【目的】血管內(nèi)皮細(xì)胞是形成腫瘤新生血管的重要組成部分,與腫瘤的發(fā)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān),因此本課題旨在探討低氧條件下人骨肉瘤MNNG/HOS細(xì)胞是否可轉(zhuǎn)分化為血管內(nèi)皮樣細(xì)胞,并進(jìn)一步探討其分子機(jī)制�！痉椒ā�1.將人骨肉瘤MNNG/HOS細(xì)胞在各組不同條件下培養(yǎng),觀察其是否出現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞所具有典型的“鋪路石”外觀;應(yīng)用3D培養(yǎng)技術(shù),觀測是否出現(xiàn)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);應(yīng)用RT-PCR技術(shù),從m RNA水平檢測內(nèi)皮細(xì)胞所特有的標(biāo)記物（CD31、CD34、v WF）的表達(dá)情況;采用細(xì)胞免疫熒光技術(shù),從蛋白質(zhì)水平檢測CD31、CD34、v WF的表達(dá)情況。2.將人骨肉瘤MNNG/HOS細(xì)胞在各組不同條件下培養(yǎng)96小時后,接種于裸鼠皮下,構(gòu)建裸鼠人骨肉瘤異種移植瘤模型,接種49天后,取下異種移值瘤并予抗人的CD31抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,檢測其異種移植瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞是否有來源于人骨肉瘤MNNG/HOS細(xì)胞。3.將體外各組不同條件下培養(yǎng)的人骨肉瘤MNNG/HOS細(xì)胞株,應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,檢測能被CD133抗體染色的細(xì)胞的比例,應(yīng)用q PCR技術(shù)檢測干細(xì)胞基因Oct4和Nanog轉(zhuǎn)錄水平;接種于裸鼠皮下,觀察... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

人骨肉瘤MNNG/HOS細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化96小時后的形態(tài)學(xué)變化

25圖 1-2-1 在 Matrigel 膠上培養(yǎng)時，常氧組的人骨肉瘤 MNNG/HOS 細(xì)胞培養(yǎng)的形態(tài)學(xué)變化，在接種 96 小時后，仍然未見網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成（10×）。

26圖 1-2-2 在 Matrigel 膠上培養(yǎng)時，常氧對照組的人骨肉瘤 MNNG/HOS 細(xì)胞培養(yǎng)的形態(tài)學(xué)變化，在接種 96 小時后，仍然未見網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成（10×）。


本文編號：2970409