背景及研究目的:瑞芬太尼作為臨床麻醉中常用的阿片類鎮(zhèn)痛類藥物,眾多研究已經(jīng)證實(shí)其在調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫和炎癥反應(yīng)中的作用。本課題組的前期研究發(fā)現(xiàn),β-arrestin2作為G蛋白偶聯(lián)受體的重要負(fù)調(diào)節(jié)因子,介導(dǎo)TLR4通路從而參與瑞芬太尼的肝保護(hù)作用。本研究的目的是探究瑞芬太尼預(yù)處理對(duì)于70%部分肝臟切除術(shù)誘導(dǎo)的肝再生過程的作用及其具體機(jī)制,為臨床瑞芬太尼的圍術(shù)期應(yīng)用提供更多的依據(jù)及支持。方法:1.瑞芬太尼預(yù)處理對(duì)于70%部分肝臟切除術(shù)后肝再生過程的影響方法:本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為6-8周齡雄性SPF級(jí)C57BL/6J小鼠,分別予以30μg/kg瑞芬太尼或同等劑量生理鹽水腹腔注射預(yù)處理后,在70%部分肝臟切除術(shù)后6h、24h、36h、48h、120h、192h計(jì)算各組肝體比,Ki-67免疫組化染色反映肝臟細(xì)胞再生情況,HE染色、TUNEL染色及肝功能檢測(cè)反映肝臟損傷程度,RTPCR檢測(cè)糖異生及脂肪酸合成過程中重要因子、肝再生過程的部分相關(guān)細(xì)胞因子的mRNA水平,Western blot檢測(cè)120h肝臟中功能性Yap的蛋白表達(dá)。在離體細(xì)胞水平上,給予不同濃度的瑞芬太尼處理小鼠原代肝細(xì)胞,經(jīng)正常培養(yǎng)或缺氧復(fù)... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

瑞芬太尼預(yù)處理對(duì)于小鼠70%部分肝臟切除術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)肝再生的影響

上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文26呈現(xiàn)嗜酸狀態(tài)，但肝竇的結(jié)構(gòu)并沒有明顯改變，也并未出現(xiàn)明顯的壞死區(qū)域。不同時(shí)間點(diǎn)兩組間的比較并沒有發(fā)現(xiàn)明顯的差異。但從蘇木紫著色情況來看，瑞芬太尼組的肝臟在36h已有部分細(xì)胞核恢復(fù)了其嗜堿性從而被著色，而生理鹽水對(duì)照組120h才出現(xiàn)明顯的核結(jié)構(gòu)。TUNEL染色結(jié)果顯示（圖2B），70%肝臟切除術(shù)后兩組肝臟均未發(fā)生明顯的細(xì)胞凋亡。圖2瑞芬太尼預(yù)處理對(duì)于小鼠70%肝臟切除術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)肝損傷的影響Fig.2Effectofremifentanilpreconditioningonmicehepaticinjuryatdifferenttimepointsafter70%partialhepatectomyA：小鼠70%肝臟切除術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)再生肝臟HE染色結(jié)果。B：小鼠70%肝臟切除術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)再生肝臟TUNEL染色結(jié)果及其統(tǒng)計(jì)圖。紅色箭頭指向TUNEL陽性細(xì)胞，200×。圖中數(shù)值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（MEAN±SEM）表示。Control：生理鹽水預(yù)處理組，Remifentanil：瑞芬太尼預(yù)處理組。1.3.2.2：瑞芬太尼預(yù)處理對(duì)于小鼠70%肝臟切除術(shù)后肝功能的影響70%肝臟切除術(shù)后6h、24h、36h、48h、120h、192h肝功能生化檢測(cè)結(jié)果顯示，在肝切早期，由于剩余肝臟并不能完全代償切除的70%肝臟的功能，轉(zhuǎn)氨酶（圖3A，圖3B）及總膽紅素（圖3C）水平均顯著升高，其中轉(zhuǎn)氨酶水平超過2000U/L。與對(duì)照組相比，瑞芬太尼預(yù)處理組的肝功能并沒有顯著改善，可能與肝臟損傷程度太重，轉(zhuǎn)氨酶水平過高有關(guān)。

上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文27圖3瑞芬太尼預(yù)處理對(duì)于小鼠70%肝臟切除術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)肝功能的影響Fig.3Effectofremifentanilpreconditioningonmiceliverfunctionatdifferenttimepointsafter70%partialhepatectomyA：小鼠70%肝臟切除術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)血漿AST水平。B：小鼠70%肝臟切除術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)血漿ALT水平。C：小鼠70%肝臟切除術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)血漿T-Bil水平，*P＜0.05，與該時(shí)間點(diǎn)生理鹽水對(duì)照組相比。圖中數(shù)值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（MEAN±SEM）表示；Control：生理鹽水預(yù)處理組；Remifentanil：瑞芬太尼預(yù)處理組。1.4瑞芬太尼預(yù)處理對(duì)于70%肝切除后小鼠肝臟代謝的影響1.4.1材料與方法1.4.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本實(shí)驗(yàn)選取6-8周齡雄性SPF級(jí)C57BL/6J小鼠，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來源為上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，且經(jīng)過上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理機(jī)構(gòu)許可。在予以不同的實(shí)驗(yàn)處理前，動(dòng)物以6只/籠飼養(yǎng)于獨(dú)立通風(fēng)籠盒系統(tǒng)，飼養(yǎng)5天以上以適應(yīng)飼養(yǎng)環(huán)境。飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)遵從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)條件，12小時(shí)晝夜明暗節(jié)律，動(dòng)物房和實(shí)驗(yàn)室的溫度保持在23-25℃，相對(duì)濕度保持在50%左右。動(dòng)物給予SPF級(jí)標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物飼料喂養(yǎng)，自由進(jìn)食進(jìn)水。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)操作均遵循人道主義原則。1.4.1.2主要實(shí)驗(yàn)試劑及耗材

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]瑞芬太尼預(yù)處理對(duì)大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響及機(jī)制[J]. 趙鴿,陳正春,申新,陳亞麗,呂毅.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(12)
[2]Effect of liver regeneration after partial hepatectomy and ischemia-reperfusion on expression of growth factor receptors[J]. P Baier,G Wolf-Vorbeck,S Hempel,UT Hopt,E von Dobschuetz.  World Journal of Gastroenterology. 2006(24)



本文編號(hào)：2964778