目的:惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移是晚期腫瘤患者死亡的主因,也是目前未能完全解決的問題。近十余年來,隨著新一代測序技術(shù)的進步,癌癥基因組層面上的轉(zhuǎn)移機制已經(jīng)被較為深入地研究。然而隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)仍有相當一部分癌癥的轉(zhuǎn)移無法通過現(xiàn)有基因?qū)用娴臋C制解釋,這促使人們試圖從表觀遺傳學等新的角度闡明癌癥轉(zhuǎn)移的機制。近幾年,以非編碼RNA、染色質(zhì)重組、DNA甲基化等研究方向為代表的表觀遺傳學為癌癥轉(zhuǎn)移機制的研究提供了新的思路。其中一些最新的研究表明,在轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的水平上,RNA甲基化及其功能在癌癥發(fā)生和發(fā)展過程中的作用十分重要。但是,目前RNA甲基化在癌癥中作用的研究并不全面,尤其在轉(zhuǎn)移方面的研究,仍然有待進一步的探索。m6A甲基化修飾（N6-methyladenosine）是RNA甲基化修飾中分布最廣的一種,它是一種可逆的RNA修飾,同時受到m6A甲基轉(zhuǎn)移酶和m6A去甲基化酶的調(diào)節(jié)。m6A甲基轉(zhuǎn)移酶介導m6A甲基化修飾的形成,m6A去甲基化酶可以選擇性地將m6A修飾去除,通過結(jié)合蛋白實現(xiàn)作用。目前已有的研究顯示m6A涉及多個生物學過程,因此m6A修飾和m6A調(diào)節(jié)劑在各種疾病,尤其是惡性腫瘤中可能發(fā)揮的... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１?ｍ６Ａ調(diào)節(jié)劑在乳腺癌組織和ＩＥ常組織表達的差異??

?中國醫(yī)科大學博士學位論文???（圖１．４Ａ），而ＦＴＯ的表達在三朗型乳腺癌患者和＿三陰型乳腺癌患者間未見明顯??差異（圖１．４Ｂ－Ｅ）。結(jié)合之前所述結(jié)果，ＦＴＯ在三陰型乳腺癌中的低表達與其作為??危險因素的作用相反，只有ＭＥＴＴＬ３被證明在三朗型乳腺癌的轉(zhuǎn)移中起重要的抑制??作用。因此在３種ｍ６Ａ甲基轉(zhuǎn)移酶中選擇ＭＥＴＴＬ３作為下一步研究的對象，同時??在２種去甲基化酶中選擇ＡＬＫＢＨ５作為對照研究對象。??ＴＣＧＡ?ＴＣＧＡ??５?８?｜—￣—｜?＾?８〇〇〇〇￣??產(chǎn)?；?Ｉ?？??ｉｂ?６０００．?？?＾?６００００－??ｃ?｜?？??祭?４０００．?？?Ｉ?．２?４００００－?．??Ｉ?ｉ?ｉ?謹?ｉ??Ｉ?１ｓｔ－?ｇ?〇Ｕ－４＾??夕°?一??圖１．４?ＭＥＴＴＬ３調(diào)節(jié)劑在三陰型乳腺癌患者中和非三陰型乳腺癌患者中的表達差異??使用ＴＣＧＡ數(shù)據(jù)庫分析ＭＥＴＴＬ３和ＦＴＯ在三陰型乳腺癌患者（９１）中和非三陰型乳腺癌??患＃?Ｃ１０Ｑ５）中的表達癦＊＊戶＜０．０１??３．２甲基轉(zhuǎn)移酶ＭＥＴＴＬ３通過增強ｍ６Ａ修飾來抑制三陰型乳腺癌細胞??的轉(zhuǎn)移能力??３．２Ｊ甲基轉(zhuǎn)移酶ＭＥＴＴＬ３抑制三陰型乳腺癌細胞的遷移、侵襲和黏附能力??為了研宄ＭＥＴＴＬ３對三陰型乳腺癌細胞轉(zhuǎn)移的作用，分別使用ｓｉ－ＮＣ、??ｓｉ－ＭＥＴＴ３－ｌ、ｓｉ－ＭＥＴＴＬ３－２三種ｓｉＲＮＡ轉(zhuǎn)染Ｈ陰型乳腺癌細胞株ＭＤＡ－ＭＢ－２３１和??ＭＤＡ－ＭＢ－４６８?（圖１．５Ａ－Ｂ），４８小時后對處理過的細胞進行Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ實驗和細胞??黏附實驗。結(jié)果表明，在ＭＤＡ－ＭＢ－２３１和ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞中

?Ｈｉｌｌ?：：Ｉ８ＩＩ??目［ＭＳｉｄ?［ｌｌＭ??Ｄ?ＭＥＴＴＬ３－ＮＣ?ＭＥＨＬ３－ＫＤ１?ＭＥＨＬ３－ＫＤ２??產(chǎn)?Ｉ?．?＾：：?：Ｙ琢糊?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１?２．〇?ＭＤＡ－Ｍ＆４６８??ｉ?■?．－；?；：；？，；：?ａｗｌ?＾￣??ｓ?ｈ．?￥參．：４?［私Ｃ多樸．．以以Ｉ??Ｅ?ＭＥＨＬ３－ＮＣ?ＭＥＨＬ３－ＫＤ１?ＭＥＴＴＬ３－ＫＤ２??１?陣＿?ＳＳＩ］?ＩＳＳＭ?２ｉ?￣?－ｉ?？??＿?ｍｙ?隱?ｄ?ｙｉｆｔｉ??§?ｆｅｓＩＭ??圖１．５?ＭＥＴＴＬ３抑制了三陰型乳腺癌細胞的轉(zhuǎn)移能力??（Ａ）?ｑＲＴ－ＰＣ．Ｒ?檢測?ｓｉ－ＮＣ?或?ｓｉ－ＭＥＴＴＬ３?轉(zhuǎn)徽的?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１?和?ＭＤＡ－ＭＢ－４６８?細胞中??ＭＥＴＴＬ３?的編。１８Ｓ?為內(nèi)參“Ｂ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?檢測?ｓｉ－ＮＣ?或?ｓｉ－ＭＥＴＴＬ３?轉(zhuǎn)染的?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??和?ＭＤＡ－ＭＢ－４６８?細胞中?ＭＥＴＴＬ３?的表運。ａ－ｔｕｂｕｌｉｎ?為內(nèi)參。（Ｃ－Ｄ）?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?檢測?ＭＥＴＴＬ３??厳低的ＭＤＡ－ＭＢ－２３１和ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞的遷移和優(yōu)＿能力（ｌｉＬＦｏｌｄ?Ｃｈａｎｇｅ：衰示為被ｓｉＮＣ??轉(zhuǎn)染的對照細胞數(shù)目的比例（右）。放大倍率１００倍。（Ｅ）黏附實驗檢測ＭＥＴＴＬ３敲低的??ＭＤＡ－ＭＢ－２３１和ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞的黏附龍力Ｃ＆Ｌ?Ｆｏｌｄ?Ｃｈａｎｇｅ?＿示為被ｓｉＮＣ轉(zhuǎn)染的對照??細胞數(shù)目的比例?＜右）。放大貧率＞?１００倍。＊尸＜０．０５。＊＊?Ｐ?＜０．０１。方差代義３：個獨立：養(yǎng)驗的??１６??


本文編號：2966183