一、研究背景下腰痛是我國(guó)臨床脊柱外科門(mén)診中最常見(jiàn)的病人就診原因之一,也是全世界發(fā)病率最高的骨骼肌肉系統(tǒng)疾病。在過(guò)去的25年里,下腰痛的患病率和致殘率顯著增加,總發(fā)病率在35-55歲的年齡范圍內(nèi)達(dá)到頂峰,并可能隨著人口老齡化而進(jìn)一步增加。疾病發(fā)生時(shí),患者活動(dòng)能力受到限制,嚴(yán)重者無(wú)法實(shí)現(xiàn)正常的生理功能和日常生活,影響生活質(zhì)量,甚至導(dǎo)致殘疾。流行病學(xué)研究表明,在導(dǎo)致下腰痛的諸多因素里,椎間盤(pán)退變是最主要的原因之一�，F(xiàn)有的治療方案其目的多是對(duì)癥治療,以緩解癥狀,卻無(wú)法從根本上扭轉(zhuǎn)椎間盤(pán)退變的趨勢(shì)。因此,深入研究椎間盤(pán)組織的生理機(jī)制和退變的病理過(guò)程,從中探索發(fā)現(xiàn)潛在的生物治療靶點(diǎn),實(shí)現(xiàn)椎間盤(pán)組織結(jié)構(gòu)和生物力學(xué)功能的重塑,可能成為椎間盤(pán)退變治療新的突破點(diǎn)。椎間盤(pán)組織的微環(huán)境與體內(nèi)其他組織存在顯著差異,其特點(diǎn)是低p H值、低葡萄糖濃度、低氧濃度和高滲透壓,其中高滲透壓是健康椎間盤(pán)組織微環(huán)境中最為獨(dú)特和重要的理化環(huán)境之一。研究發(fā)現(xiàn),在椎間盤(pán)老化和退變過(guò)程中,髓核組織細(xì)胞外基質(zhì)合成減少、降解加快,導(dǎo)致椎間盤(pán)內(nèi)的滲透壓下降明顯,并因此引起一系列病理生理反應(yīng),加速椎間盤(pán)組織內(nèi)炎癥的發(fā)生和退變的進(jìn)展。Ca

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：109 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

腰椎椎間盤(pán)退變Pfirrmann分級(jí)示意圖

- 35 -（四）大鼠髓核細(xì)胞和纖維環(huán)細(xì)胞中 CCN2 的表達(dá)水平分析我們進(jìn)一步分析了CCN2在大鼠髓核和纖維環(huán)細(xì)胞中的表達(dá)情況。圖1.4 A顯示CCN2在大鼠的髓核和纖維環(huán)細(xì)胞中均有表達(dá)，在髓核細(xì)胞中表達(dá)更高; 圖1.4 B為灰度值檢測(cè)，分析Western blot結(jié)果，顯示CCN2在髓核細(xì)胞中的表達(dá)量約為纖維環(huán)細(xì)胞中的1.5倍（P=0.0005）；接下來(lái)，我們采用免疫熒光技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證CCN2的表達(dá)（圖1.4 C），發(fā)現(xiàn)CCN2表達(dá)集中于圍繞細(xì)胞核周?chē)募?xì)胞質(zhì)中。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合CCN2啟動(dòng)子序列分析（CCN2啟動(dòng)子序列高度保守，詳見(jiàn)第二部分）和現(xiàn)有的文獻(xiàn)報(bào)道

海軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文- 56 -圖2.1 高滲透壓抑制髓核細(xì)胞中CCN2的表達(dá)A 滲透壓濃度梯度干預(yù)髓核細(xì)胞24h后，Real-time PCR檢測(cè)CCN2的信使RNA表達(dá)變化; B 滲透壓時(shí)間梯度干預(yù)髓核細(xì)胞后，Real-time PCR檢測(cè)CCN2的信使RNA表達(dá)變化; C-D 滲透壓濃度梯度干預(yù)髓核細(xì)胞24h后，Western blot法檢測(cè)CCN2蛋白表達(dá)變化并進(jìn)行灰度值分析；E 免疫熒光檢測(cè)滲透壓梯度干預(yù)髓核細(xì)胞后CCN2蛋白表達(dá)變化。實(shí)驗(yàn)獨(dú)立重復(fù)三次，所有數(shù)據(jù)都以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( ±SD)的方式呈現(xiàn)，*P<0.05，Bar=50μm。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人退變椎間盤(pán)髓核細(xì)胞體外平面培養(yǎng)的形態(tài)學(xué)及活性觀察[J]. 王鋒,鄭陳靜美,吳小濤.  中國(guó)矯形外科雜志. 2013(13)
[2]基質(zhì)金屬蛋白酶與椎間盤(pán)退變研究的新進(jìn)展[J]. 綦惠,趙丹慧,田偉.  中國(guó)脊柱脊髓雜志. 2010(01)
[3]椎間盤(pán)退變機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 陳國(guó)仙,葉道明,王萬(wàn)明.  脊柱外科雜志. 2006(03)
[4]Structure and function of aggrecan[J]. CHRIS KIANI, LIWEN CHEN, YAO JIONG WU, ALBERT J YEE, BURTON B YANG, Sunnybrook and Women’s College Health Sciences Centre and Department of Laboratory Medicine and Patobiology, 2 Department of Surgeny, Faculty of Medicine, University of Toronto, Canada.  Cell Research. 2002(01)



本文編號(hào)：2962504