目的:檢測缺氧誘導下的關節(jié)軟骨細胞活力和凋亡細胞的比例;在缺氧環(huán)境和正常氧含量環(huán)境中活性caspase 3的變化、超氧化物產(chǎn)生量、細胞膜滲透性、線粒體超氧化物指示劑含量的變化;研究低氧誘導關節(jié)軟骨細胞的分子信號通路及CREB相關軟骨細胞凋亡機制,檢測低氧干擾C28/I2細胞后RhoA的表達變化規(guī)律、細胞凋亡程度和CREB磷酸化水平,過表達RhoA后,線粒體功能的變化規(guī)律,探索RhoA過表達在軟骨細胞缺氧情況下與CREB相關性研究,為探索關節(jié)軟骨退變的機制奠定基礎,為關節(jié)退變及免疫性炎性損傷及防治提供基礎依據(jù)。方法:常規(guī)培養(yǎng)人類關節(jié)軟骨細胞C28/I2,將實驗分為兩組,缺氧組采用5%CO2和3%氧在培養(yǎng)箱中培養(yǎng),正常氧組采用常規(guī)環(huán)境培養(yǎng),利用MTT實驗連續(xù)觀察培養(yǎng)12小時、24小時和48小時后兩組細胞活力的變化,再利用流式細胞技術連續(xù)觀察24小時和48小時后兩組凋亡的比率,Caspase-3的含量采用Caspase SenSolyte試劑盒利用熒光免疫儀在波長為460 nm檢測;利用cytochrome c（Cyt c）、caspase 3（CASP 3）、CREB及磷酸化CREB免疫印... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 缺氧誘導關節(jié)軟骨細胞凋亡及凋亡相關蛋白表達的研究
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
第二部分 缺氧誘導關節(jié)軟骨細胞線粒體失活的相關研究
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
第三部分 RhoA的過表達對關節(jié)軟骨細胞線粒體失活及細胞凋亡影響的研究
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
全文總結
參考文獻
文獻綜述 關節(jié)軟骨退變的相關因素研究進展
    參考文獻
致謝
攻讀博士期間發(fā)表的論文及參加申報的課題


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3003146