[目的]對多重腦震蕩(multiple cerebral concussion,MCC)大鼠遠(yuǎn)期行為學(xué)變化進(jìn)行系列研究,評價大鼠損傷12個月后空間認(rèn)知學(xué)習(xí)與短時工作記憶、焦慮與抑郁樣情感行為、平衡運(yùn)動功能的變化狀況,以了解慢性創(chuàng)傷性腦病(Chronic Trauma Encephalopathy,CTE)行為學(xué)變化特征。[方法](1)動物分組:成年健康雄性SD大鼠120只,體重260±20g,隨機(jī)分為正常對照組(N組),一次性腦震蕩(Pure Cerebral Concussion,PCC組),二重腦震蕩(2MCC組),三重腦震蕩(3MCC組)。每組30只。(2)模型復(fù)制:應(yīng)用金屬單擺閉合性大鼠腦損傷打擊裝置,每間隔24h打擊一次,根據(jù)打擊次數(shù),分別復(fù)制一次性腦震蕩(PCC),二重腦震蕩(2MCC)和三重腦震蕩(3MCC)。(3)長期飼養(yǎng)觀察:模型復(fù)制成功后,對上述各組大鼠進(jìn)行12個月觀察飼養(yǎng)后進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。(4)應(yīng)用橫桿跑動實(shí)驗(yàn)(beam walking test,BW)實(shí)驗(yàn)和平衡木實(shí)驗(yàn)(beambalancetest，BB),評價各實(shí)驗(yàn)組大鼠平衡功能和運(yùn)動協(xié)調(diào)功能;應(yīng)用Morris水迷宮(Morris water maze,MWM)實(shí)驗(yàn),評價各實(shí)驗(yàn)組大鼠空間認(rèn)知學(xué)習(xí)與短時工作記憶:應(yīng)用高架十字迷宮(high plus maze,HPM)、曠場試驗(yàn)(open filed test,OFT)及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(forced swimming test,FST),評價各實(shí)驗(yàn)組大鼠損傷12個月后焦慮與抑郁樣行為變化。各實(shí)驗(yàn)組結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析比較。[結(jié)果](1)BB評分結(jié)果:與N組比較,2MCC和3MCC組在實(shí)驗(yàn)第1、2天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,PCC組在實(shí)驗(yàn)各時間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與PCC組比較,3MCC組在實(shí)驗(yàn)第1天的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,N組和2MCC組在實(shí)驗(yàn)各時間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與2MCC組比較,N組和3MCC組在實(shí)驗(yàn)各時間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,PCC組在實(shí)驗(yàn)各時間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與3MCC組比較,N組、PCC組、2MCC組在實(shí)驗(yàn)第1天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,N組在實(shí)驗(yàn)第2天的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,其余時間點(diǎn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。(2)BW評分結(jié)果:①穿越平衡木時間:與N比較,3MCC組在第2、3、4天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,PCC、2MCC組在各時間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與PCC組比較,N、2MCC、3MCC組在各時間點(diǎn)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與2MCC組比較,N、PCC、3MCC組在各時間點(diǎn)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與3MCC組比較,N組在第2、3、4天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,PCC、2MCC組在各時間點(diǎn)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。②穿越平衡木肢體踩空次數(shù):與N比較,3MCC組在第1、2、3、4天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,2MCC組在第1、2天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,PCC組在各時間點(diǎn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與PCC組比較,3MCC組第1、2天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,N組、2MCCC組在各時間點(diǎn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與2MCC組比較,3MCC組在第1天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,N組在第1、2天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,PCC組各時間點(diǎn)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與3MCC組比較,N組在第1、2、3、4天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,PCC在第1、2天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,2MCC組第1天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。(3)MWM測試結(jié)果:①在MWM整個實(shí)驗(yàn)中:損傷大鼠,與正常組比較,3MCC組逃避潛伏期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。②在水下平臺實(shí)驗(yàn)中:與N組比較,3MCC組在第5天逃避潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。③在水上平臺實(shí)驗(yàn)中:第6天,與N組比較,3MCC組逃避潛伏期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;第7天,與N組比較,3MCC組在逃避潛伏期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。④在無平臺試驗(yàn)中:與N組比較,3MCC組在第一象限停留時間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與N組比較,2MCC、3MCC組在第二象限停留時間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。⑤在反轉(zhuǎn)平臺試驗(yàn)中:第一天,與3MCC組比較,N、PCC、2MCC組逃避潛伏期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;與N組比較,2MCC、3MCC組逃避潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;第二天,與N組比較,3MCC組逃避潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;第三天,與3MCC組比較,N、PCC、2MCC組逃避潛伏期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。(4)FST測試結(jié)果:與N組比較,2MCC、3MCC組C行為頻次差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,PCC組C行為頻次差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05:與PCC組比較,3MCC組C行為頻次差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,N、2MCC組C行為頻次差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。(5)OFT測試結(jié)果:①周邊區(qū)域行走格數(shù):組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;②周邊區(qū)域行走時間:與N組比較,PCC、2MCC、3MCC組周圍區(qū)域時間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;其余組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;③周邊區(qū)域行走速度:各組之間相互比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;④中央?yún)^(qū)域行走格數(shù):與N組比較,PCC、2MCC、3MCC組中央格數(shù)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;其余組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;@中央?yún)^(qū)域行走時間:與N組比較,PCC、2MCC、3MCC組中央時間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,￡P(guān)0.05:其余組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;⑥中央?yún)^(qū)域行走速度:與N組比較,2MCC、3MCC組中央速度差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;其余組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;⑦周邊區(qū)域與中央?yún)^(qū)域總行走格數(shù):各組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;⑧站立次數(shù):各組之間相互比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;⑨梳理毛發(fā)次數(shù):各組之間相互比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。⑩梳理毛發(fā)時間:各組之間相互比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。(6)HPM測試結(jié)果:①開臂進(jìn)入次數(shù):與N組比較,PCC、2MCC、3MCC組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;②開臂進(jìn)入時間:與N組比較,2MCC、3MCC組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;③開臂探頭次數(shù):與N組比較,PCC、2MCC,3MCC組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;④閉臂進(jìn)入次數(shù):與N組比較,3MCC組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;④閉臂進(jìn)入時間:與N組比較,3MCC組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;⑥閉臂站立次數(shù):與N組比較,2MCC、3MCC組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;⑦閉臂梳理毛發(fā)次數(shù):與N組比較,PCC、2MCC、3MCC組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05;⑧進(jìn)臂總次數(shù):與N組比較,PCC、2MCC、3MCC組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。[結(jié)論]1.3MCC大鼠損傷12個月后,出現(xiàn)了明顯的平衡與運(yùn)動功能異常,而且比一次和二次性腦震蕩大鼠的平衡運(yùn)動、共濟(jì)協(xié)調(diào)損傷更加嚴(yán)重。2.3MCC大鼠損傷12個月后,出現(xiàn)了明顯的空間認(rèn)知與短時工作記憶行為異常,而且比一次和二次性腦震蕩大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶、短時工作記憶損傷更加嚴(yán)重。3.3MCC大鼠損傷12個月后,出現(xiàn)了明顯的焦慮樣與抑郁樣情感行為異常,而且比一次和二次性腦震蕩大鼠的情感行為損傷更加嚴(yán)重。4.綜合上述,在該實(shí)驗(yàn)研究中,間隔24h連續(xù)打擊大鼠三次,可以成功復(fù)制出大鼠遠(yuǎn)期CTE多種行為學(xué)損傷改變,故3MCC大鼠可以在傷后遠(yuǎn)期(12個月)發(fā)展成為CTE大鼠。
【學(xué)位單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R651.15
【部分圖文】：

