【目的】探討利用脂肪間充質(zhì)干細胞外囊泡（ADSC-EV）輔助脂肪移植,提高移植脂肪體積保留率的可行性及相關(guān)機制,并探索利用延遲注射策略進行優(yōu)化的可能性。【方法】1.取20-40歲女性腹部水動力吸脂所得脂肪顆粒,通過漂洗、酶解消化、貼壁分離法獲得脂肪間充質(zhì)干細胞（ADSC）,進行傳代培養(yǎng)及鑒定。獲取ADSC培養(yǎng)上清液,梯度超高速離心獲取ADSC-EV。利用透射電鏡、PKH26染色、nanosight、western blot等檢測ADSC-EV的理化性質(zhì)。體外利用ADSC-EV進行人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）的成管及劃痕實驗,探究ADSC-EV的體外促成管效應(yīng),以證明其具有促血管形成作用,并利用RNA深度測序分析其可能的機制。2.選取裸鼠皮下人脂肪移植模型（n=16）,分為空白組（0.35m L脂肪）,EV組（0.35m L脂肪+7μg EV）。于1個月,3個月后取材,測量移植物濕重及體積,HE切片觀察脂肪組織形態(tài)、組織纖維化及壞死情況,CD31染色計量血管形成數(shù)目,CD206染色檢測脂肪組織炎癥反應(yīng)情況。3.選取裸鼠皮下脂肪移植模型（n=24）,分為空白組（0.35m L脂肪）,E... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ADSC鑒定A)ADSC光鏡下生長形態(tài)

ADSC-EV鑒定

圖 3. HUVECs 對 ADSC-EV 的攝取將 ADSC-EVs 用紅色熒光標記后與 HUVECs 共培養(yǎng)，4h 后觀察可見 EV 聚集于 HUVECs細胞核周圍，提示 EV 被細胞所攝�。顺撸�2 μm).Fig 3. Cellular Uptake of ADSC EVs. HUVECs were incubated with PKH-26(red)-labeled ADSC-EVs for 4 h. The nuclei of HUVECs were stained by DAPI(blue). Separate and merged channels of structured illumination microscopy areshown. Scale bars: 2 μm.3.4 ADSC-EV 體外促成管效應(yīng)觀察


本文編號：2991572