3.2.2 HE染色觀察32
• 3.2.3 甲苯胺藍及番紅O染色觀察32
• 3.2.4 Ⅰ型膠原免疫組化染色觀察32-35
• 3.3 討論35-37
• 3.3.1 組織工程纖維環(huán)研究背景35-36
• 3.3.2 大體及組織學、免疫組化染色觀察評估36-37
• 3.4 小結(jié)37-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻39-44
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明44-45
• 綜述 組織工程骨軟骨復合組織構(gòu)建研究進展45-56
• 綜述參考文獻52-56
• 致謝56-57
• 個人簡歷57

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 崔福齋,張偉;組織工程框架材料設(shè)計思路[J];透析與人工器官;2000年04期

2 ;組織工程[J];基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床;2001年06期

3 馮曉明;組織工程醫(yī)療產(chǎn)品標準化研究的進展[J];現(xiàn)代康復;2001年12期

4 ;精選目次:《組織工程雜志》[J];現(xiàn)代康復;2001年16期

5 姜華;組織工程研究的要求及進展[J];生物醫(yī)學工程與臨床;2003年01期

6 俞軍,王雁,楊志明;2004′中國組織工程論壇紀要[J];中國修復重建外科雜志;2004年04期

7 張志雄;奚廷斐;;冷靜反思組織工程應該如何發(fā)展[J];中國修復重建外科雜志;2009年02期

8 ;組織工程專業(yè)詞匯的中英文對照[J];中國組織工程研究與臨床康復;2009年24期

9 ;組織工程專業(yè)詞匯的中英文對照[J];中國組織工程研究與臨床康復;2009年28期

10 ;組織工程專業(yè)詞匯的中英文對照[J];中國組織工程研究與臨床康復;2009年33期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張其清;姚康德;劉玲蓉;;組織工程與組織工程材料[A];第三屆中國功能材料及其應用學術(shù)會議論文集[C];1998年

2 曹誼林;崔磊;商慶新;劉偉;;組織工程的研究現(xiàn)狀與應用展望[A];首屆全國醫(yī)療器械學術(shù)與產(chǎn)業(yè)論壇論文集[C];2002年

3 樊瑜波;陶祖萊;;組織工程生物反應器的生物力學[A];中國力學學會學術(shù)大會'2005論文摘要集（上）[C];2005年

4 楊志明;;組織工程發(fā)展趨勢及展望[A];第三屆全國口腔頜面部創(chuàng)傷暨修復重建學術(shù)研討會論文匯編[C];2003年

5 樊瑜波;;組織工程生物反應器的生物力學[A];第八屆全國生物力學學術(shù)會議論文集[C];2006年

6 遲寶榮;孟祥偉;孫艷;胡春光;姜金蘭;;組織工程肝構(gòu)建的實驗研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國消化病學術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

7 曹誼林;;組織工程的發(fā)展與主要研究方向[A];第十屆中國科協(xié)年會論文集（三）[C];2008年

8 顧曉松;;組織工程神經(jīng)的研究進展[A];華東六省一市生物化學與分子生物學會2008年學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2008年

9 朱楚洪;應大君;糜建紅;;組織工程生物血管構(gòu)建[A];中國生物醫(yī)學工程學會第六次會員代表大會暨學術(shù)會議論文摘要匯編[C];2004年

10 邱建輝;史廷春;姜睿智;索海瑞;;組織工程新技術(shù)：器官打印研究進展[A];第六屆中國功能材料及其應用學術(shù)會議論文集（5）[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 鄭昊;我國首個組織工程產(chǎn)業(yè)基地在西安落成[N];陜西日報;2012年

2 本報記者 白曉蕓;人類機體再造的曙光組織工程[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

3 本報記者 王丹;組織與器官重建:讓夢想照進現(xiàn)實[N];健康報;2009年

4 記者 沈雪梅;通大參與“干細胞與組織工程”研究[N];南通日報;2009年

5 綜合;南通大學開展“干細胞與組織工程”研究[N];江蘇科技報;2010年

6 記者 李鵬;是什么擊中了曹誼林？[N];北京科技報;2011年

7 記者 王春 特約通訊員 李佳 首席 曹誼林;組織工程：再造完美血肉之軀[N];科技日報;2005年

8 記者 林洵 通訊員 王繼榮 羅國金;組織工程關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)項目啟動[N];健康報;2012年

9 本報記者 吳潔;為實現(xiàn)“人體配件工廠”的夢想[N];科技日報;2002年

10 畢東海;組織工程前瞻[N];浙江日報;2000年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李殿坤;嵌合型異種組織工程小口徑血管的應用基礎(chǔ)研究[D];首都醫(yī)科大學;2016年

2 曹玉萍;體外化學物質(zhì)致敏性檢測模型和組織工程皮膚真菌感染模型的構(gòu)建[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

3 吳英鋒;基于內(nèi)皮祖細胞和脫細胞動脈基質(zhì)構(gòu)建組織工程靜脈的研究[D];首都醫(yī)科大學;2006年

4 周慧梅;組織工程醫(yī)用生物補片重建陰道的實驗及臨床研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

5 馬英智;利用人表皮干細胞和人真皮成纖維細胞體外構(gòu)建組織工程復合皮膚的研究[D];吉林大學;2009年

6 唐秀杰;組織工程構(gòu)建小口徑人工血管的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

7 楊家驥;人臍靜脈內(nèi)皮細胞構(gòu)建血管化組織工程真皮的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2008年

8 嚴泉劍;兔組織工程膀胱實驗研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學;2003年

9 莊穎;組織工程椎間盤的體外初步構(gòu)建及其生物學性能研究[D];第三軍醫(yī)大學;2011年

10 梁峰;組織工程肝單元構(gòu)建的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2006年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 何玉蘭;體外構(gòu)建血管化組織工程心肌的研究[D];河北聯(lián)合大學;2014年

2 張霞;氧化多糖改性膠原水凝膠[D];復旦大學;2014年

3 張悅;熒光蛋白標記牙組織工程的體內(nèi)實驗研究[D];新疆醫(yī)科大學;2016年

4 張文瑾;耳部術(shù)腔上皮缺損組織工程學修復的基礎(chǔ)研究[D];安徽醫(yī)科大學;2016年

5 莊桂武;兔尿源性干細胞復合小腸粘膜下層脫細胞基質(zhì)構(gòu)建組織工程尿道的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2016年

6 趙家寧;仿生斜交疊層組織工程纖維環(huán)支架的構(gòu)建及評估[D];天津醫(yī)科大學;2016年

7 孫曉北;組織工程及其我國發(fā)展問題對策研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2009年

8 郝曉艷;組織工程室內(nèi)脂肪組織存活及生長的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

9 史培良;用組織工程的方法構(gòu)建組織工程骨的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學;2001年

10 張才茂;組織工程真皮動態(tài)三維應變培養(yǎng)裝置和抗張強度檢測裝置的研制[D];第三軍醫(yī)大學;2010年

  本文關(guān)鍵詞：仿生斜交疊層組織工程纖維環(huán)支架的構(gòu)建及評估，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：302522