０ｄＢ噪音作為聲音刺激條件。逡逑．２．２邋ＢＷ行為學(xué)操作程序逡逑模型復(fù)制前１天將納入ＢＢ的大鼠再進(jìn)行ＢＷ預(yù)訓(xùn)練。即開始時大鼠從暗盒前逡逑進(jìn)入暗盒，讓其在暗盒內(nèi)適應(yīng)６０ｓ之后開啟盒頂蓋取出大鼠，同時開啟噪聲發(fā)逡逑器；將大鼠放在跑道上第四障礙物起點(diǎn)處，當(dāng)大鼠頭進(jìn)入暗盒同時噪音自動關(guān)逡逑；大鼠在暗盒中停留３０ｓ后再次取出大鼠和開啟噪音，置于更遠(yuǎn)一個障礙物起逡逑點(diǎn)處，依次遞增距離，直至最后每只大鼠連續(xù)３次跨越４個障礙物進(jìn)入暗盒即可結(jié)束逡逑本次預(yù)訓(xùn)練。在模型復(fù)制前，即當(dāng)天對大鼠行為進(jìn)行鞏固性訓(xùn)練及評估，符合標(biāo)逡逑準(zhǔn)的大鼠納入ＭＣＣ模型的復(fù)制。正式實(shí)驗(yàn)時，將大鼠放在橫桿跑道起點(diǎn)，同時逡逑啟亮光或噪音刺激，為逃避刺激，動物會向暗盒方向跑動，動物跑入暗盒瞬間逡逑閉刺激，記錄動物跑入暗盒的時間，時限為６０ｓ。逡逑整個實(shí)驗(yàn)應(yīng)由同一實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行操作，同時避免其它噪音及異常光照對實(shí)驗(yàn)逡逑大鼠造成額外的刺激。逡逑邐邐

