本文關(guān)鍵詞：鈣敏感受體在大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的表達(dá)變化及其意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中鈣敏感受體的表達(dá)變化及其和細(xì)胞凋亡的相關(guān)性。方法:利用原代培養(yǎng)的新生SD大鼠脊髓神經(jīng)元建立缺氧-復(fù)氧損傷(A/R)模型,隨機(jī)分成4組:正常對照組、缺氧-復(fù)氧組(A/R)、激活組(A/R+GdCl3)、抑制組(A/R+NPS2390)。應(yīng)用Hoechest33258染色觀察各組脊髓神經(jīng)元凋亡。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)分析鈣敏感受體及鈣蛋白酶蛋白在脊髓神經(jīng)元的表達(dá)定位。運(yùn)用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測鈣敏感受體、鈣蛋白酶、Bax蛋白在不同處理組中的表達(dá)變化。結(jié)果:1.鈣敏感受體和鈣蛋白酶分布于脊髓神經(jīng)元細(xì)胞的胞膜、胞漿和突起。2.缺氧-復(fù)氧組較對照組相比,CaSR、鈣蛋白酶、Bax蛋白表達(dá)升高,同時(shí)細(xì)胞凋亡增加。3.較缺氧-復(fù)氧組相比,激活組進(jìn)一步升高了CaSR、鈣蛋白酶、Bax蛋白的表達(dá);而抑制組上述作用相反。結(jié)論:1.大鼠脊髓神經(jīng)元中存在鈣敏感受體和鈣蛋白酶的表達(dá),且都分布于脊髓神經(jīng)元細(xì)胞的胞膜、胞漿和突起部。2.缺氧-復(fù)氧可激活CaSR,并且增加脊髓神經(jīng)元的凋亡。應(yīng)用激動劑GdCl3可以加重原本存在的缺氧復(fù)氧損傷,增加凋亡;抑制劑NPS2390作用相反。說明CaSR參與了缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元凋亡的過程。3.CaSR的激動或者抑制,都伴隨著鈣蛋白酶表達(dá)的升高或降低,說明在缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元凋亡的過程中,CaSR與鈣蛋白酶存在正相關(guān)性。4.應(yīng)用抑制劑NPS2390可以明顯抑制細(xì)胞凋亡,減少細(xì)胞缺氧-復(fù)氧損傷。因此,特異性的CaSR抑制劑或?qū)⒊蔀橹委熂顾枞毖俟嘧p傷的一種行之有效的方法。
【關(guān)鍵詞】：鈣敏感受體 鈣蛋白酶 脊髓神經(jīng)元 缺氧-復(fù)氧 凋亡
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R651.2
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 1.引言8-11
• 2.實(shí)驗(yàn)材料11-15
• 2.1.實(shí)驗(yàn)試劑與材料11
• 2.2.主要儀器11-12
• 2.3.試劑的配置12-15
• 2.4.實(shí)驗(yàn)動物15
• 3.實(shí)驗(yàn)方法15-20
• 3.1 新生大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞的培養(yǎng)15-16
• 3.2. 免疫熒光鑒定神經(jīng)元以及檢測CaSR，，鈣蛋白酶的表達(dá)定位16
• 3.3. 細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型的建立16-17
• 3.4. 實(shí)驗(yàn)分組17
• 3.5. 檢測指標(biāo)17-20
• 3.6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20
• 4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-23
• 4.1. 脊髓神經(jīng)元形態(tài)學(xué)變化20
• 4.2. 神經(jīng)元細(xì)胞的鑒定20
• 4.3. Hoechest33258染色觀察凋亡結(jié)果20-21
• 4.4. 免疫熒光檢測結(jié)果21
• 4.5. Ca SR、Calpain、bax蛋白的表達(dá)21-23
• 5.討論23-27
• 6.結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-34
• 綜述34-46
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 附錄：主要略縮詞一覽表46-48
• 攻讀碩士期間發(fā)表的文獻(xiàn)48-49
• 致謝49

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄭家強(qiáng);楊建虹;;骨相關(guān)細(xì)胞中鈣敏感受體研究進(jìn)展[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2009年09期

2 龔艷;胡清華;鐘華;梁霄;羅小林;何芳;;小凹蛋白-1和細(xì)胞外鈣敏感受體在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞小凹共定位研究[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年03期

3 楊智偉;趙施皓;鄭煦f

本文編號：301137