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莽草酸通過提升受損自噬來緩解IL-1β誘導(dǎo)軟骨降解的研究

發(fā)布時間:2021-01-27 16:23
  目的:研究IL-1β引起軟骨肉瘤細(xì)胞系SW1353細(xì)胞內(nèi)金屬蛋白酶MMP3、MMP13升高而自噬相關(guān)指標(biāo)下降的現(xiàn)象,以及莽草酸在此過程中起到的作用及其機(jī)制。方法:使用不同濃度的莽草酸處理SW1353細(xì)胞24h,CCK8檢測細(xì)胞增殖毒性。選用0.1m M,1m M,10m M濃度的SA預(yù)處理SW1353細(xì)胞1h,再用10ng/m L的IL-1β刺激SW1353細(xì)胞24h,用WB以及PCR檢測依賴時間的MMPs以及自噬相關(guān)信號分子ATG7,Beclin-1,LC3Ⅰ/Ⅱ的表達(dá)規(guī)律,并以自噬激動劑和抑制劑加以驗(yàn)證。在IL-1β處理不同時間后檢測MAPK相關(guān)通路信號分子,并選取最佳時間點(diǎn)用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。SA預(yù)處理后IL-1β處理24h并檢測PI3K/AKT、NF-κB相關(guān)通路信號分子的表達(dá)規(guī)律。結(jié)果:此實(shí)驗(yàn)過程中所用到的莽草酸濃度對SW1353細(xì)胞無毒性。與空白對照組相對照,IL-1β刺激引起SW1353細(xì)胞內(nèi)MMPs表達(dá)升高,自噬相關(guān)蛋白ATG7、Beclin-1的表達(dá)及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下降,同時伴有ERK、P38、JNK、AKT、P65的磷酸化。自噬相關(guān)的激動劑和抑制劑可以模擬或者阻... 

【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
引言
摘要
Abstract
一、材料
二、實(shí)驗(yàn)方法
三、結(jié)果
四、結(jié)論與討論
五、參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
英文縮略詞表
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]LED照射對培養(yǎng)SW1353細(xì)胞MPP-3與MMP-13的影響[J]. 曾常春,郭周義,張奉學(xué),鄧文娣,劉頌豪.  激光生物學(xué)報. 2007(02)

博士論文
[1]人軟骨肉瘤細(xì)胞SW1353及WISP3突變型C20/A4軟骨細(xì)胞的Ⅱ型膠原動力學(xué)及定位研究[D]. 楊雅.中南大學(xué) 2006



本文編號:3003357

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