圖３邋Ｂｅａｍ邋Ｗａｌｋｉｎｇ實(shí)驗(yàn)中ＳＤ大鼠肢體踩空示意圖逡逑３．２．３邐ＢＷ行為學(xué)檢測指標(biāo)逡逑連續(xù)進(jìn)行７天測試。記錄動物跑入暗盒的時間，時限為６０ｓ，同時記錄跑動過逡逑程中肢體踩空次數(shù)。當(dāng)大鼠動態(tài)平衡功能及運(yùn)動協(xié)調(diào)功能受到損傷時，大鼠在穿逡逑越平衡木運(yùn)動過程中不能保持自身身體的平衡從而產(chǎn)生肢體踩空的現(xiàn)象，同時不逡逑能快速、靈活地跨越平衡木上的障礙物導(dǎo)致穿越整個平衡木的時間延長，超過正逡逑常大鼠的６０ｓ時限。上述檢測用以判別ＭＣＣ傷后大鼠動態(tài)平衡功能和運(yùn)動協(xié)調(diào)功逡逑能的改變。逡逑３．３邐Ｍｏｒｒｉｓ水迷宮逡逑３．３．１實(shí)驗(yàn)裝置逡逑水溫保持２６±１°Ｃ，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的燈光亮度恒定。池壁上標(biāo)有４個入水點(diǎn)，將水逡逑池等分為４個象限，在東南方向（第Ｉ象限內(nèi)）離池壁３３ｃｍ處置一恒定平臺，使平逡逑臺頂部平面低于水平面２ｃｍ。按順時針方向依次為第ＩＩ象限、第ｍ象限、第ＩＶ象逡逑

圖５大鼠在水迷宮內(nèi)活動軌跡示意圖逡逑學(xué)實(shí)驗(yàn)程序及檢測指標(biāo)逡逑損傷后飼養(yǎng)１２個月結(jié)束后，對各實(shí)驗(yàn)組大鼠進(jìn)行連續(xù)１０天的水迷宮行包括第１至第５天的水下平臺實(shí)驗(yàn)、第６和第７天的水上平臺實(shí)驗(yàn)、第７天逡逑實(shí)驗(yàn)及第８至第１０天的反轉(zhuǎn)平臺實(shí)驗(yàn)。水迷宮試驗(yàn)測試的一個重要指標(biāo)逡逑逃避潛伏期，逃避潛伏期指的是大鼠在放入迷宮后學(xué)會在１２０ｓ內(nèi)找到平逡逑的時間。大鼠在水迷宮中，因生命受到威脅，會在水迷宮中探索以逃離逡逑，當(dāng)找到安全平臺時，大鼠會根據(jù)水迷宮四周的不同的參照物記憶該安逡逑在的位置。當(dāng)大鼠再次入水時，會根據(jù)水迷宮四周的不同的參照物定位逡逑２２逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 Bei Zhang;Qiang He;Ying-ying Li;Ce Li;Yu-long Bai;Yong-shan Hu;Feng Zhang;;Constraint-induced movement therapy promotes motor function recovery and downregulates phosphorylated extracellular regulated protein kinase expression in ischemic brain tissue of rats[J];Neural Regeneration Research;2015年12期

2 江定港;趙兆;曹珍珍;于建云;徐林成;王劍;楊瑞;張桓;郭澤云;;一重與三重腦震蕩大鼠強(qiáng)迫游泳抑郁樣行為變化研究[J];中華行為醫(yī)學(xué)與腦科學(xué)雜志;2015年05期

3 徐林成;曹珍珍;蔡永峰;江定港;于建云;楊瑞;張桓;;不同打擊間隔的三重性腦震蕩大鼠空間認(rèn)知行為變化研究[J];昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2014年10期

4 宋廣青;孫秀萍;劉新民;;大鼠物體識別實(shí)驗(yàn)方法綜述[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2013年07期

5 于建云;李俊祥;李娟娟;郭澤云;高林波;許冰瑩;吳春云;;三重腦震蕩鼠模型建立及組織病理學(xué)動態(tài)改變觀察[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2010年04期

6 朱喬;于建云;曹珍珍;郭澤云;楊力;張桓;王瑞春;;一次性與三重性腦震蕩鼠八臂迷宮逆行性遺忘變化研究[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2010年02期

7 于建云;李俊祥;郭澤云;趙小林;趙旭東;;實(shí)驗(yàn)大鼠輕中型閉合性腦損傷昏迷指標(biāo)與分級標(biāo)準(zhǔn)[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2008年01期

8 江樂盛;于建云;高林波;石泉;李俊祥;李娟娟;;多重腦震蕩對大鼠空間認(rèn)知行為的影響[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2007年05期

9 高林波;于建云;石泉;江樂盛;李娟娟;李俊祥;郭澤云;馮忠堂;;多重腦震蕩鼠平衡運(yùn)動與認(rèn)知行為的變化[J];中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué);2006年11期

10 高林波;于建云;蘭光明;郭麗萍;趙旭東;;創(chuàng)傷性腦損傷動物行為學(xué)評價方法研究進(jìn)展[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2006年02期

本文編號：2834953